全文获取类型
收费全文 | 16341篇 |
免费 | 617篇 |
国内免费 | 947篇 |
专业分类
林业 | 690篇 |
农学 | 1247篇 |
基础科学 | 184篇 |
797篇 | |
综合类 | 7940篇 |
农作物 | 800篇 |
水产渔业 | 583篇 |
畜牧兽医 | 3598篇 |
园艺 | 859篇 |
植物保护 | 1207篇 |
出版年
2024年 | 164篇 |
2023年 | 514篇 |
2022年 | 616篇 |
2021年 | 673篇 |
2020年 | 526篇 |
2019年 | 672篇 |
2018年 | 360篇 |
2017年 | 484篇 |
2016年 | 665篇 |
2015年 | 587篇 |
2014年 | 803篇 |
2013年 | 804篇 |
2012年 | 1113篇 |
2011年 | 1184篇 |
2010年 | 1066篇 |
2009年 | 1117篇 |
2008年 | 1250篇 |
2007年 | 956篇 |
2006年 | 821篇 |
2005年 | 706篇 |
2004年 | 493篇 |
2003年 | 406篇 |
2002年 | 332篇 |
2001年 | 288篇 |
2000年 | 203篇 |
1999年 | 167篇 |
1998年 | 149篇 |
1997年 | 97篇 |
1996年 | 113篇 |
1995年 | 97篇 |
1994年 | 73篇 |
1993年 | 62篇 |
1992年 | 69篇 |
1991年 | 98篇 |
1990年 | 65篇 |
1989年 | 67篇 |
1988年 | 12篇 |
1987年 | 8篇 |
1986年 | 8篇 |
1985年 | 3篇 |
1984年 | 3篇 |
1983年 | 6篇 |
1980年 | 2篇 |
1977年 | 1篇 |
1963年 | 1篇 |
1955年 | 1篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 15 毫秒
111.
为了获得具有活性的鸭圆环病毒Cap蛋白,笔者通过PCR方法获得鸭圆环病毒I型完整Cap基因片段,将其克隆到昆虫杆状病毒基因组中,获得重组杆状病毒qBac-P-Cap,其病毒效价TCID_(50)可以达到9.25。重组杆状病毒可在悬浮Sf9细胞中表达具有活性的鸭圆环病毒Cap蛋白。研究表明蛋白表达最佳收获时间为120 h,纯化后蛋白表达量可以达到200μg/mL。这为进一步研究Cap蛋白功能和大规模制备鸭圆环疫苗奠定了基础。 相似文献
112.
<正>湖北省农业科学院发现一类新型化合物,属国际上首次发现,是做多种生物农药的重要成分。该化合物是先从土壤中分离出放线菌,发酵后找到活性菌,历经数百次实验后,从中筛选提取到的两种高纯度化合物。这在国际上属于重大发现,因此该化合物专门以生物农药工程研究中心所在大楼诺沃巢来命名,全名为诺沃霉素A和B。目前,这两种化合物已经申请 相似文献
113.
多酶粉主要含纤维素酶,半纤维素酶,果脯酶,蛋白酶,葡萄糖苷酶,淀粉酶,活性蛋白酵母。在肉牛饲养生产上具有降低疾病的发病率,使肉牛增重明显的增加的良好效果。 相似文献
114.
115.
用已构建好的重组表达载体pET30-IL2转化BL-21E.coli,挑取单克隆,利用诱导剂IPTG诱导表达;通过改变诱导剂的浓度、诱导的时间来摸索最佳诱导条件,在最佳诱导条件下大量表达,并利用镍层析柱纯化重组蛋白,用MTS法测定其生物学活性。结果表明,表达产物经SDS-PAGE分析,表达出25ku的融合蛋白,表达产物主要以包涵体的形式存在,最佳的诱导剂浓度为0.1mM,最佳的诱导时间为4h;对表达产物的包涵体处理后,用镍琼脂糖凝胶FF纯化,所得蛋白的纯度约在90%以上。通过透析除去部分尿素,复性后在体外利用MTS法检测其生物学特性,结果表明其仍具有较好的生物学活性,这为进一步大量制备和研究猪IL-2重组蛋白奠定了基础。 相似文献
116.
《蚕业科学》2011,(2)
<正>1重组蛋白表达系统及其优化1.1 Ai-chun Zhao,Tian-Fu Zhao,Yuan-Song Zhang,Qing-You Xia,Cheng Lu,Ze-Yang Zhou,Zhong-Huai Xiang,M.Nakagaki.New and highly efficient expression systems for expressing selectively foreign protein in the silk glandsof transgenic silkworm.Transgenic Research,2010,19(1):29-44 相似文献
117.
118.
AM79 aro A(WO/2009/059485)基因是从草甘膦高度污染的土壤中克隆的、具有我国自主知识产权的新型草甘膦抗性基因,具有重要应用价值。为进一步解析AM79 EPSPS蛋白的作用机制,本研究对此蛋白的活性位点进行了研究。进化树分析显示AM79 EPSPS属于Ⅰ型EPSPS。序列比对结果表明AM79 EPSPS中第107位的丙氨酸(Ala),第114位的苯丙氨酸(Phe),第355位的Ala和第356位的组氨酸(His)是特异的。采用重叠延伸PCR介导的核苷酸定点突变技术,对这些保守的氨基酸位点进行定点突变。将AM79 aro A及其突变基因转入大肠杆菌(Escherichia coli)aro A缺陷型菌株ER2799中,并进行草甘膦抗性鉴定。结果显示,Phe114、Ala355和His356等氨基酸的突变,使AM79 EPSPS蛋白的草甘膦抗性降低,表明这些氨基酸位点对于维持AM79 EPSPS高抗草甘膦的能力是必需的。同源建模结果表明,这些保守氨基酸位点的突变,使AM79 EPSPS蛋白的结构发生变化,这可能是导致突变蛋白草甘膦抗性能力降低的原因。两个Ⅰ型EPSPS(荧光假单杆菌(Pseudomonas fluorescens)G2EPSPS和拟南芥(Arabidopsis thaliana)EPSPS)对应氨基酸突变后,其草甘膦抗性没有明显变化,表明AM79 EPSPS中几个特异的氨基酸位点的功能在Ⅰ型EPSPS中并不是保守的。本研究结果为解析AM79 EPSPS高抗草甘膦的作用机理及对AM79 EPSPS进行定向进化提供了理论依据。 相似文献
119.
120.