吖啶橙免疫荧光菌团法对肉品和鲜乳中小肠结肠耶氏菌快速检出的实验研究

对应用吖啶橙免疫荧光菌团法(培养法和沉淀法)快速检出小肠结肠耶氏菌的敏感性和特异性进行了实验研究,进而应用先增菌再菌团法的检测程序,对肉品模拟标本和198份肉品和鲜乳实际样品进行了检测,并与常规分离培养法作了对比,证明菌团法于13.5×10~2～10~3个攻/ml以上时,出现典型荧光菌团,与13种杂菌不形成菌团交叉;与杂菌比在1:400以下菌团形成不受干扰;与常规培养法的阳性检出率无显著差异(P>0.05);40h以内即可获得结果,较常规分离培养时间(一般4d左右)大为缩短。     

吖啶橙标记大肠杆菌的用量问题

目的:观察吖啶橙标记大肠杆菌作指示菌的用量。方法:用大肠杆菌(ATCC 25922)接种于LB培养基后加入1×1-0 3、1×10-4、1×10-5g/mL的吖啶橙(培养基的最终质量浓度),在水浴恒温中振荡培养过夜;菌液含菌量采用B row n氏标准比浊管测定;最后用荧光显微镜检查标记效果。结果:培养基中吖啶橙终质量浓度:1×10-3g/mL时含菌量为1亿/mL,1×10-4g/mL时含菌量为6亿/mL,1×10-5g/mL时含菌量为40亿/mL。结论:用吖啶橙标记大肠杆菌做指示菌,LB培养基中的质量浓度以1×1-0 5g/mL为佳,菌液含菌量多(菌数达2×109/mL),细菌生长旺盛,且在荧光显微镜下呈绿色,易观察。     

猪附红细胞体不同诊断方法的比较

附红细胞体病是由附红细胞体寄生于人和多种动物的红细胞表面、血浆及骨髓内的一种以红细胞压积降低、血红蛋白浓度下降和白细胞增多、贫血、黄疸、发热为主要临床特征的人畜共患传染病。目前猪的附红细胞体病己越来越引起我国养猪者的重视。近年来,我国猪附红细胞体病的发生和流行呈明显的上升趋势,有些省份为暴发性流行,尤其是对仔猪的危害更为严重。     

吖啶橙诱变提高枯草芽孢杆菌G3抗真菌活性

 枯草芽孢杆菌G3菌株正在登记为防治番茄叶霉病的生物杀菌剂。为改进该菌的抗真菌活性,用诱变剂吖啶橙诱变得到20个突变株,其中5个突变株Ga1、Ga8、Ga12、Ga1和Ga19在肉汤和PDA平板上形成粘液状菌落,完全不同于出发菌株。PDA平板抑菌圈试验,突变株对番茄叶霉菌和黄瓜灰霉菌产生比野生株G3更大的透明抑菌圈。其中Ga1菌株对番茄叶霉菌和黄瓜灰霉菌的抑菌带宽分别是G3的1.71和1.69倍。用番茄叶霉菌为指示菌的生物测定结果表明,突变株固体培养物或摇瓶培养物以最小抑菌浓度(M IC)和有效抑菌中浓度(EC₅₀)表示的抗真菌活性皆高于G3菌株。抗真菌活性以Ga1 > Ga8 > Ga19 > Ga12 > Ga13 > G3为序。参试菌株培养物的抗真菌活性与菌量(CFU)不相关,而与甲醇抽提代谢物的干重,尤其是伊枯草菌素A含量呈一定的正相关。突变株Ga1抗真菌活性最强,固体培养物或摇瓶培养物均是G3的3倍左右。摇瓶培养时,伊枯草菌素A动态分泌曲线表明,Ga1菌株产生比G3更多的伊枯草菌素A。Ga1菌株增强了合成伊枯草菌素A的能力。     

毛竹组织荧光染色显微观察方法的研究

采用3种不同的荧光染料,对不同发育阶段的毛竹组织进行染色处理,分析其染色效果。应用荧光显微技术,DAP I(4,′6-二脒基-2-苯基吲哚)的着色能力强,呈现出明亮的浅蓝色荧光,细胞核的荧光增强,尤其在组织细胞生长发育早期,细胞基本处于分生状态,细胞核和核仁都较大,染色效果好。苯胺蓝染色对基本组织细胞内的淀粉颗粒效果好,荧光强度与淀粉颗粒的大小有关。吖啶橙染色方法可以使毛竹不同的组织细胞和成分呈现不同的荧光,从而将它们明显地区分观察。不同的制片方法对染色也有影响。     

吖啶橙和二甲基亚枫对蚕胚胎发育影响的分析

蚕种解除滞育后,对不同发育阶段的蚕卵涂抹吖啶橙或二甲基亚枫溶液后保护至孵化,调查对蚕胚胎发育的影响,结果蚕胚胎在其发育进程中对吖啶橙涂抹卵表面有2个特别敏感的时期,一是在转青期(催青经过第8天)最敏感,处理区的孵化率只有51.22%,二是在催青的第3天,孵化率为56.40%。提取药物处理过的蚕卵蛋白,经SDS-PAGE电泳,转青期的蚕卵蛋白出现某些蛋白泳带的减少或条带染色有颜色深浅的差异。经双向电泳分析,处理区与对照区有4个蛋白质点的差异。     

犬附红细胞体病PCR检测方法的建立及与应用

根据Genbank中已经发表的犬附红细胞体16sRNA基因序列设计合成一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出一条与目的片段大小一致,约630 bp的基因片段,建立了PCR快速检测方法。以PCR检测方法及瑞氏、姬姆萨、吖啶橙染色法为基础对20例犬附红细胞体病例进行检测,比较四种方法的检出率。结果表明,建立的PCR检测方法的检出率略高于吖啶橙染色,明显高于瑞氏、姬姆萨染色,可用于犬附红细胞体的快速诊断和流行病学调查。     

吖啶橙诱变提高蛹虫草虫草素含量的研究

蛹虫草的活性成分与冬虫夏草基本相同,常被用作冬虫夏草的替代品。虫草素是虫草属特有的次生代谢产物,具有很高的药用价值。为提高虫草素含量,应用吖啶橙对蛹虫草无性型孢子进行诱变,筛选虫草素含量高的突变菌株,并对获得的稳定遗传的突变株进行再诱变,经二次诱变得到的突变菌株其虫草素含量可达290.60mg/L,比初发菌株提高了7.4倍。     

用吖啶橙处理法制备猪高分辨G带染色体

用吖啶橙处理法制备猪高分辨Ｇ带染色体熊统安赵雅心李奎李明军彭中镇（华中农业大学畜牧兽医学院，武汉４３００７０）ＨＩＧＨ－ＲＥＳＯＬＵＴＩＯＮＧ－ＢＡＮＤＩＮＧＣＨＲＯＭＯＳＯＭＥＳＯＦＰＩＧＳＢＹＵＳＩＮＧＴＨＥＡＣＲＩＤＩＮＥＯＲＡＮＧＥＴＲＥＡ...