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11.
聚合酶链反应检测猪细小病毒的研究 总被引:17,自引:1,他引:17
本研究成功地建立了检测猪细小病毒(PPV)的聚合酶链反应(PCR)技术。以16个核苷酸引物对首次完成了PPVDNA结构蛋白VP1编码区228bp片段的扩增。同样数目的另一引物对,也成功扩增了Vp2编码区158bpDNA片段。PPVBM-1株与其它国内分离株(广西株、天津株和哈尔滨株)均出现相同扩增结果。琼脂糖凝胶电泳显示了特异条带(VP1228bp.Vp2158bp),而伪狂犬病病毒、犬细小病毒均未扩增,表明了本方法的特异性。同时,限制性内切酶分析(Vp1228bp及Vp2158bp分别含单一PvuⅡ、EcoRⅠ位点),也证实了特异性。本方法敏感性高,可检出10fg模板DNA。既可作样品的快速检测,又能检查细胞系的污染。具有特异、简便、快速的优点。 相似文献
12.
用聚合酶链反应检测犬传染性肝炎的研究 总被引:3,自引:0,他引:3
应用聚合酶链反应(PCR)对人工感染犬传染性肝炎病毒(ICHV)的犬进行定期尿检,并以血凝和血抑制试验及病毒分离进行比较。结果表明,用PCR方法可以快速检出排毒的犬,其灵敏度是血凝效价的上百倍。 相似文献
13.
应用聚合酶链式反应(PCR)技术检测牛结核病 总被引:2,自引:0,他引:2
本试验应用聚合酶链式反应(PCR)技术原理,研究建立了牛结核病PCR检测方法。试验结果表明:该方法的敏感性测定模板浓度为30.4pg,特异性测定牛结核分枝杆菌在478bp出现特异扩增带。通过对298头份牛奶和229份牛全血样本进行检测,检出阳性牛奶样本33份,阳性全血样本43份;鲜牛奶样本同时还用罗氏培养后采取PCR方法进行检测,检出阳性样本34份;全血样本同时还用PPD进行皮内试验,检出阳性样本52份。试验表明:牛结核病PCR检测方法具有敏感性高、特异性强、快速等优点,为牛结核病的早期诊断提供了科学依据。 相似文献
14.
15.
沙门氏菌在饲料中的检测对防止畜禽和人类沙门氏菌污染具有十分重要的意义,本文重点介绍了传统沙门氏菌检测方法和应用了分子生物、生物化学,免疫学等一些先端的学科的方法,希望随着我国检测的手段不断提高会有更多、更快、更准确的方法运用到实际的检测中去。 相似文献
16.
选择覆盖肾综合征出血热病毒(HFRSV)膜蛋白(MP)基因的保守区核苷酸序列合成2对引物,采用异硫氰酸胍一步抽提RNA,建立了RT-PCR检测鼠体恙螨及游离恙螨体内HFRSV-RNA的方法,扩增产物经凝胶电泳及斑点印迹杂交证实具有特异性。结果显示,HFRSV抗原阳性鼠体恙螨50只组、10只组、游离螨50只组,HFRSV抗原阳性鼠肺1000mg、500mg组经RT-PCR检测为阳性;HFRSV抗原阳性鼠体恙螨5只组,HFRSV抗原阴性鼠体恙螨50只和10只组,游离螨10只和5只组,鼠肺HFRSV抗原阳性100mg组均未见有明显扩增带。进一步用套式反转录-聚合酶链反应(NestedRT-PCR)检测,在RT-PCR未测出HFRSV-RNA的各组中均检测有HFRSV-RNA。结果表明NestedRT-PCR具有高特异、高敏感的特点,可用于检测恙螨体内微量HFRSV-RNA,为确认恙螨作为HFRSV的传播媒介提供了分子生物学证据。 相似文献
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