猪β防御素-1基因乳腺特异性表达载体的构建

为构建标记基因可去除的β防御素-1(pBD-1)基因乳腺特异性表达载体,利用RT-PCR方法从猪脾脏中克隆获得pBD-1基因,再插入乳腺特异性表达骨架载体pBC1-neo中;经PCR、酶切电泳以及测序鉴定,确认成功构建出乳腺特异性表达pBD-1的载体。进一步将上述功能片段亚克隆至能将标记基因全部去除的骨架载体MCS-3s-loxP-GFP中,成功构建了一种筛选标记可全部去除的乳腺特异性3s-loxP-GFP-pBC1-pBD1转基因载体。该载体为研究pBD-1蛋白的抗菌活性、抗菌机制,以及创制乳腺高效表达pBD-1的转基因猪育种新材料和通过哺乳以提高新生仔猪抗病力奠定了基础。     

煤油加氢补充精制反应器焊接方法

在石油加氢装置中Cr-Mo系低合金耐热抗氢钢得到广泛的使用。应该注意Cr-Mo钢存在回火脆性受杂质元素的影响为Sb>P>Sn>As,由于Cr元素促进杂质元素晶界偏聚,所以易出现第二类回火脆性。为满足使用性能,应注意以下方面:(1)提高钢的纯净度。(2)使用热处理状态为正火+回火。(3)严格控制Sb、P、Sn、As等有害杂质含量。     

葡萄试管苗的反应器培养及其移栽过程中气孔变化

以葡萄组培茎段为外植体,利用气升式生物反应器接触法培养,研究了不同蔗糖浓度对葡萄苗生长的影响,同时在栽培后调查成活率并观察气孔行为,以寻找一种简单、低成本及规模化培养优良葡萄苗的模式。结果表明:当蔗糖浓度为20g/L时苗的叶片颜色浓绿,节数多,苗和根的生长均良好。将反应器培养的葡萄苗分别移栽到蛭石和珍珠岩不同比率的移栽基质中,发现当蛭石量多时有利于葡萄苗的成活,单独使用蛭石的效果最佳,移栽30d后成活率达到100%;对反应器培养葡萄苗移栽过程中气孔进行观察,移栽后10d起部分气孔开始恢复关闭功能,14d后大部分(90%以上)气孔可以关闭,所以在对反应器葡萄苗进行移栽时,0~10d需进行保湿措施,14d以后可进行常规管理。     

强化混凝除磷技术的研究进展

磷是造成水体富营养化的主要原因之一,除磷技术的研究倍受人们关注.分析了传统化学除磷铝盐、铁盐混凝剂及其絮凝反应器的特性,介绍了新型混凝剂、新型混凝工艺及新型絮凝反应器等强化混凝技术在除磷方面最新的应用与研究进展,并对限制强化混凝除磷技术突破性进展的关键性问题及未来主要研究方向进行了探析,提出了高效低耗强化混凝除磷技术值得进一步研究的思路.     

人溶菌酶基因的克隆及其在真核菌株中表达质粒pPIC9K/hLZM 的构建

利用RT—PCR技术，从人的胎盘组织中直接扩增出溶菌酶基因(hLZM)的cDNA全序列，插入到质粒pPIC9K上，转化巴斯德毕赤酵母KM71，通过G418快速筛选，构建出能够高效表达人溶菌酶基因的重组毕赤酵母菌株，作为真核细胞反应器，用以生产人溶菌酶。     

基于CFD数值模拟的平板式微藻光生物反应器比较

为进一步提高微藻光生物反应器的混合与传质性能,在已有多节隔板平板式光生物反应器的基础上设计多级进气,新建立了多级进气多级隔板平板式光生物反应器。构建了普通反应器、多节隔板反应器、多级进气反应器并利用计算流体动力学模拟研究了3种反应器的流动与传质特性。结果表明,模拟结果与相关试验测量值吻合良好,多级进气结构可以带来更明显的级内环流现象,从而使该反应器在液体平均速度、死区比、湍动能、湍动能耗散率、气含率、液相传质系数等性能参数上较前2种反应器均有很大提高。在适合微藻培养的通气率0.4~0.8(每分钟通入反应器的气体体积与反应器实际装液体积之比)内,该反应器的混合及传质性能均表现优异。该工作为平板式生物反应器的设计及优化提供了新的方向。     

生物质快速热裂解主要参数对产物产率及其分布的影响

在生物质喂入率为0.8～2.0 kg·h^-1的流化床上以木屑为原料进行了快速热裂解试验，系统研究了木屑热裂解过程中的流化床反应器温度、生物质粒径和气相滞留期三个主要参数对热裂解产物产率的影响。结果表明，当反应器温度在450～600℃之间变化时，在500℃条件下，生物油产率最高，其值为53.33%，而木炭及不可冷凝气体产率分别为8.97%和37.70%。当温度为500℃，木屑粒径在0.90 mm以下时，粒径在0.45～0.60 mm范围内的生物油产率最大，达到58.23%，这时木炭产率为8.23%。对粒径小于0.20 mm的木屑在温度500℃，气相滞留期0.80, 1.20, 1.50 s三个量级上的热裂解表明，气相滞留期为0.80 s时，生物油产率达到最大值为62.60%。但是，当气相滞留期较长时(1.50 s)，生物油产率稍有下降。生物油是极性有机物与水的可溶混合物。因此，木屑快速热裂解生产液体燃料具有较大的潜力。     

无抗性标记的人白血病抑制因子打靶载体的构建及表达

为了实现人白血病抑制因子基因(hLIF)在奶山羊乳腺上皮细胞中的稳定表达,本实验利用条件重组元件LoxP序列、山羊β-酪蛋白5'和3'同源臂、正负向筛选标记基因和hLIF基因构建hLIF基因打靶载体。脂质体法转染奶山羊(capra hircus)乳腺上皮细胞,进行遗传霉素(G418)和丙氧鸟苷(GANC)筛选获得同源重组的阳性克隆,并通过PCR、实时定量PCR和Western blot检测阳性克隆中hLIF基因的表达情况。酶切和测序分析结果显示,实验成功构建了hLIF基因打靶载体pLoxP-NT53L。阳性克隆经PCR、实时定量PCR和Western blot均检测到了目的条带。表明打靶载体pLoxP-NT53L已经成功整合至山羊β-酪蛋白基因座中,并能在奶山羊乳腺上皮细胞中特异性表达hLIF蛋白。为无抗性标记的转hLIF基因奶山羊生产提供了打靶载体。     

稻壳热解模型建立与应用

生物质连续热解工艺是适合工业化生产的高效、合理的处理方式,该文基于稻壳在升温速率为20～40?℃/min,反应终温为800℃的热分析试验数据,建立了稻壳热解过程的分段反应模型并获得了反应动力学参数,其中失水预热解阶段满足N阶反应,主热解阶段满足J-M-A方程。对所建模型在建模升温速率范围内、外进行了检验,发现模型计算结果与试验数据相近,模型计算误差不大于2.35%,说明模型具有较广泛的适用性,为热解反应器的设计提供了理论依据。根据稻壳常规热解下失水预热解和主热解反应过程的模型计算结果,设计了变螺距生物质连续热解反应器,并以稻壳粉末为原料进行了参数试验,结果表明,该反应装置能实现连续、稳定热解,但由于实际升温不是理论上的线性升温过程,导致连续热解试验结果与模型计算结果和热重试验结果间存在一定差异。     

水稻种子表达人源性胰岛素样生长因子1基因

人源性胰岛素样生长因子1(hIGF-1)是一类在许多人类疾病治疗中都具有重要作用的细胞因子.本研究成功构建了以水稻种子高效表达的谷蛋白Gti基因5.3kb启动子引导hIGF-1基因(higf-1)的表达载体:pCAMBIA 1301-5.3kbGt1-higf-1-nos.在此基础上,将构建好的表达载体,通过根癌农杆菌介导法转化水稻,获得转基因植株.通过对转基因水稻植株叶片总DNA的PCR检测,初步确定表达载体的T-DNA区段已经成功整合入水稻基因组中.目的基因RT-PCR检测结果显示,higf-1在转基因水稻种子中能够正常转录.开展本试验为利用水稻及其他单子叶植物表达IGF-1研究奠定了基础.