猪场环境大肠杆菌qnrA和aac(6’)-Ib基因检测

为了解质粒介导的喹诺酮类抗生素耐药基因qnrA、aac(6’)-Ib-cr在猪场环境大肠杆菌的流行分布及变异情况,从贵州省规模养猪场空气、污水、粪便和土壤样本中分离、鉴定大肠杆菌57株,PCR检测qnrA和aac(6’)-Ib基因,测序分析aac(6’)-Ib-cr基因变异体,并用药敏纸片琼脂扩散法测其对喹诺酮类和氨基糖苷类的耐药性。结果表明:57株大肠杆菌均未携带qnrA基因;8株检出aac(6’)-Ib基因,分别来自污水、粪便和土壤样本,且介导对喹诺酮类和氨基糖苷类抗生素的广泛耐药性。E.coli3和E.coli4在第75(A)、76(G)或488位(A)碱基缺失;E.coli5在第222位(A→T)变异,E.coli1、E.coli2、E.coli3、E.coli4、E.coli5、E.coli7和E.coli8在223位(T→C)和454位(G→T)变异;E.coli3、E.coli4在第492位有A、C碱基增添。说明贵州省规模养猪场肠杆菌科细菌qnrA基因携带率较低,但存在aac(6’)-Ib-cr基因。     

玉林市猪伪狂犬病病毒野毒株感染情况调查

为评估近年来玉林市猪伪狂犬病流行情况,于2010年—2012年分别对不同来源于散养户、规模场、种畜场的1 441份血清样品进行gE-ELISA和PCR检测,对与本实验免疫效果相关的免疫次数、疫病净化、疫苗使用等因素进行调查分析。发现玉林市猪伪狂犬病病毒野毒株感染情况:免疫三次以上的猪群,免疫效果明显,注射猪伪狂犬TK/gE—双基因缺失疫苗的猪群阳性率比注射其它品种的疫苗要低。     

猪瘟的诊断

猪瘟(Swine fever,SF)在欧洲称为古典猪瘟(Classicalswine fever,CSF),是猪的一种高度传染性疾病,其特征为急性经过、高热稽留、死亡率很高和小血管壁变性引起的出血、坏死等变化。病原为猪瘟病毒(CSFV),是一种小RNA病毒,属黄病毒科(Flavivirisae)瘟疫病毒属(pestivirus)。猪瘟在世界上各养猪国家都有流行,因其传染性强、病死率高,严重威胁着养猪业的发展。由于猪瘟具有高度接触传染性和巨大的经济破坏力,OIE将其列为A类传染病。近几年来,全世界猪瘟由过去的大流行变为波浪式或无规律可循的地区散发性流行。以温和型猪瘟为主,多局限…     

鸡传染性法氏囊病继发大肠杆菌病的病因及防治

鸡传染性法氏囊病是由双RNA病毒科禽双RNA病毒属传染性法氏囊病毒引起的一种高度接触性传染病。这种传染病的传播范围广、发病快、死亡率高,该病的发生可以造成雏鸡的免疫抑制,所以一经发病会使雏鸡机体免疫力下降,很容易引起其他疾病的继发感染。大肠杆菌广泛分布于自然界中,是一种条件性致病菌,最容易引起继发感染。给我国的养鸡业造成了巨大的损失、     

猪圆环病毒2型(PCV2)感染:临床症状、病理学及实验室诊断

临床症状和病理学特征仍然是怀疑和诊断PCV2感染相关疾病的基石。随着时间推移,对该病毒感染的临床病理认识不断增加。从最初报道的断奶仔猪多系统衰竭综合征,到一些肠道、呼吸道和繁殖紊乱都与PCV2有关。一种免疫复合性疾病,猪皮炎与肾病综合征也与这种病毒感染有关。这些疾病一起被归入猪圆环病毒病(PCVD)或猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)。感染PCV2的猪发展成为PCV2亚临床感染或临床PCVD/PCVAD的具体机制还有待阐明,但是对田间基本样本的基于临床、解剖和组织病变的观察有助于揭示该病毒感染的致病机理。本综述目的是更新现有对于PCV2感染的临床、病理以及它们的诊断方法的认识。此外还提出了统一的PCVD/PCVAD命名方法的提议,并给出了确切的诊断标准。     

蓝狐多重感染的病原学及主要病原的分子生物学特性

2006-2007年期间,山东6地区规模化毛皮动物养殖场出现母狐空怀、流产,幼狐呼吸困难,鼻孔出血,气喘并伴有腹泻、死亡等症状,为探明病因,对发病场进行流行病学调查和送检的236份病料组织进行病原学检查,结果表明造成该病的主要原因是由绿脓杆菌(Pseudomonas aerudinosa)、沙门菌(Salmonella)、大肠杆菌(Escherichia coli)和普通变形杆菌(Proteus vulgaris)共感染所致.这4种细菌单独感染、二重感染、三重感染和四重感染的平均感染率分别为50%、45.8%、3.8%和0.4 0%.在分离的4种细菌中以绿脓杆菌的分离率为最高,达到86%,对该痛原又进行(G+C)mol%、16SrRNA序列同源性和系统发育分析,构建了包括9株邻近种属细菌在内的系统发育树,其中与绿脓杆菌(AJ249451)同源性最高,为99.2%,进一步确定该病原菌属于假单胞菌属中绿脓杆菌.本研究为目前规模化毛皮动物养殖场蓝狐病的原因提出了新的思路,为疾病的防治提供了依据.     

伏马菌素FB2间接竞争ELISA检测方法的建立

用卵清白蛋白与伏马菌素B2的偶联物(OVA-FB2)做包被抗原,标准伏马菌素B2(FB2)做竞争抗原,初步建立了检测玉米粉中伏马菌素B2的间接竞争ELISA方法.优化后的ELISA检测方法,线性范围为7.81～250μg/L,最低检测限为6.09 μg/L.曲线回归方程为y=-47.038x+120.25,R2=0.983 5,批内平均变异系数为3.92%,批间平均变异系数为5.53%.对玉米粉加标样品测定结果表明,利用甲醇-EDTA法提取样品的平均加标回收率达到了96.11%.     

费县养鸡场新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体监测

本次检测费县某蛋鸡场血样30份,分离血清,通过微量血凝及血凝抑制试验(HI)进行新城疫、禽流感H5亚型(Re-5株)抗体监测。结果表明,该鸡场新城疫HI抗体效价≥5log2的占87%,新城疫免疫合格;而禽流感抗体效价≥5log2的占67%,禽流感H5亚型免疫失败,鸡场必须补免或重免禽流感H5亚型二联油乳剂灭活苗。     

猪肝组织核酸的分离纯化及鉴定

利用盐溶法分离制备动物基因组DNA和RNA的方法,并对实验过程进行改良和分析。实验中选用新鲜猪肝作为实验材料,根据核糖核蛋白与脱氧核糖核蛋白在一定浓度的氯化钠溶液中的溶解度不同进行分离,利用SDS裂解,氯仿、异戊醇抽提,分离得到猪肝脏中基因组DNA和RNA;同时,通过脱氧核糖和核糖的显色反应定性区分了DNA和RNA;实验最后利用紫外分光光度法和二苯胺法定量测定了DNA样品中的DNA的含量。