甘露糖阳性选择系统的建立及在番茄转化中的应用

利用PCR克隆了大肠杆菌(Escherichia coli)6-磷酸甘露糖异构酶基因（pmi)并进行了序列测定。将该基因替换植物表达载体pAMBIA2301中的卡那霉素抗性基因，构建了以pmi为选择标记基因的植物表达载体pPMI，并导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105中。研究了甘露糖对番茄(Lycopersicum esculentum)生长和生根的影响及叶盘对甘露糖的敏感性。通过根癌农杆菌介导对番茄进行遗传转化，获得转化番茄再生植株，并对转化植株进行了PCR扩增检测。研究表明以甘露糖阳性选择系统在番茄遗传转化中应用是可行的。     

利用卡那霉素间接鉴定转基因抗虫棉的研究

研究了利用卡那霉素间接鉴定转基因抗虫棉的方法。结果表明,在棉花苗期使用8000mg/kg卡那霉素溶液处理子叶,或者在蕾期使用6000mg/kg卡那霉素溶液处理棉株顶部第2片展开叶,7～9d后非转基因棉株的叶片点液处出现黄色斑块,而转基因抗虫棉的叶片仍为正常绿色,从而简便有效地鉴别出转基因抗虫棉。经网室接虫测试和室内饲养生物学测试方法验证,该方法结果准确。     

卡那霉素叶片涂抹法筛选转基因大豆植株的有效性

以吉林小粒1号大豆为材料进行卡那霉素梯度涂抹试验,确定卡那霉素筛选的最佳浓度和筛选临界观察时间,并在此基础上,对转基因大豆植株(含np tⅡ基因)分离后代进行卡那霉素涂抹检测和PCR检测,检验2种方法的符合度。结果表明,卡那霉素的最佳筛选浓度为500 m g/L,观察时间以3 d为宜;抗和高抗卡那霉素植株2种检测方法的符合度为90.8%,感和高感卡那霉素植株的符合度为87.1%。可见,卡那霉素叶片涂抹法完全可以用于大豆转基因植株的快速筛选。     

农杆菌介导法将FPFJ基因导入油菜的研究初报

将拟南芥早花基因FPF1（flowering promoting factor 1)插入双元高效表达载体pBI 121中,构建了植物表达载体pBIUbi-FPF1。以“双低”甘蓝型晚熟油菜品种2000 F4102,2000 F4153的下胚轴为转化受体,通过农杆菌介导的遗传转化获得抗卡那霉素的再生转基因植株,并探讨了影响油菜再生频率以及遗传转化效率的几个因素。对部分经卡那霉素筛选得到的再生植株进行了PCR检测,其中70％以上的卡那霉素抗性植株表现阳性,初步证明FPF1基因已整合到油菜细胞核基因组中。     

益生芽孢杆菌B.licheniformis29质粒Pbl29性质的研究

质粒pBL29为闭合环状质粒，酶切分析证明质粒pBL29有大量的单酶切位点，如EcoR I、Sma I、Hind Ⅲ、Bgt Ⅱ、Pst I、Xba I、BamH I等，并根据限制性酶切各片段的分子量作出了质粒pBL29的内切酶图谱。对质粒pBL29进行测序和分析，证明了其大小为3711bp，具有大量的单酶切位点、编码卡那霉素抗性基因以及富含A／T序列的复制起点。     

转基因抗虫棉叶围卡那霉素抗性细菌种群动态及nptⅡ基因漂移研究

 【目的】研究转基因抗虫棉叶围卡那霉素抗性细菌的种群动态变化，并监测nptⅡ基因向叶围细菌漂移的情况。【方法】采用常规培养的方法分析转基因抗虫棉33B、SGK321和GK12、受体棉33、石远321和泗棉3号叶围具有卡那霉素抗性的细菌在整个生育期的种群动态变化，并以质粒pBI121为对照，根据nptⅡ基因设计特异性引物，采用菌落PCR方法对分离的叶围卡那霉素抗性细菌进行nptⅡ基因漂移监测。【结果】6个棉花品种的叶围卡那霉素抗性细菌总数量和群落多样性指数随着时间的变化，在同一棉花品种不同采样时间之间差异显著，而同一采样时间抗虫棉和对应的受体棉间多数差异不显著。在转基因抗虫棉品种SKG321，GK12及受体棉泗棉3号的叶围细菌中发现阳性片段。【结论】叶围卡那霉素抗性细菌的总数量及群落多样性指数在抗虫棉与对应的受体棉之间多数差异不显著。转基因抗虫棉中的nptⅡ基因可能向叶围细菌漂移。     

地高辛标记质粒探针监测卡那霉素耐药性的研究

 用 Eco R 单酶切卡那霉素抗性质粒 ,经 DNA纯化回收 4.34 1kb的目的基因片段。以随机引物法 ,用地高辛进行标记 ,制备成探针 ,成功建立了斑点杂交法和菌落原位杂交法用于检测猪源大肠杆菌对卡那霉素的耐药性 ,结果表明与药敏试验阳性的符合率为 10 0 % ,说明建立的探针技术可以用于猪源大肠杆菌对卡那霉素的耐药性监测。     

雏鸡绿脓杆菌病的诊治

1 发病情况 积石镇个体鸡场7月10日饲养的2000只AA商品代雏鸡，小鸡5周龄内生长基本正常，第6周时陆续发生小部分小鸡畏寒，呆立，呼吸困难，拉带白色的绿色粪便，并出现成批死亡。曾多次对鸡群用0．03％痢特灵拌料饲喂，并按每公斤体重2万IU肌肉注射庆大霉素，每天2次，连用2天，用药1～3天后，病鸡死亡数明显减少，停药后又重新暴发，再次或反复用药效果差。经诊断为鸡绿脓杆菌病，选用敏感药物卡那霉素、庆大霉素治疗，并配以肌肉注射绿脓杆菌灭活苗，l周后鸡只死亡逐渐减少，半月后鸡群恢复正常。从第6周发病到第9周共死亡鸡只420只，死亡率达21％。     

硫酸卡那霉素MIC与耐药性试验

<正> 江西制药厂有一批1977～1978年生产的硫酸卡那霉素样品,保存已12～13年,从外观检查:无变化的为68.33%,轻度变化的呈微黄色11.71%、中度变化呈黄绿色6.7,重度变化的呈金黄色13.18%。经生物测定法检查的效价为标示量(%):无变化的94.8、轻度的90.1、中度的76.5、重度     

卡那霉素对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响

研究了卡那霉素(Km)对梨叶片愈伤组织和不定梢诱导的影响.结果表明,Km浓度为10 mg/L时,明显抑制“金华”和“金水”叶片愈伤组织的生长;Km浓度为20 mg/L时,2个品种叶片均无不定梢发生,且随着浓度的增加,死亡率逐渐增大;Km浓度达100 mg/L时,“金华”和“金水”叶片死亡率分别达100％、96.70％.对于“苍溪”品种而言,Km浓度为10 mg/L时,已完全抑制了“苍溪”叶片不定梢的再生;当Km浓度增加到60 mg/L时,“苍溪”叶片全部白化死亡.