南非II型口蹄疫间接ELISA检测方法的建立

为满足口岸对南非II型口蹄疫检测、监测的需求,在对南非II型口蹄疫抗原表位分析及相关基因合成的基础上,进行融合蛋白pGEX—VP1-VP3的体外表达,采用柱上酶切方法制备VP1-VP3蛋白。将纯化VP1-VP3抗原包被96微孔板,分别优化抗原包被浓度、血清稀释度、酶标二抗稀释度,确定阴性临界值。经反复优化,建立的南非II型间接ELISA检测方法的最佳抗原包被浓度为6．4ug／ml,血清最佳稀释度为1：200,酶标二抗最佳稀释度为1：4000,阴性临界值（0D450）为0．562。检测样品判定标准为：OD450〉0．622为阳性,OD450〈0．502为阴性,0．502≤OD450≤0．622为可疑。特异性试验结果表明,所建立方法与其它血清型口蹄疫间无交叉反应。南非II型口蹄疫间接ELISA检测方法的建立为我国口岸口蹄疫检疫提供了新的查验方法。     

牛病毒性腹泻-黏膜病病毒斑点酶联免疫吸附检测法的建立

采用辛酸-硫酸铵法提取兔抗BVDV高免血清中的免疫球蛋白IgG,在混合硝酸纤维素膜上进行间接酶联免疫吸附试验,建立了检测BVDV抗原的斑点酶联免疫吸附检测法.结果显示,抗体最佳包被量为400μg/mL,酶标记羊抗兔IgG的最佳工作浓度是1:500倍稀释,抗原最小检出量是5.36μg/mL.应用建立的检测方法对78份腹泻...     

新城疫病毒单抗酶联试剂盒与RT-PCR方法检测新城疫强毒感染的比较

新城疫 ( ND)是威胁我国养禽业的头号疾病 ,病原是新城疫病毒 ( NDV)。 NDV只有一个血清型 ,其抗原性一致 ,但毒力差异很大。强毒毒株可引起易感鸡群高发病率和高死亡率的典型 ND,在免疫鸡群则引起低死亡率的非典型 ND;弱毒株不致病 ,有的弱毒株还被用作弱毒疫苗。由于弱株在自     

应用酶联免疫吸附试验检测猪生殖与呼吸综合征血清抗体的研究

建立的检测猛增生殖与呼吸综合征（PRRS）酶联免疫吸附试验（ELISA），其抗原包被浓度为24μ／mL，血清稀释度为1∶100，酶标二抗的工作浓度为1∶500。应用该方法对陕西省9个地区采集的有疑似PRRS征候的250份猪血清进行检测，检出阳性血清32份，阳性率为12．8％，从而证实陕西省存在PRRS，也为该病的大面积血清学普查提供了一种简易、快速、准确的检测方法。     

菜籽饼中毒病的调查与防治

菜籽饼中含有粗蛋白约41%～43%,是动物优良的蛋白质补充料,但因菜籽饼中含有芥子苷、芥子酶、芥子酸、芥子碱等成分,特别是其中的芥子苷在芥子酶的作用下,可以水解形成异硫氰酸丙烯酯、     

应用FA及PPA-ELISA技术对猪瘟的检测

用免疫荧光抗体诊断技术及单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术对疑为猪瘟病毒感染猪进行了检测 ,重点阐述了 2种方法的技术原理和操作过程。通过用免疫荧光抗体诊断技术检测了 5份病料 ,其中有 2份为阳性 ,阳性率为 40 % ;用单克隆抗体纯化酶联免疫吸附试验诊断技术检测了猪瘟血清抗体 ,在 40头母猪血清样品中 ,猪瘟弱毒抗体效价 OD值较高 ,有 1 0 0 %的保护率 ,但是发现母猪群中有 1 0 %隐性猪瘟感染 ,其强毒抗体效价 OD值大于 0 .5,体内带有猪瘟病毒。结果及过程表明此两种诊断方法检测快速、鉴别准确、分辨率高     

鸡肉质鲜味特性相关基因的克隆及序列分析

本研究对泰和乌骨鸡、隐性白羽肉鸡腺苷琥珀酸裂解酶基因的cDNA进行了克隆,并对序列进行了分析,共发现有6处碱基突变249 G→A(TH)、717 C→G(TH)、985 A→G(TH)仅在泰和乌骨鸡中出现;992 T→C(RW)、1400 C→T(RW)仅在隐性白羽肉鸡中出现;而在泰和乌骨鸡和隐性白羽肉鸡中均检测到突变1179 A→C(TH,RW).其中985 A→G(TH)、1400C→T(RW)处突变导致两处氨基酸突变Thr→Ala(305)、Ala→Val(443),其它4处碱基突变均为同义突变.另外对几种脊椎动物Adsl基因核苷酸序列水平、蛋白质水平同源性进行了比较分析.     

酒糟营养成分检测及其酶水解研究

文章测定了采自甘肃世纪金徽酒业集团公的酒糟营养成分,并对其进行了酶水解研究.结果表明：酒糟中蛋白质、淀粉和粗脂肪含量分别为14.03％、13.7％和3.4％,并富含维生素B族,其中维生素B6含量高达0.3 g/kg.矿物质元素钙、镁、锌、铁含量均远远高于其他常见粮食.含有的18种氨基酸中,必需氨基酸占总氨基酸的30.27％,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值43.40％.氨基酸比值系数法评价表明,该酒糟中必需氨基酸种类齐全,比值系数分（SRC）63.37,比例均衡.酶解结果表明,蒸汽加热处理（121℃,10 min）后酒糟的酶解效果优于超声波（400 W,15 min）处理,酶添加顺序为先加纤维素酶,后加糖化酶,酶添加量分别为纤维素酶（2 000 U/g纤维素）和糖化酶（1 000 U/g淀粉）,该条件下还原糖含量达49.75 mg/mL.     

蜂蜜中氯霉素残留来源与变化研究

研究模拟大田养蜂生产,在花期蜂蜜生产过程中通过对照实验,跟踪检测使用氯霉素的生产蜂群的蜂蜜中氯霉素残留量变化趋势,揭示以氯霉素为代表的抗生素残留在蜂群中残留量的变化规律,评估了不同管理水平下氯霉素残留量衰减率,以发现有效消除蜂群氯霉素残留的方法。研究证明,在养蜂生产中一次氯霉素的使用会对蜂蜜品质造成长期影响,同时取蜜次数、蜂群群势及用药剂量均与蜂蜜氯霉素残留量变化相关。生产中取蜜次数与氯霉素残留量负相关,强群势蜂群有助于加快蜂蜜中氯霉素残留量递减速度,但当蜂蜜中氯霉素残留量降至1.5μg/kg后,增加取蜜次数对蜂蜜氯霉素残留量影响不明显。大用药剂量将导致蜂蜜中氯霉素残留量激增,降解时间延长。使用清洁蜂箱和巢脾能有效消除蜂蜜生产中氯霉素的残留。     

莆田市部分猪场猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的感染调查

分别用PCR方法和酶联免疫吸附试验对采自莆田部分猪场的382份临床发病育肥猪扁桃体和465份种猪血清样品进行了检测,以分析PCV2的感染情况。结果表明：发病育肥猪PCV2的阳性率为74.60%,种猪PCV2平均阳性率为20.61%。