减毒沙门菌介导的apo-tPA融合基因在鸡体组织的分布与表达

探讨以减毒沙门菌为载体,介导外源基因在动物体内的组织分布和表达的可行性。将编码人t-PA功能区的基因片段与鸡VLDLy组装前体apo-B100基因融合,定向克隆到荧光蛋白表达载体SV40启动子下游,构建pApo-tPA-GFP表达质粒。应用电转化法将pApo-tPA-GFP表达质粒转化减毒沙门菌,阳性减毒沙门菌经翅下静脉注入鸡体内,分别于注射后第1、2、3、4、5周随机剖检试验用鸡,无菌取内脏器官,经组织细菌培养、RT-PCR检测各脏器中基因分布,涂片荧光镜检基因表达情况。结果显示,在肝脏、脾脏和十二指肠均分离到沙门菌,PCR鉴定均为减毒沙门菌载体;RT-PCR检测在肝脏、脾脏、十二指肠中有目的基因存在;荧光检测在肝脏、脾脏中有荧光蛋白。结果表明,减毒沙门氏菌能够作为载体将目的基因有效的转入到动物体内,这一方法有望为动物转基因提供便捷、有效的途径。     

来源于产黄青霉病毒科成员的分离物对梨轮纹病菌生长及其致病力的影响北大核心CSCD

【目的】明确产黄青霉病毒科成员(Botryosphaeria dothidea Chrysovirus 1,BdCV1)对寄主梨轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)菌株生物学性状的影响,证实单独感染BdCV1梨轮纹病菌分离株是弱毒菌株;以期确定BdCV1是否为引起梨轮纹病菌弱致病力的单一因子。【方法】从前期弱致病力复合感染双分体病毒科成员Bd PV1和BdCV1的梨轮纹病菌LW-1中经多代菌丝分离获得的疑似仅单独感染BdCV1分离株(命名为LW-C)为材料;采用dsRNA检测、RTPCR,鉴定LW-C菌株中仅携带BdCV1。采用菌丝块接种于PDA培养基以及3针针刺法接种梨果实,观察其菌落形态以及发病情况,测定菌落生长速度和致病性,明确LW-C生物学特性。将LW-C对无毒菌株Mock进行水平转染,检测其传染后衍生菌株的dsRNA并测定其生物学特性。【结果】证实了LW-C仅感染BdCV1,具有弱毒特性;水平转染结果明确了BdCV1因子对梨轮纹病菌的菌落形态、生长速度有抑制作用,对寄主有弱致病力。【结论】确认了BdCV1是引起梨轮纹病菌致病力衰退的主要因子,为真菌病毒防治果树轮纹病害提供了新颖的生防材料。     

禽流感的防治

禽流感(Avian Influenza，AI)是由正粘病毒科A型流感病毒引起的一种疾病综合征，被国际兽疫局列为A类烈性传染病。根据病毒的致病性不同，分为高致病性禽流感、低致病性禽流感和无致病性禽流感。该病主要感染鸡和火鸡，鸭、鹅、鹌鹑、野鸟、孔雀等几乎所有禽类以及海鸟和猪等，高致病     

我国马流感的研究现状

马流行性感冒（Equine influenza）简称马流感,是由正粘病毒科（Orthomyxoviridae）流感病毒属（Influenzavirus）马A型流感病毒引起马属动物的一种急性暴发式流行的传染病。马流感为高度接触性、呼吸道传染病。该病的临诊特征为发烧、结膜潮红、咳嗽、流浆液性鼻液-脓性鼻漏、母马流产等为主要症状。病理学变化为急性支气管炎、细支气管炎、间质性肺炎与继发性支气管肺炎。     

猪流行性感冒的诊断与防制探讨

猪流行性感冒是由正粘病毒科猪流行性感冒病毒引起的急性、热性、高度接触性的呼吸道传染病,传播迅速,呈地方流行性特点。近二年来,江南一带该病发病势头明显上升,给我国养猪生产及其经济效益带来较大影响。现浅谈该病的诊断与防制。1流行情况调查本病多发于天气骤变的春、秋季     

浅谈犬细小病毒病的诊治

<正>随着人民生活水平的提高,城市里的养犬数量越来越多,并且名犬比较多。城市犬由于主人条件好,一旦患病后,可以说不惜一切代价去救治,因此笔者在临床上积累了很多经验,特别是一些比较先进的方法。下面就犬细小病毒病的防治谈一下自己的看法,希望能对养犬的朋友能有点帮助一、流行特点犬细小病毒病是由犬细小病毒引起的犬的一种急性传染病。该病毒属于细小病毒科细小病毒属,患病犬是本病的主要传染源。主要临床症状是呈现出血性肠炎或非化脓性心肌炎症状。     

表达绿色荧光蛋白重组减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建

应用DNA重组技术构建了表达绿色荧光蛋白 (GFP)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。用EcoRⅠ和NcoⅠ将pEGFP质粒中的绿色荧光蛋白基因EGFP切下 ,克隆进表达载体质粒pYA3334的EcoRⅠ和NcoⅠ位点之间 ,构建成重组表达质粒pYAGFP ,然后转化大肠杆菌X6 2 12、中间宿主X3730、终末宿主X45 5 0。X45 5 0于LB培养基上呈绿色 ,在荧光显微镜下观察 ,整个菌体发绿色荧光。构建的表达GFP的重组鼠伤寒沙门氏菌为减毒沙门氏菌活载体基因工程疫苗的研制提供一个良好模型。     

马传染性贫血病毒中和抗体的研究进展

马传染性贫血病毒(Equine infectious anemia vi- rus,EIAV)与人类免疫缺陷病毒(HIV)同属反转录病毒科、慢病毒属的重要成员,具有高度的传染性,传播迅速、广泛,直接危及动物或人类健康的特点。至今,只有我国研制成功了马传贫驴白细胞(EIAV DL)弱毒疫苗,此疫苗是经过在驴白细胞体外培养继代、培育驯化,致使对马、驴毒力明显减弱而制成的一种减毒活疫苗。通过对该疫苗的使用已有效地控制了马传贫在我国的猖獗流行。这一创新成果轰动了兽医界,并引起医学界的高度关注。     

动物流感监测概况

流感是一种传染病，其病原属于正粘病毒科RNA病毒，可分为4个属：甲型流感病毒属、乙型流感病毒属、丙型流感病毒属和托高土病毒属。它们均由单股负链RNA组成，其中甲型流感病毒多发于低等动物及禽类，乙型流感病毒仅感染人，丙型流感病毒感染人和猪，但极少引起严重的疾病。     

减毒沙门氏菌运送的口服DNA疫苗研究进展

DNA疫茁被誉为疫苗技术领域一场新的革命,但如何优化质粒DNA的免疫途径和运送方法以激发有效的免疫应答成为研究的热点.采用减毒胞内菌通过黏膜自然感染途径运送DNA疫苗成为近年来研究的热点[1].沙门氏菌是一类重要的人兽共患病原菌,目前利用它作为载体原核表达各种外源抗原已得到广泛的研究并取得良好的免疫效果;而利用沙门氏菌作为DNA疫苗运送载体的研究方兴未艾,已显示出诱人的前景.本文就减毒沙门氏菌作为外源DNA运送系统的入侵途径、诱导产生免疫应答的机制以及免疫预防传染病等方面的应用作简要综述.