黄瓜叶酸合成关键基因克隆与分析

【目的】分析黄瓜基因组中与叶酸合成代谢相关的基因数量、定位以及表达特征,对关键酶基因进行生物信息学分析与克隆,旨在为黄瓜叶酸合成调控研究奠定基础。【方法】根据已报道的拟南芥叶酸合成相关基因,利用黄瓜基因组数据库中9930_V3版本进行BLAST比对。利用MapChart绘制黄瓜染色体物理图谱并对基因定位。利用qRT-PCR分析这些基因在黄瓜果实发育不同时期和不同材料中的表达量。通过MEGA、WebLOGO、ExPASy等工具对关键酶基因进行生物信息学分析。通过PCR扩增对关键酶基因进行克隆,并测序分析基因的序列差异。【结果】同源比对获得19个黄瓜叶酸代谢相关基因,这些基因不均匀分布在黄瓜7条染色体上,且以Chr.4和Chr.5上分布最多。通过对其中11个调控叶酸合成的基因在测序黄瓜9930果实发育不同时期以及果实叶酸含量高低差异显著的2份材料的表达量分析,发现CsFPGS、CsHPPK/CsDHPS和CsDHNA 3个基因与果实叶酸含量变化趋势完全一致;CsADCS、CsADCL、CsDHNA、CsHPPK/CsDHFS、CsFPGS、CsDHFS等基因的表达量在2份材料中具有显著差异。通过对2个调控叶酸合成限速步骤的关键酶基因CsGCHI和CsADCS的蛋白序列及蛋白结构域分析,发现各物种中CsGCHI的同源基因均具有2个GTP_cyclohydroI结构域;CsADCS的同源基因均具有2个GATase结构域、1个Anth_synt_I_N结构域和1个Chorismate_bind结构域。它们在不同物种中高度保守,进化树分析亲缘关系近的物种聚类到一起。分别扩增黄瓜果实低叶酸含量自交系65G和高叶酸含量自交系02245中CsGCHI和CsADCS的同源基因,序列分析表明CsaV3_1G041250全长为3 012 bp,CDS序列长度为1 413 bp,3个SNP位点的突变导致了氨基酸序列的变异;CsaV3_7G026240全长为3 047 bp,CDS长度1 407 bp,序列无变异;CsaV3_5G036360全长7 941 bp,CDS序列长度为2 706 bp,序列无变异。【结论】鉴定出19个不均匀分布在7条染色体上的黄瓜叶酸代谢相关基因,基因CsFPGS、CsHPPK/CsDHPS 、CsDHNA和CsADCS是影响黄瓜果实叶酸含量变化、导致叶酸含量高低显著差异的关键基因,调控叶酸合成限速步骤的关键酶基因GCHI及ADCS功能相对保守,CsGCHI在65G、02245中有3个SNP位点的突变导致了氨基酸序列的差异。     

关键烘烤温度点对烤烟的香气影响研究

在烤烟密集烘烤干球温度为52～54℃的过程中,以时间为变量,研究关键烘烤温度点对烟叶香气的影响。结果表明,在52～54℃的关键温度点下,各处理各烘烤阶段缩短1 h会增加烟叶干鲜比和单叶重;中下部叶各烘烤阶段延长1 h,烟叶的干重减少的较小;上部叶各烘烤阶段延长1 h,烟叶的外观质量更好;每烘烤阶段延长1 h,烟叶香气表现较好。     

根腐病菌侵染对黄芪苯丙烷途径关键酶活性的影响

以蒙古黄芪-根腐病菌（Fusarium solani和F. acuminatum）为互作体系,测定苯丙烷途径关键酶苯丙氨酸解氨酶(PAL)、肉桂酸-4-羟化酶(C4H)及4-香豆酸-辅酶A连接酶(4CL)活性的变化,以期获得黄芪抗根腐病菌侵染机制的信息,为抗病育种工作提供参考。试验采用幼苗浸根法接种病菌,分光光度法测定3种酶的动态变化。结果表明,F. solani侵染黄芪后,PAL和C4H活性与对照相比明显升高,并在7、21天出现2个酶活高峰;4CL活性则随着时间的延长持续上升,7、21天时也显著高于对照。F. acuminatum侵染黄芪后,PAL、C4H和4CL的活性均在21天显著高于对照。可见2种病原菌在侵染黄芪过程中,苯丙烷途径的关键酶被不同程度地激活,但2种病菌激活各酶的时间和规律有所差异,表明黄芪对这2种病菌的抗性机制明显不同。     

雌性系黄瓜制种关键技术

为了充分发挥黄瓜雌性系在育种中的特殊作用,尤其是其杂交效率高、操作简单、省工省时的特性,经过多年实践,在根据气候条件安排父母本播期、父本诱雄、母本除花、田间管理、采种储藏、病虫害防治等方面,总结出一套较为完整、高效的黄瓜制种技术,为选育高产优质的黄瓜新品种、提高种子产量和品质提供了技术保障和有益经验。     

辽西地区石质山水土保持绿化修复关键技术

朝阳地区的石质山岩体属性大多为石灰岩,岩体光秃,立地瘠薄,植被恢复慢,造林条件严苛。技术人员通过对朝阳地区石质山水土保持造林技术探索,利用春季造林、雨季补植和兔害防治技术,调查树木的成活率、保存率、土壤理化性质、兔害啃噬率等变化,得到了朝阳地区石质山水土保持造林绿化修复关键技术。     

农业机械新技术的推广及其应用关键思路分析

在新农村建设如火如荼的今天,积极推动农业发展,必须全面推广应用农业机械新技术,只有这样,才能够整体提升农业生产的效率,才能够进一步保障农业生产的质量与安全。为此,必须充分结合农业发展的实际需求,精准全面的推广农业机械新技术,把握它的应用关键思路,更好的提升农业发展的整体成效与质量。     

闭合循环养殖车间HACCP体系的建立

水产养殖业的食品安全问题已越来越引起人们的重视。探讨了在闭合循环集约化水产养殖车间建立HACCP管理体系的可能性。通过对生产流程的各个环节的分析,HACCP小组用关键控制点(CCP)判断树的方法,确定了该养殖车间生产的关键控制点和相应的控制措施,并在生产中严格执行。实践结果表明,在闭合循环水产养殖车间建立HACCP体系是确实可行的,不仅可以保证养殖生产的顺利进行,避免饲养鱼类在养殖过程中出现非正常死亡,同时保证了养殖产品的食用安全性,为闭合循环水产养殖车间建立了科学的管理体系。     

HACCP在芦柑浓缩汁生产中的应用

本文介绍了危害分析关键控制点(HACCP)的原理及其在芦柑浓缩汁生产中的具体应用,确立了芦柑浓缩汁的关键控制点及临界参数和纠正措施。     

HACCP在浊型杏汁饮料生产中的应用研究

运用HACCP原理对浊型杏汁饮料生产各环节的危害因子及关键控制点进行了研究。结果表明:危害因子主要来源于物理、化学及生物等综合因素。物理因素来自原辅料及包装材料中的杂质危害等;农药残留、重金属超标或添加剂过量等导致化学危害;生物危害来自原料、水或加工中微生物污染、二次污染以及微生物超标等。在危害分析的基础上,确定了浊型杏汁饮料安全生产过程中的七个关键控制点为:原料、清洗、调配、脱气、均质、装罐封盖、杀菌。     

台湾本地种梅树的需冷量评估

台湾本地种梅树需冷量的评估方法是在本所比较桃关键栽培种（Ｋｅｙｃｕｌｔｉｖａｒｓ）与待评估梅品种间的花期早晚．由此方法评估结果暂定‘万山’及‘胭脂’梅的需冷量为１００个低温单位（ｃｈｉｌｕｎｉｔ,ＣＵ）,‘大青’、‘房炳雄’及‘桃形’梅约８０ＣＵ,‘山连’约７０ＣＵ．目前（１９９８年）正累积更多调查数据（已调查５ａ）,以“试误法”进行梅树低温需求量电脑模式化的探讨