Establishment of a Duplex Real-time RT-PCR Assay for the Differential Detection of Nipha Virus and Highly Pathogenic Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome Virus

To establish a rapid,sensitive and specific assay for the differential detection of Nipah virus (NiV) and highly pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome virus (HP-PRRSV),a duplex Real-time RT-PCR was developed with specific primers and probes targeting to the special sequences of NiV M gene and HP-PRRSV nsp2 gene by optimization of reaction conditions.The performance of the assay was linear ranging from 4.6×10¹ to 4.6×10⁷ copies/μL for RNA standard control of NiV M (NiV-M-RNA) and from 4.1×10¹ to 4.1×10⁸ copies/μL for RNA standard control of HP-PRRSV nsp2 (HP-PRRSV-nsp2-RNA),and detection limits of the assay was 46 copies for the NiV-M-RNA and 4.1 copies for the HP-PRRSV-nsp2-RNA,respectively.The coefficients of variation (CVs) of both inter-assay and intra-assay repeatability were less than 2.0%,showing good repeatability.The assay was able to specifically detect NiV and HP-PRRSV simultaneously without cross-reaction with classical swine fever virus (CSFV),porcine epidemic diarrhea virus (PEDV),swine influenza virus (SIV),porcine parvovirus (PPV),pseudorabies virus (PRV) and porcine circovirus type 2 (PCV2).Of the 236 samples from pigs for both NiV and HP-PRRSV detection by the established assay,all the samples were negative for NiV,8 samples were HP-PRRSV positive.In conclusion,this assay offers a useful approach for the differential detection of NiV and HP-PRRSV in clinical specimens from the pigs.     

母羊妊娠期的饲养管理

做好母羊妊娠期的饲养管理工作对于肉羊的养殖十分重要,可以增强新生羔羊的体质,增加羔羊的初生重,减少初生羔羊的死亡率。妊娠期分为妊娠前期和妊娠后期,根据这两个期的不同特点及营养需求,有针对性的进行饲养管理,可以确保母羊的健康以及保证胎儿正常的生长发育,在母羊的妊娠期做妊娠母羊的保胎工作是关键。     

生猪饲料品质高精度多模式检测与评价实例

本文通过对云南省江川县连续5年生猪饲料及饲料原料营养品质的概略养分、精细养分、霉菌毒素污染情况检测的实例分析,探讨生猪饲料品质高精度多模式检测和评价的意义和价值,为云南省生猪产业生猪饲料品质检测评估和改进饲料品质质量提供借鉴。     

猪繁殖与呼吸综合征疫苗的研究进展

猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)是一种猪的高致病性和高死亡率的疫病,给养猪业带来了严重损失,目前尚无特别有效的免疫预防措施,接种疫苗仍是预防本病的最重要措施。灭活疫苗安全但保护力低,弱毒活疫苗有散毒风险但是保护力相对较高,DNA疫苗、亚单位疫苗、活载体疫苗和基因缺失疫苗等新型疫苗研究都有较好进展。预防控制和消灭PRRS任重道远。     

猪繁殖与呼吸综合征的诊断

猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）,属于动脉炎病毒科。病毒粒子呈卵圆形,有囊膜,表面相对平滑,立方形核衣壳,为单股RNA病毒。该病毒对热敏感,4℃可以保存1个月,ph值低于5或高于7的环境下很快被灭活。猪繁殖与呼吸综合征病毒有两个血清型,即美洲型和欧洲型。目前,我国流行的毒株属于美洲型。许多新的人类和动物的疾病由RNA 病毒引起,这些病毒大约出现在过去的40年中,这些先前就已存在的病毒在一定的条件下感染了补充宿主,如埃博拉病毒（Ebola virus）,汉坦病毒（Hantavirus）,尼巴病毒（Nipah virus）,亨德拉病毒（Hendra virus）等。     

草原建设和保护工作措施及发展探究

草原是我国自然生态景观中的一种,基于其在调节生态气候以及环境保护方面具有重要的作用,因此需要充分做好草原建设与保护工作。本文旨在通过对我国草原建设和保护工作面临的问题进行研究,从而为其保护和建设提供相关的措施。     

陕南白山羊口疮病的综合防治

就近几年流行病学调查,发现口疮病是目前危害陕南白山羊生产最严重的疾病之一,其特点是传播迅速,发病率高,危害性大。有效预防与控制传染性口疮病的传播和暴发,是促进陕南白山羊养殖业健康发展的根本前提和保障。对陕南白山羊口疮病的综合防治措施进行了介绍,旨在为广大陕南白山羊养殖户提供科学、合理的综合防治模式。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒分离株E11105 N基因的序列分析与原核表达

为研究PRRSV N蛋白的结构、功能以及N蛋白在病毒致病中的作用,以临床分离PRRSV毒株E11105为研究对象,采用Primer Premier 5.0设计一对特异性引物,经RT-PCR扩增出N基因片段,利用相关分子生物学软件对N基因序列进行分析;将N基因克隆连接到pColdⅠ原核表达载体上,经PCR、双酶切鉴定及序列测定后,得到重组质粒pColdⅠ-N,将pColdⅠ-N转入大肠埃希菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达后用SDS-PAGE蛋白电泳及Western blot验证分析。结果显示,分离株E11105N基因与北美洲型代表株VR-2332、欧洲型代表株Lelystad virus(LV)、中国2006年暴发的高致病性PRRSV代表株JXA1、中国代表株CH-1a的核苷酸序列同源性分别为93.3%、34.7%、99.2%、95.4%,氨基酸序列同源性分别为94.4%、15.3%、94.4%、99.2%;系统进化树显示,E11105株N基因与美洲型代表株VR-2332、中国高致病性JXA1毒株的亲缘关系较近;分离株E11105N基因所编码蛋白不存在跨膜区;二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,分别占20.33%和63.41%;预测该蛋白可能存在5个较为明显的B细胞优势抗原表位。SDS-PAGE蛋白电泳结果表明,重组N蛋白主要存在于菌体沉淀中,分子质量约为16.7ku;Western blot结果显示,带His标签的重组表达蛋白能被His单克隆抗体识别,显色后条带约为16.7ku,与SDS-PAGE蛋白电泳的条带大小一致。     

基于用户需求的个性化文献检索模式研究

通过对当前个性化文献检索服务进行汇总和分析,提出满足用户自身需求的基于知识组织系统的个性化文献检索模式理念,并通过验证基于知识组织系统的文献检索模式,体现其所具备的基于用户需求的个性化检索模式特性和运用价值.     

江苏开放大学移动学习需求及策略研究

以需求理论、服务管理理论为指导,对移动学习的内涵作了界定,围绕移动学习这一主题,充分掌握江苏开放大学学生移动学习的现状,从而进行全面开展研究。通过分析江苏开放大学对移动学习的需求现状,从学员、教师、学校三方面提出有效的策略措施,对江苏开放大学如何为学生提供有效的移动学习提供理论支撑。