利用胚性细胞悬浮系研究香蕉枯萎病抗性离体筛选技术

以香蕉(Musa spp. AAA group)胚性细胞悬浮系(Embryogenic Cell Suspension,ECS)为试材,进行抗枯萎病离体筛选技术研究。首先测试不同的γ射线(60Co)辐射剂量对ECS植株再生能力的影响;在此基础上,以不同浓度的枯萎病病原菌毒素粗滤液(FOC)为选择压力,研究FOC对ECS植株再生能力的影响,并进行离体抗性筛选。结果表明,ECS的植株再生能力与辐射剂量之间呈负相关,半致死剂量为70～80Gy。同样地,未经辐射处理的ECS其植株再生能力也随着FOC体积分数的增加而急剧下降,但经辐射处理过的ECS其植株再生能力与CK相比成倍地增加;当FOC体积分数达到12%后,只有从经80Gy辐射后的ECS获得了再生植株。这表明ECS耐FOC的能力随着辐射剂量的增加而增强。     

影响锦江牛胚胎制作效果的因素分析

利用生物辅助保种技术(冷冻胚胎),探索影响锦江牛胚胎制作效果的因素,对牛个体膘情、经产牛、青年牛、胚胎制作时间等进行分析研究。结果显示:经产牛头均A、B级胚胎数、头均获卵数分别是青年牛的190%和181.3%;中上等体膘牛(3~4分)头均A、B级胚胎数、头均获卵数分别是上等体膘牛(4分)的3.1倍、2.3倍;A、B级胚胎数占获卵数的比例为68.2%,高于上等体膘的53.5%(P0.05)。结果表明:锦江牛冷冻胚胎制作效果与牛个体膘情密切相关,选择中上等体膘(3~4分)经产牛是最优选择。     

棉花gDNA体细胞染色体FISH技术

介绍了棉花基因组ＤＮＡ（ｇｅｎｏｍｅＤＮＡ,简为ｇＤＮＡ）体细胞染色体荧光原位杂交〔ＦＩＳＨ〕的技术流程,并着重分析和讨论了影响试验结果的关键因素,包括染色体和探针的变性条件、染色体的蛋白酶Ｋ处理技巧等。试验中作为靶ＤＮＡ的体细胞染色体采用棉属异源四倍体种海岛棉;探针和封阻均采用ｇＤＮＡ,材料是棉属二倍体种Ａ染色体组（Ａｇｅｎｏｍｅ）的棉种（亚洲棉和草棉）和Ｄ染色体组（Ｄｇｅｎｏｍｅ）的棉种（瑟伯氏棉、雷蒙德氏棉、戴维逊氏棉等）,分别交互使用。试验结果比较理想,获得良好的ＦＩＳＨ片子,而且重复性好。     

基因工程和细胞工程在林木遗传改良中的进展

本文对基因工程中外源基因种类、转基因技术、检测手段以及木本植物转基因植株成功的实例做了论述。同时介绍了细胞工程中体细胞胚状体发生及人工种子、原生质培育和体细胞融合,以及体细胞突变体的筛选等项研究在林木遗传改良中的进展和技术特点。     

中棉所12(Gossypium hirsutum C.V.Zhongmian 12)体细胞胚发生及植株再生

通过对不同外植体的研究,发现幼胚下胚轴是理想的外植体材料,２,４－Ｄ和ＺＴ是中棉所１２体细胞胚发生的关键植物生长调节物。从愈伤组织诱导到大量再生植株只需４个月左右的时间。     

节节麦×六倍体小黑麦杂种胚再生植株育性及其变异的细胞学研究

对节节麦(2n=2x=14)×六倍体小黑麦(2n=6x=42)杂种胚培养植株和胚愈伤组织再生植株的育性比较,发现杂种胚愈伤组织再生植株育性有较大的变异。8株胚培养杂种植株的平均育性为0.87％(0.39％～1.40％),同期抽穗的杂种胚愈伤组织再生植株的平均育性为0.75％(0～5.39％)。细胞学研究表明杂种F_1可育性是由于未减数配子产生的结果,在一些PMCs中,单价体中期Ⅰ集结到赤道板上,后期Ⅰ分裂失败形成再组核,再组核分裂产生二分体或细胞质提前分裂产生有核和无核子细胞,有核子细胞分裂产生未减数配子。细胞学研究揭示再生植株的育性和染色体数目和配对构型无关而和单价体中期Ⅰ在赤道板上的集结程度呈正相关。远缘杂种F_1再生植株的育性变异为克服杂种不育提供了技术途径。     

在组织培养中属间杂种的体细胞变异研究

近年来,属间杂种在组织培养中的体细胞变异,已成为向栽培作物转移外源期望基因的一项重要的生物技术或遗传工程。大量的证据显示,利用远缘杂种的愈伤组织培养能够增加亲本染色体间的遗传交换。特别是属间杂种再生植株中与染色间部分同源性无关的许多易位的发生,使得转移利用其它遗传操作难以转移的外源基因变得容易。本文对近年来在属间杂种组织培养中体细胞变异的研究现状作了全面综述,包括试验材料和外植体、变异类型、影响因素、可能的遗传机理、已取得的成就和未来的研究方向。随着分子细胞遗传学技术的应用,必将使体细胞变异在作物改良中发挥巨大的作用。     

异质性体细胞杂种育性及其生物学性状研究

普通烟草（Nicotiana tabacum）和粉蓝烟草（N.glauca）的叶肉原生质体经高Ca++,高pH的PEG溶液诱导融合,并再生出体细胞杂种植株。杂种植株中发现形态偏普通烟草,雌蕊发育正常,雄蕊发育异常,且融合双亲部分细胞质和细胞核的杂种株,将此株与普通烟草栽培品种（Speight G-28♂）回交,回交1代（BC#-1）、回交2代（BC#-2）保持高度不育,回交3代（BC#-3）、4代（BC#-4）育性有一定的恢复,并出现育性分离。让恢复一定育性的株系自交,获得有一定育性的稳定株系,继续与其它普通烟草栽培品种回交（Speight G-80♂,Speight G-140♂,Jingyehang♂等）,恢复其不育特性,并稳定地遗传。用普通烟草栽培品种（Jingyehuang♂等）反交时,后代育性恢复正常。并相应对各世代生物学性状进行了研究分析。     

提高粳稻体细胞培养绿苗频率的研究

本试验结果证明:(1)通过异地、异季种植和温度预处理等可以使那些难以分化的粳稻材料有效地提高愈伤组织诱导率和绿苗分化率。(2)在 N_6培养基中,降低生长素的浓度,添加水解乳蛋白和水解核酸也可提高愈伤组织的绿苗分化率,但其效果远不及前者。     

牛体外受精胚胎无血清培养的研究

以TCM199为基础液,对常规IVM/IVF牛早期胚胎进行了无血清（1mg/ml,PVA,聚乙烯醇）和有血清（20%FCS）培养的对比实验。通过在无血清培养液中加入9种添加物,初步筛选出了在5%CO#-2、95%空气、39℃、饱和湿度培养环境下的牛体外受精胚胎无血清培养体系为：TCM199+EDTA0.1mmol/L+I5μg/ml+T5μg/ml+S5ng/ml+EGF10ng/ml+牛磺酸7mmol/L+亚牛磺酸5mmol/L+PVA1mg/ml+青霉素100iu/ml+链霉素100mg/ml。无血清培养与有血清培养囊胚率（7.1%对14.3%）、扩展囊胚率（4.3%对7.1%）,均无显著差异(P > 0.05)。实验结果还表明,外源激素（雌激素和孕酮）对胚胎发育无促进作用;有血清组与无血清组胚胎的各发育阶段（桑椹胚、囊胚、扩展囊胚）细胞核数量无明显差异（P > 0.05）。