HBV/HAV复合抗原基因在CHO细胞中的表达

为探讨HBV／HAV复合疫苗的可行性，利用DNA重组技术将HBsAg与HAW复合多表位抗原基因VPX进行融合，插入到真核表达质粒pVAX1多克隆位点，构建成核酸表达疫苗pVAX1／SVPX，将其转染CHO细胞。转染细胞培养48h后，进行RTPCR、Western-blot、ELISA分析，结果表明HBV／HAV复合抗原基因SVPX能够在CHO细胞内转录、表达，融合蛋白具有HBV和HAV抗原的特性。     

H1N1猪流感广东株血凝素基因的克隆与序列分析

用RT-PCR方法扩增H1N1亚型猪流感病毒广东分离株A／Swine／GuangDong／711／2001HA基因，对其进行了克隆和测序。结果显示，HA基因全长1771bp．共编码579个氨基酸。A／Swine／Guang Dong／711／2001HA基因编码的氨基酸序列中有8个糖基化位点，5个位于HAl基因的第27、28、40、104和287位点，3个位于HA2基因的21、153和213位点。与H1N1亚型猪流感经典毒株比较后发现，血凝素糖基化位点并不是高度保守的。将A／Swine／Guang Dong／711／2001与自Gen Bank读取的1918年人流感毒株A／South Carolina／1／18、1991年人流感毒株A／MD／12／91和1997年猪流感毒株A／Swine／Wisconsin／238／97等进行核苷酸同源性比较分析，A／Swine／Guang Dong／711／2001与A／SouthCarolina／1／18、A／MD／12／91和A／Swine／Wisconsin／238／97等毒株的核苷酸同源性分别为93．9％、94．7％和93．9％。从系统发生树来看，A／Swine／Guang Dong／711／2001与A／South Carolina／1／18和A／Swine／Wisconsin／238／97的亲缘关系相近。     

北京油鸡胚胎成纤维细胞系建立与生物学特性研究

采取组织块直接培养法，对北京油鸡胚胎组织进行原代和继代培养，成功地建立了成纤维细胞系。并对培养细胞进行了形态学、细胞生长动力学观察，以及核型和乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶的同工酶分析。结果表明，该细胞系的群体倍增时间(PDT)为24h；细胞染色体中二倍体占主体，为76％～88％；乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶同工酶电泳图谱与本室其它细胞系有明显差别；细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。该细胞系的建立，使北京油鸡这一国家重要种质资源在细胞水平上保存下来，也为基因组文库和体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。     

猪瘟病毒及其全长cDNA在猪肾细胞中增殖表达特性的比较研究

以猪瘟C-株弱毒疫苗株、经典强毒石门株和C-株全长cDNA为试验材料，以免疫荧光技术为主；结合ELISA和RT-PCR检测技术，对其在培养细胞中的增殖特性和表达规律进行了比较研究。同时筛选猪瘟病毒及其全长cDNA的敏感细胞，探索其增殖表达规律，以便为猪瘟病毒反向遗传操作提供技术方法和可操作的条件。     

中草药治疗奶牛乳房炎

奶牛乳房炎被列为奶牛的四大疾病之一。高乳房炎发病率造成奶牛产奶量下降.牛奶质量下降,母牛过早淘汰等,给奶牛业造成巨大损失。乳房炎为乳腺细胞及乳腺间质的炎症。引起乳房炎症的病原菌,约85%为链球菌、化脓性链球菌,5%为葡萄球菌,其他有结核杆菌、布氏杆菌、化脓棒状杆菌,大肠杆菌、枝原体及霉菌等。     

布鲁菌DnaK蛋白抑制宿主细胞凋亡

布鲁菌病是一种典型的人兽共患细菌病,胞内寄生是其感染宿主、并难以治疗的主要原因。目前有关布鲁菌胞内寄生的机制尚未清晰。在本试验中,通过克隆布鲁菌DnaK基因到表达载体pQE-80L,分离纯化His-DnaK融合蛋白,探讨DnaK蛋白调节宿主细胞凋亡的功能。试验表明,第一,His-DnaK处理的巨噬细胞Caspase3剪切被抑制;第二,His-DnaK处理的巨噬细胞TUNEL染色显著降低;第三,布鲁菌DnaK蛋白能抑制宿主细胞凋亡。这将为进一步阐明布鲁菌胞内寄生的分子机制奠定基础。     

初做农产品电商常见的三个问题

<正>农产品电商实践常见问题(1)想的简单了!从理论上讲,电商与农产品的结合并不复杂,目前似乎也没有什么东西不能在网上卖,前景很好,趋之若鹜;然而真正做起来也并不容易,激情满怀进入的多,顺顺当当走下去的少。初入农产品行业者,常见问题大体有三种。第一种常见情况:想得简单了!觉得找一两个人,拉根网线,开个网店,找点产品,就可以了。     

复合肥应该“认命”还是“任性”

<正>目前的复合肥市场貌似进入到了一种令人无奈的怪现象中,生产厂家面对市场行情的变动和可能会出台的增值税政策一再感受到了涨价的压力,而另一方面复合肥的经销商为了卖肥又不得不一再缩减自己的利润点来满足广大农民的用肥需求。所以,对于经营农资的人来说,稳定的市场行情和销售情况,是他们日夜期盼的情形。但是,市场是否真的如他们所期望的那样能够稳定进行呢?或者说当今市场的大势又会是如何?     

Effect of Human Menopausal Gonadotropin,17β-estradiol and Epidermal Growth Factor on the Quality of in vitro Maturation Bovine Oocytes

For optimizing in vitro maturation system of bovine oocytes,we firstly examined the influence of four different hormonal regimes(FSH+LH,HMG,FSH+LH+E₂ and HMG+E₂) on oocyte maturation rates.Then we studied the effects of epidermal growth factor (EGF) in the above defined medium on bovine oocyte maturation,in vitro development and quality of parthenogenetic embryos.The cell apoptotic index of parthenogenetic blastocysts was detected by TUNEL.No significant difference was observed in maturation rates in four groups supplemented with different hormones.However,human menopausal gonadotropin (HMG) provided steady maturation results in replicates.Maturation of oocytes was promoted by supplementation with 17β-estradiol (E₂).Combination of HMG and E₂ gave rise to steady and efficient mature results.The presence of EGF at 30 ng/mL concentration significantly increased maturation rate and blastocyst rate and reduced apoptotic cells in parthenogenetic blastocysts.Therefore,the optimal oocyte maturation solution could be supplemented with 0.075 IU/mL HMG,1 μg/mL E₂ and 30 ng/mL EGF.     

食用菌糖渍技术

一、糖渍原理 食用菌糖渍,就是设法增加菇体的含糖量,减少含水量,使制品具有较高的渗透压,阻止微生物活动,从而使制品得以保存。与果蔬糖制品一样,食用菌的糖制品含糖量必须达到65%以上,最好为70%以上。因为含糖量70%的制品其渗透压约为5066.25千帕,微生物在这种高渗透压的食品中无法获得它所需的营养物质,而且微生物细胞原生质会因脱水收缩而处于生理干燥状态。虽然不会使微生物死亡，但也迫使其处于假死状态。只要糖制品不接触空气、不受潮，其含糖量不会因吸潮而稀释，糖制品就可久贮不坏。