南方红豆杉药用型优树选择研究

根据评分法初选南方红豆杉药用型优树78株,然后根据综合性状评分法复选,共选出15株南方红豆杉药用型优树,入选率为19.23%。经聚类分析,把78株初选优树得分值分为4类,分别为极高、高、中、低4个等级,其中前两类共15株。     

天然产物分析鉴定

三尖杉属植物化学成分与药理活性研究进展；番红花化学成分及生物活性研究进展；红景天多糖的化学药理研究进展；藏药窄叶小苦荚的化学成分；红药化学成分的研究。     

1株高活性三尖杉内生真菌的筛选及代谢产物

为了获得抗菌活性较好的菌株,以9种植物病原真菌为指示菌,采用滤纸片法对分离自三尖杉茎、叶、种皮的61株内生真菌进行抗菌活性研究,分离得到抗真菌活性物质并对菌株发酵液的乙酸乙酯提取部分进行化学成分预试验.结果表明:筛选出1株高活性菌株Se01,经形态学鉴定和18S rDNA序列分析,确定为曲霉属(Aspergillus piperis),其代谢产物主要有生物碱、甾体、萜类、有机酸、内酯、蒽醌类、氨基酸、糖等成分.这些物质大多有较强的活性,能为植物抗病提供来源.     

低温胁迫下Ca2+-CaM信使系统对三尖杉幼苗保护酶活性的影响

用一定浓度的CaCl2、LaCl3、EGTA、CPZ等4种效应剂根施三尖杉1年生幼苗,在25℃下预处理10 d后,移入-3℃下进行低温胁迫处理,分别在胁迫后24、48、72、96 h时测定过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化酶(SOD)等3种保护酶的活性。结果表明:根施外源CaCl2结合低温处理可增强三尖杉幼苗3种保护酶的活性,缓解低温处理过程中保护酶活性的下降;但三尖杉幼苗内源保护酶活性可被EGTA、LaCl3以及CPZ等3种效应剂抑制。说明三尖杉幼苗抗冻性的形成受Ca2+-CaM信号传导途径的调控。     

两种近缘植物内生真菌的分离鉴定及次生代谢物的初步研究

自贵州扎佐地区同一生境中采集近缘植物篦子三尖杉与南方红豆杉的枝叶,从中分离获得内生真菌58株。采用形态学和ITS-5.8S rDNA分子系统发育分析,确认所获内生真菌分别属于8目、9科、9属。经薄层层析(TLC)初筛与高效液相色谱(HPLC)进一步分析发现,从南方红豆杉中分离到的菌株ZZ-HJ-13可产与紫杉烷类化合物10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ特征相似的物质。     

三尖杉内生真菌的遗传多样性研究

本研究以三尖杉的根、茎、叶中分离的91株内生真菌为材料,根据其菌落颜色、质地、生长速率和分生孢子外观等形态学特征,确定了其中74株产孢内生真菌为5个属.采用特异性PCR对91株菌株的ITS片段进行扩增,获得单一的分子长为600bp的条带,以4种限制性内切酶对扩增的ITS片段进行RFLP分析,并对部分ITS碱基序列进行测定,表明三尖杉内生真菌的属和种丰富,其中的优势属为刺盘孢属、曲霉属及小丛壳属,表现为热带真菌类型;小丛壳属是首次从三尖杉科植物中分离.本研究结果提示三尖杉内生真菌有丰富的遗传多样性.     

篦子三尖杉愈伤组织的诱导

以篦子三尖杉的幼茎和嫩叶作为外植体进行组织培养,研究不同激素及不同浓度组合对其诱导愈伤组织的影响,结果表明:篦子三尖杉幼茎比嫩叶的愈伤组织诱导率高;MS+NAA 1 mg.L-1+6-BA 0.15 mg.L-1+2,4-D 1 mg.L-1是诱导幼茎愈伤组织的最佳培养基,诱导率达100%;MS培养基相比B5培养基更适合篦子三尖杉嫩叶愈伤组织的诱导;幼茎在75%的酒精中消毒1 m in,在0.1%的升汞溶液中浸泡15 m in,其消毒效果最佳。