专利文摘

真菌油孢子混剂，三尖杉属植物杀线虫生物碱的提取方法及其应用     

高三尖杉酯碱、血栓通与地塞米松联合对翼状胬肉成纤维细胞的抑制效果

用中药高三尖杉酯碱（Ｈｏｍｏｈａｒｒｉｎｇｔｏｎｉｎｅ）及血栓通（ＸｕｅＳｈｕａｎＴｏｎｇ）与地塞米松（Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ）联合应用，对体外培养的人翼状胬肉成纤维细胞抑制的结果表明：前两药的给药浓度分别在１０－６Ｍ／Ｌ及３ｇ／Ｌ时，抑制率为５０．４％及６４．３％，均有明显的抑制作用及相应的细胞形态学改变。当高三尖杉酯碱给药浓度为１０－４Ｍ／Ｌ时．其细胞增殖抑制率达９１．８％，镜下基本见不到正常细胞。而当两药分别与地塞米松联合应用时，呈现比单一药物应用时的药量减少而药效增强。     

低温胁迫下Ca2＋-CaM信使系统对三尖杉幼苗保护酶活性的影响

用一定浓度的CaCl2、LaCl3、EGTA、CPZ等4种效应剂根施三尖杉1年生幼苗,在25℃下预处理10d后,移入-3℃下进行低温胁迫处理,分别在胁迫后24、48、72、96h时测定过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）和超氧化酶（SOD）等3种保护酶的活性。结果表明：根施外源CaCl2结合低温处理可增强三尖杉幼苗3种保护酶的活性,缓解低温处理过程中保护酶活性的下降;但三尖杉幼苗内源保护酶活性可被EGTA、LaCl3以及CPZ等3种效应剂抑制。说明三尖杉幼苗抗冻性的形成受Ca2＋-CaM信号传导途径的调控。     

2株三尖杉内生放线菌的分离鉴定与活性研究

从三尖杉根部分离得到2株内生放线菌ECA023、ECA045,通过培养观察与16SrDNA序列分析,初步鉴定为链霉菌属(Streptomyces)和小单孢菌属(Micromonospora)放线菌.采用滤纸片法和MTT法研究了菌株发酵液的抑菌和抗肿瘤活性,结果表明:2株内生放线菌对4种病原菌和K562肿瘤细胞株均显示出较强的抑制活性,其中ECA023对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)表现出较强的拮抗作用,ECA045对K562细胞的平均抑制率达56.83％.     

天然东北红豆杉枝中紫杉醇和三尖杉宁碱含量变化特征

为研究天然东北红豆杉枝中紫杉醇和三尖杉宁碱的积累特点,系统采集了不同年龄、不同性别、不同营养时期和不同坡向的天然东北红豆杉枝样品,利用反相高效液相色谱对当年生、2年生和多年生枝中紫杉醇及三尖杉宁碱含量进行测定分析。结果表明:1)随树龄增加枝中的紫杉醇含量呈先上升后下降的趋势,而三尖杉宁碱含量随树龄增加而降低;2)雌株和雄株枝中两种紫杉烷类物质含量只在较大径级（60 cm）时有明显差异,即雌株中含量低于雄株,而在60 cm径级范围内,雌株和雄株间两种物质含量没有显著差异;3)随着营养时期的变化,从4月到10月,枝中两种紫杉烷类物质的含量整体呈先上升后下降并趋于稳定的变化趋势,其中紫杉醇含量在8、9月达到峰值,三尖杉宁碱含量在7、8月达到峰值;4)在不同坡向上,只有在较小径级植株的当年生枝中,阳坡两种物质含量高于阴坡,而在较大径级时无显著差异。      

篦子三尖杉的扦插繁殖研究

对篦子三尖杉不同长度扦插穗条、不同植株部位插穗和插穗的浸泡处理进行对比试验结果表明:不同插穗长度对篦子三尖杉扦插成活率没有影响,不同部位插穗扦插成活率差异大,以上部和中部1级枝成活率最高,其次是上部2级枝,最低是中部3级枝和下部2、3级枝;不同浸泡处理中,篦子三尖杉扦插成活率没有显著差异,但不同处理中,ABT处理会促进多发根;不同枝条长度和不同处理方式对篦子三尖杉插穗发枝量没有显著影响,但不同植株部位插穗发枝量有差异,中上部一级枝发枝量多.     

火焰原子吸收光谱法对贡山三尖杉中6种金属元素含量的测定

[目的]运用火焰原子吸收光谱法,测定贡山三尖杉中Cu、Mn、Fe、Zn、Mg和Ca 6种金属元素含量。[方法]用盐酸、硝酸加热消解样品,采用标准曲线法测定。[结果]所测定的贡山三尖杉中金属元素含量较高。[结论]该方法准确,结果令人满意。     

黔东南州篦子三尖杉群落结构特征研究

篦子三尖杉为国家Ⅱ级保护植物。为探索篦子三尖杉不同群落类型之间物种多样性的规律,比较群落结构和物种多样性的差异性,采用样方调查方法分析了黔东南州凯里市、镇远县、黎平县和台江县的4个篦子三尖杉群落的物种组成及群落结构。结果表明:4个篦子三尖杉群落共有维管植物54科87属102种,其中,蕨类植物5科、裸子植物2科、被子植物47科;4个群落中高位芽植物所占比例最大,一年生植物所占的比例最小;4个篦子三尖杉群落的成层现象均非常明显,基本上可以分为乔木层、灌木层和草本层3个层次,篦子三尖杉是灌木层中的优势种;受人为活动的影响,4个群落物种多样性水平表现出明显的差异性,物种多样性水平从高到低的顺序是:台江凯里镇远黎平;篦子三尖杉缺乏成年个体和幼苗,种群属于衰退型。     

内生真菌gyzy-20生产高三尖杉酯碱的成分分析及条件优化

[目的]为充分发掘篦子三尖杉（Cephalotaxus oliveriMast）内生真菌的应用价值。[方法]采用HPLC对内生真菌菌株gyzy-20的发酵提取组分进行鉴定,并采用正交试验进一步优化生产工艺。[结果]菌株gyzy-20的代谢产物中有高三尖杉酯碱生成,提取时间对高三尖杉酯碱含量的影响较大。优化的生产工艺为：碳源为葡萄糖,发酵10 d后超声5 min,添加2倍体积二氯甲烷萃取3 h,优化后的发酵和提取方法可提高高三尖杉酯碱的含量1.5倍以上,达到0.26μg/ml。[结论]该研究可为利用微生物发酵生产HHT提供可能。