重组大肠杆菌E.coli P84A/MC1061发酵生产卤醇脱卤酶的研究

用基因工程大肠杆菌E.coliP84A/MC1061生产卤醇脱卤酶,此后,进一步进行了酵母浸出物FM888与酵母蛋白胨FP101的联合调控作用研究。结果表明,用高溶解度酵母浸出物FM888替代原配方中的牛骨蛋白胨,可使E.coliP84A/MC1061生长速率增大,发酵稳定期的菌体浓度保持在较高水平,酶活提高了约2.4倍。当补料培养基中的FM888与酵母蛋白胨FP101的比例为7∶3时,菌体浓度保持在较高水平(OD600≥120),酶活进一步提高约50%,大大提高了单罐产率。此研究可为其他酶制剂的发酵生产提供借鉴。     

玉米醇溶蛋白及其在农产品保鲜中的应用

玉米醇溶蛋白是玉米的主要储藏蛋白,约占总蛋白含量的50%～60%.近年来随着对玉米醇溶蛋白研究的不断深入,它的应用范围逐步扩大.本文介绍了玉米醇溶蛋白的组成、分子结构、分子形状及玉米醇溶蛋白的溶解性、成膜特性和提取方法;阐述了玉米醇溶蛋白在农产品保鲜中的应用,并对玉米醇溶蛋白的几种提取方法的优缺点进行了比较分析.旨在为玉米醇溶蛋白的提取、利用和玉米的综合开发提供依据.     

50种中草药提取物对猪链球菌的体外抑菌试验

对猪链球菌临床分离耐药株分别进行纸片扩散法和微量稀释法检测,通过对抗菌效果的比较,筛选出对耐药菌抗菌活性好的中草药,测定50种中草药的水提物和75%乙醇提取物对5株猪链球菌临床分离耐药株的体外抗菌活性。试验结果表明,50种中草药中,只有中药1和中药2的提取物对猪链球菌临床分离耐药株有较好的抑制作用,其他中草药对猪链球菌临床分离耐药株均无抑制作用。结果表明,中药1和中药2的75%乙醇提取物比水提取物抗菌活性强。     

五昧子醇甲的超临界CO2流体萃取及RP-HPLC分析

通过正交设计试验,探讨了超临界CO2法萃取北五味子果实中五味子醇甲的工艺条件,并建立了五味子醇甲的质量分数高效液相色谱测定方法。研究表明：最佳提取条件为萃取压力25MPa,萃取温度45℃,萃取时间60min,提取率可达到0.970％;以乙腈-水溶液为流动相,在zorbax Eclipse XDB-C18柱进行高效液相色谱分析,平均回收率为98.64％,相对标准偏差为2.908％,检出限为0.02μg/L。     

核桃壳提取物体外抗氧化活性研究

为明确核桃壳提取物体外抗氧化活性,测定核桃壳乙醇提取物及其氯仿相对DPPH·、·OH、H2O2和O2-·的清除率及总抗氧化能力。核桃壳乙醇提取物及其氯仿相具有清除DPPH·、·OH、H2O2、O2-·的能力,且具有一定的还原能力;当样品浓度为2mg·mL-1时,核桃壳乙醇提取物对DPPH·、·OH、H2O2、O2-·的清除能力分别为84.91%、22.98%、33.54%、80.36%,还原力为1.971;其氯仿相对DPPH·、·OH、H2O2、O2-·的清除能力分别为93.42%、49.89%、47.58%、90.64%,还原力为0.998。在试验浓度范围内抗氧化能力与提取物浓度呈正相关,核桃壳乙醇提取物及其氯仿相具有体外抗氧化活性。     

Identification of a Group of Novel y-Gliadin Genes

γ-Gliadins are an important component of wheat seed storage proteins. Four novel γ-gliadin genes （Gli-ngl to Gli-ng4） were cloned from wheat （Triticum aestivum） and Aegilops species. The novel γ-gliadins were much smaller in molecular size when compared to the typical γ-gliadins, which was caused by deletion of the non-repetitive domain, glutamine-rich region, 3＂ part of the repetitive domain, and 5＇ part of the C-terminal, possibly due to illegitimate recombination between the repetitive domain and the C-terminal. As a result, Gli-ngl and Gli-ng4 only contained two and three cysteine residues, respectively. Gli-ngl, as the representative of novel γ-gliadin genes, has been sub-cloned into an Escherichia coli expression system. SDS- PAGE indicated that the both cysteine residues of Gli-ngl could participate in the formation of intermolecular disulphide bonds in vitro. Successful cloning of Gli-ngl from seed cDNA of T. aestivum cv. Chinese Spring suggested that these novel γ-gliadin genes were normally transcribed during the development of seeds. Phylogenic analysis indicated that the four novel γ-gliadin genes had a closer relationship with those from the B （S） genome of wheat.     

华山新麦草α-醇溶蛋白基因的克隆及原核表达分析

 【研究目的】克隆华山新麦草（Psathyrostachys huashanica）的α-醇溶蛋白基因,并对其进行生物信息学分析,构建该基因的原核表达载体,在大肠杆菌中诱导表达融合蛋白。【方法】采用同源克隆法从华山新麦草基因组DNA中分离克隆出α-醇溶蛋白基因并进行序列分析,将克隆的华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5克隆到表达载体pET-28a (+)上,获得重组质粒pET28a-Gli-Ns转化大肠杆菌BL21 (DE3)并诱导表达。【结果】从华山新麦草基因组DNA中克隆了4个α-醇溶蛋白基因：Gli-Ns-2 (FJ713595)、Gli-Ns-3 (GQ139525)、Gli-Ns-4 (GQ139526)和Gli-Ns-5 (GQ139527)。序列分析表明,4条序列具有α-醇溶蛋白基因的典型结构特征,含有8个或9个半胱氨酸残基,序列FJ713595为假基因。利用所构建的大肠杆菌表达载体,经IPTG诱导,华山新麦草α-醇溶蛋白基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核系统中特异性表达。Western-blot证实融合蛋白可成功表达。【结论】克隆了4个华山新麦草的α-醇溶蛋白基因序列,基因Gli-Ns-5(GQ139527)可在原核表达系统中成功表达,为小麦品质改良提供了新的候选基因。     

消癖散及水提物与醇提物体外透皮特性的 比较研究

[摘要〕目的通过对消疲散散剂、水提物与醇提物的体外透皮试验研究,比较不同提取工艺的经皮渗透特性,为 剂型设计、药理、毒理试验及临床研究提供依据〔方法以有效成分大黄素累积透皮百分率为测定指标,高效液相色谱 法定量,用改良的Franz扩散池及离体兔皮进行体外透皮实验,比较该方散剂及水提物与醇提物透皮速度、透皮百分 率与皮肤储量的差别、结果透皮速度由快至慢、皮肤储量由高到低,散剂、透皮总量由多至少依次为:醇提物>水提 物>散剂、结论醇提物透皮速度最快.皮肤储量最多.透皮总量最多、     

醇溶蛋白凝胶电泳方法在作物品种鉴定中的应用

利用醇溶蛋白凝胶电泳方法对陕西关中地区的33个小麦品种进行电泳分析,得出的各品种的电泳图谱及电泳模式证明,小麦种子醇溶蛋白凝胶电泳图谱具有良好的重现性、多态性和特异性,是用作品种鉴定的好方法。在此基础上,根据33个小麦品种的电泳图谱和电泳模式,制出了小麦品种鉴定检索表。与同工酶法相比,该方法所需仪器设备少,简便易行,不损伤种子发芽力。对大麦的初步研究表明,该方法用于大麦品种鉴定也是可行的。文中对该方法在遗传育种方面的应用也作了探讨。     

佛手的薄层色谱鉴别

为鉴别福建、广东、四川、浙江金华4种不同产地佛手果化学成分的异同，应用薄层色谱分别对其佛手醇的提取物和挥发油进行了定性分析。结果表明，在环己烷－乙酸乙酯（75：25）的展开系统，4种佛手醇的薄层色谱显示斑点不相一致；在苯－乙酸乙酯（9．6：0．4）的展开系统，佛手挥发油的薄层色谱显示4种佛手挥发油的成发也不相一致。