糖苷水解酶家族基因AghyGH1a参与莲草直胸跳甲对皂苷的代谢

为了解植物化合防御物质皂苷对专食性天敌莲草直胸跳甲Agasicles hygrophila的防御作用,测定莲草直胸跳甲2龄幼虫取食皂苷后的排泄和肠道变化,利用转录组测序筛选参与皂苷代谢的候选基因,并采用 RNA 干扰技术鉴定候选基因功能。结果发现,取食皂苷导致莲草直胸跳甲幼虫排泄量增加,肠道畸变,排泄量与取食皂苷浓度正相关。转录组测序发现,与对照相比,取食 100 mmol/L皂苷处理的莲草直胸跳甲幼虫肠道有496条差异表达基因,其中261个上调基因和235个下调基因。GO分类和KEGG分类分析发现糖苷水解酶家族1（glycoside hydrolase family1,GH1）基因集中在碳水化合物水解通路。利用RNA干扰技术鉴定发现,莲草直胸跳甲AghyGH1a基因沉默可导致幼虫取食皂苷后排泄量增加,肠道内容物颜色更暗沉。表明莲草直胸跳甲AghyGH1a参与皂苷代谢。     

高职城运类专业“四阶段递进式”实践教学模式的研究与实践

“完善教育教学标准,启动1+X职业技能证书制度,重视学生职业技能大赛,培养复合型技术技能人才”是国家“职教二十条”提出的要求,其目的是解决我国职业教育教学实践中普遍存在的“产与教分离,赛与教冲突,教与证不符”等问题,从而提出了高职城运类专业“四阶段递进式”实践教学模式,以城市轨道交通运营管理专业为例,从“以岗定教、产学结合”、“以赛促教、赛教融合”、“学以致用、双证融通” 3个方面,以“四阶段递进式”实践教学模式实施方法来具体阐述“岗、课、赛、证”相互融通的思想内涵与实施方法。     

通过染色体整合β-1,4-葡聚糖酶基因glu14提高绿色木霉对小麦纹枯病的防治效果

 绿色木霉LTR-2是生物防治菌株。利用来自巨大芽胞杆菌Ap25的β-1,4-葡聚糖酶基因glu14构建木霉表达载体pSilent/glu14,利用限制性内切酶介导法(REMI)转化绿色木霉LTR-2。PCR扩增及Southern杂交证实目的基因已插入木霉转化子的染色体DNA上。转化子的β-1,4-葡聚糖酶水解活性,对小麦纹枯病菌的平板抑制作用及温室防治效果较原始菌株LTR-2明显提高(P<0.01),其中转化子L-10的效果最好,平板抑制率比LTR-2提高了27.0%,温室防治效果比LTR-2提高了26.7%。本试验表明,利用REMI技术,将β-1,4-葡聚糖酶基因重组到木霉染色体DNA上,是获得高效木霉工程菌株的有效手段。     

拮抗放线菌B1菌株鉴定及其防治番茄灰霉病的初步研究

为明确放线菌B1菌株在植物病害生物防治中的应用潜力,采用平板对峙培养法、离体叶片和果实及温室盆栽苗测定其抑菌作用,通过多相分类法研究其分类地位,并且采用单因子试验与正交试验相结合的方法,筛选出该菌株的液体发酵培养基配方.结果表明:菌株B1对10种植物病原真菌和3种植物病原细菌有抑制作用,其中对番茄灰霉病菌、番茄早疫病菌、小麦纹枯病菌、甘蓝黑腐病菌和西瓜果腐病菌的抑制作用较强,对番茄灰霉病菌的生长抑制率达86.25%;菌株B1的代谢产物对番茄灰霉病菌菌丝有致畸作用;菌株B1发酵上清液在离体叶片和活体植株上对番茄灰霉病具有良好的生防作用,其防治效果分别为68.80%和64.03%.根据形态特征、培养性状、生理生化特性和16S rDNA序列分析结果,将菌株B1初步鉴定为淡紫灰链霉菌Streptomyces lavendulae.通过正交试验筛选出菌株B1的液体发酵培养基组成为:葡萄糖15 g、玉米浆20g、NH4H2PO40.5 g、MgSO41.0 g、自来水1 000mL,pH 7.2～7.4.     

浙紫薯1号及其突变体新栗再生体系的初步建立

[目的]为研究浙紫薯 1 号及其突变体新栗的遗传转化及 IbMYB1 基因控制紫甘薯花色苷的合成机理奠定材料基础。[方法]以浙紫薯 1 号及其突变体新栗为研究材料,选择不同部位外植体及不同培养基进行甘薯离体再生体系及胚状体诱导试验。[结果]利用茎尖、带芽茎段的外植体在 MS(+0.000 3 g/ml VB 溶液)培养基中培养可快速获得无菌试管苗;在愈伤组织的诱导试验中,新栗的叶柄在 LS 培养基中的出愈率较高,同一品种的甘薯其茎尖、茎段的出愈率均高于叶片、叶柄的出愈率,不同外植体的生长状况最好的是茎尖,其次是茎段,叶片和叶柄的生长状况都分别出现不同程度的愈伤组织黄化、褐化、皱缩、变枯性状。诱导胚状体发生的培养基为 LS+4 mg/L 脱落酸(ABA)+1 mg/L赤霉素(GA₃)+ 蔗糖 30 g/L+ 琼脂 6 g/L(pH 5.8)。[结论]初步建立了甘薯离体再生体系,并从叶片、叶柄、茎尖、茎段不同外植体都获得了胚性愈伤组织,利用茎尖、茎段的胚性愈伤组织成功诱导出胚状体。     

我国与周边国家H5N1亚型禽流感病毒血凝素演变分析

基于2008~2012年我国及周边国家禽流感病毒血凝素(HA)核酸在线BLAST,及MEGA5.1Bate4选取病案样本比对等方法,对我国与周边国家(地区)H5N1亚型禽流感病毒血凝素演变进行了研究。结果显示,各样本均具有与禽受体特异性结合的特性,但部分样本在对病毒受体结合特异性有影响的位点发生氨基酸替换,2010年和2011年我国家禽和人样本HA抗原表位关键位点氨基酸与参考疫苗有较大变异,部分样本与中国香港和越南野鸟样本抗原匹配较高;回顾性分析表明,我国人和家禽在面临原有病毒株感染的同时增加了感染境外来源病毒株和中国香港、青海野鸟毒株的风险,应加强对H5N1亚型禽流感病毒变异和境外毒株向我国境内传播的监测,及时研制新的疫苗以应对新毒株类型。     

披碱草和野大麦杂种F1和BC1代的形态学研究

对披碱草和野大麦及其杂种F1与BC1代的形态特征进行了观察比较，结果表明，杂种F1外部形态特征偏向亲本披碱草，F1穗长超过披碱草，小穗长、每小穗小花数、颖长、稃长也超过双亲的平均值，体现出较强的杂种优势，杂种F1继承了野大麦短根茎和每节3枚小穗的特性，正交、反交对F1植株颜色有明显影响，对F1其他形状没有明显影响；BC1代形态特征明显偏向轮回亲本野大麦，不同株系在外部形态上有较大变异；第一颗的形状可作为亲本和杂种的特征性状，以此作为鉴别杂种真伪的重要特征之一。     

光周期与氮肥互作对华农1号青饲玉米碳氮代谢相关酶的影响

于2005年3-7月,采用盆栽试验,设置3个不同光照长度处理和氮素水平,研究了不同光照时数及氮素水平对远缘玉米杂交种华农1号青饲玉米碳氮代谢相关酶活性的影响.结果表明,在苗期,16 h光照处理下植株叶片磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶、蔗糖磷酸合成酶、蔗糖合成酶、谷氨酰胺合成酶和硝酸还原酶等酶的活性显著低于13和10 h光照处理;至抽雄期和收获期,13和10 h处理下植株叶片各种酶的活性下降速率较快,而16 h处理下酶活性下降缓慢且显著高于13和10 h处理.在抽雄期或收获期,16 h处理下叶片各种酶的活性均随施氮量的增加而增加,但在13和10 h处理下均有几种酶的活性在高氮素水平下出现下降的趋势.总的看来,在16 h光照处理下,植株苗期碳氮代谢相对较弱,到中后期代谢能力明显提高,且耐高氮能力也较强,收获期植株叶片酶的活性显著高于13和10 h处理.     

山羊成纤维生长因子受体（FGFR1）基因的多态性检测

选择与羊同源性较高的牛FGFR1基因组序列（NM_001110207）设计3对特异性引物,采用DNA池PCR直接测序法快速检测黔北麻羊FGFR1基因的多态性,并以内蒙古白绒山羊和关中奶山羊比较,结果表明：在引PCR产物中只有黔北麻羊检测到多态,分别处于外显子5和内含子5的T133C和C211T的碱基突变,而其他2个品种...