HPLC法测定指甲油中苏丹红Ⅱ·苏丹红Ⅳ的含量

[目的]建立高效液相色谱法测定指甲油中苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ含量的方法。[方法]采用HPLC法对指甲油中苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ进行含量测定。色谱条件为:C18柱(3.5μm,4.6 mm×150 mm),柱温30℃,流动相为乙腈-缓冲溶液梯度洗脱,流速1.0 ml/min,检测波长484 nm及514 nm切换。[结果]苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ色谱分离良好,浓度与峰面积呈良好线性关系,线性范围分别为苏丹红Ⅱ0～50.26μg/ml,r=0.999 8(n=6);苏丹红Ⅳ0～49.78μg/ml,r=0.999 9(n=6)。平均加样回收率分别为95.9%(n=9,RSD=2.87%)、87.7%(n=9,RSD=0.4%)。[结论]该方法测定了5批指甲油中苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅳ的含量,分离度好、快速、简便、重现性好。     

小麦茎生长点转化研究初报

为了躲避转基因技术对组织培养的过分依赖,本研究以小麦为材料尝试了一种对生长点直接进行转化的方法,并初步证明了这一方法的可行性。具体做法是：将种子萌芽,然后剥去胚芽鞘暴露出生长点,再用玻璃纤维制作的小刷子将生长点刺伤,最后用带有外源基因的农杆菌进行侵染处理。用携带hph-GUS基因的LBA4404农杆菌,侵染处理1～11日龄幼苗(生长点),共培养7d后检测新生芽中GUS的瞬时表达情况;侵染1～2日龄幼苗(生长点),取长成植株的2～3朵小花进行GUS稳定表达检测。又用携带BADH和npt Ⅱ基因的AGL1农杆菌菌株侵染1日龄的幼苗(生长点),在含：100mg／L卡那霉素的蛭石中进行选择。结果表明,GUS的瞬时表达率随被处理幼苗的日龄增加而降低,以2日龄幼苗为最高(10．7％)。用花序检测GUS的稳定表达,被侵染受体为1日龄幼苗时的表达率高于2日龄的幼苗。蔗糖的存在并不提高GUS基因在花序中表达的频率。不过花序表现为GUS阳性的植株后代,经PCR检测后并没有证实GUS基因存在。用AGL1菌株进行转化,获得了13．6％的抗卡那霉素的绿色植株,但只有3株呈现PCR阳性,且只有1株结了实。     

普通和控释尿素配合深施提高冬小麦花期旗叶光合性能与氮素利用效率

【目的】探究在不同尿素类型与施用深度下,冬小麦开花后旗叶光合性能和光系统Ⅱ(PSⅡ)性能及氮素利用的差异,以期为协同提高氮素利用效率与籽粒产量,简化小麦生产过程提供理论依据。【方法】于2015—2016年与2016—2017年冬小麦生长季进行试验,以‘济麦22’为供试材料,采用二因素裂区试验设计,尿素类型处理(T)为主区,施用深度处理(D)为裂区。尿素类型包括普通尿素处理(T1,基追比为4∶6)与普通和控释尿素配施处理(T2,普通尿素、硫包膜尿素、树脂包膜尿素以4∶3∶3混合一次性基施),施用深度为地下5 cm (D1)与10 cm (D2)。测定了开花后旗叶气体交换参数和叶绿素荧光诱导动力学曲线(OJIP),及不同生育时期地上植株氮素积累量。【结果】2年试验结果表明,相较于普通尿素处理,普通和控释尿素配施处理可显著提高冬小麦有效穗数和千粒重,对穗粒数影响不显著;施用深度对2016—2017年千粒重影响显著,对2年单位面积有效穗数和穗粒数影响不显著;普通和控释尿素配合深施处理(T2D2)产量显著高于其它处理。尿素类型和施用深度对气体交换参数影响显著,普通和控释尿素配合深施处理可显著提高花后旗叶净光合速率(Pn)和气孔导度(Gs),显著降低胞间CO2浓度(Ci),相对延长了高光合持续期。普通和控释尿素配合处理较普通尿素处理显著提高了旗叶光系统Ⅱ(PSⅡ)反应中心对光能的吸收(φPo)、转化(φEo)以及电子在电子传递链中转移的效率(ψo);显著改善了电子传递链供体侧(Wk)和受体侧(Vj)性能,有效提高了产量形成期光合性能的稳定性。同一尿素类型下,深施处理对光系统Ⅱ(PSⅡ)性能的改善大于浅施处理。相较于普通尿素处理,普通和控释尿素配施处理可显著提高冬小麦生育中后期植株氮素积累量;相较于浅施处理,深施处理对冬小麦不同生育期氮素积累均有不同程度的提高。除对2016—2017年氮素生理利用率(NPE)影响不显著外,普通和控释尿素配合深施处理显著提高了2年冬小麦氮肥农学利用效率(NAE)、氮肥偏肥生产力(PEPN)、成熟期氮肥表观回收率(NRE)和2015—2016年氮素利用效率。【结论】普通尿素与控释尿素配合深施可显著提高冬小麦花期旗叶光合性能,促进氮素利用,增加产量,有利于冬小麦产量与氮肥利用之间的协同提高,省时增效效果明显,是本试验中最佳组合模式。     

钾肥对不同抗虫棉品种叶片光系统Ⅱ性能的影响

【目的】通过对不同抗虫棉品种功能叶叶片PSⅡ性能和有关参数的研究,探讨钾影响棉花叶片光合系统的机理,以期为棉花的钾肥施用提供科学依据。【方法】选用三种抗虫棉岱字棉99B (DP99B)、鲁棉研21(L21)、冀棉169 (J169)为供试材料。设2个施钾水平:施硫酸钾240 kg/hm^2 (K)和不施钾(CK)。于棉花见蕾期,利用便携式LI-6400XT光合仪测定了净光合速率(P_n)、气孔导度(G_s)、胞间CO_2浓度(C_i)。利用M-PEA型植物效率仪快速测定了叶绿素荧光动力学曲线(OJIP曲线)相关参数, PSⅡ反应中心单位活化截面积还原QA的激发能(TR_o/CS_m)、活性反应中心数目(RC/CS_m)、反应中心捕获的激子将电子传递到电子传递链中QA下游的其他电子受体的比例(Ψ_o)以及PSⅡ性能指数(PI_abs),PSⅡ单位反应中心热耗散掉的能量(DI_o/RC)、K点的可变荧光F_k占振幅F_j-F_o的比例(W_k)以及J点的相对可变荧光(V_j)。利用JIP-test进行了叶绿素荧光动力学曲线(OJIP曲线)的参数分析。【结果】施钾对三个棉花品种叶片的P_n、G_s、叶绿素含量、PSⅡ反应中心单位TRo/CS_m、RC/CS_m、Ψ_o以及PI_abs均有显著的提高作用,同时显著降低了PSⅡ的DI_o/RC、K点的W_k以及J点的V_j。施钾后,岱字棉99B (DP99B)、鲁棉研21 (L21)、冀棉169 (J169)的Pn在2016年分别提高了9.60%、19.84%、11.85%,2017年分别提高了9.14%、18.48%、9.60%;PSⅡ的整体性能(PI_abs)分别增加了10.79%、17.93%、14.04%。【结论】施用钾肥有利于提高不同棉花品种叶片PSⅡ反应中心电子供体侧和受体侧以及PSⅡ反应中心电子受体侧之后的电子传递链性能,从而有效提高PSⅡ的整体性能,最终增强了叶片的光合能力。三个品种相比,施钾对L21光合系统的整体改善效果优于DP99B和J169。由此可见,在实际生产中,可以根据不同棉花品种对钾的敏感性合理施钾。但由于我国棉区较多,生产条件差异大,这一结论需在不同的种植区进行进一步验证。     

德援项目森林可持续经营示范区建设成效调查

为了全面掌握德援项目森林可持续经营示范区建设完成情况,评价项目实施以来取得的成效,采用实地抽样调查方法对湖北省2005年以来实施的森林可持续经营示范区建设项目进行了调查。结果表明:林分结构得到明显改善,形成了由乡土树种组成的多树种混交结构和异龄林结构的近自然森林;森林植物种类明显增多,形成比实施前多5种以上的植物;森林质量显著提高,林木平均胸径增长50%以上,平均树高增长10%以上,平均每公顷蓄积增长50%以上;森林郁闭度保持在0.8~0.9,林地土壤腐殖质层厚达到10cm左右。示范区的示范效应突显,为项目区全面开展森林可持续经营提供了技术保障和科学依据。     

降钙素基因相关肽对猪小肠上皮细胞钠离子依赖型Ⅱb磷转运蛋白表达及磷吸收的影响

本试验旨在研究不同浓度降钙素基因相关肽(CGRP)对猪小肠上皮细胞钠离子依赖型Ⅱb磷转运蛋白(NaPi-Ⅱb)表达和磷吸收的影响.选用第3～8代猪小肠上皮细胞进行试验,按单因素试验设计,将试验细胞分为1个对照组和5个CGRP(1×10-11～1×10-7 mmol/L)试验组,每组设6个重复.用4-甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞生长速度,采用比色法测定CGRP干预24 h后细胞上清液磷含量,用RT-PCR法检测NaPi-Ⅱb mRNA相对表达量,以及蛋白质印迹(Western blot)法检测NaPi-Ⅱb蛋白表达.结果表明:与对照组相比,不同浓度CGRP对细胞生长没有显著影响(P＞0.05);各试验组均极显著或显著地促进了磷的吸收和NaPi-ⅡbmRNA的相对表达量(P＜0.01或P＜0.05);除1×10-10 mmol/L组外均显著提高了NaPi-Ⅱb蛋白的表达(P＜0.05).研究结果表明,CGRP通过诱导小肠上皮细胞中NaPi-Ⅱb的表达促进细胞磷的吸收,其中以1×10-9、1×10-8 mmol/L浓度的CGRP促进效果较为显著.     

Effect of ERK1/2/c-Fos signal pathway on angiotensin-(1-7) inhibiting proliferation of rat glomerular mesangial cell strain induced by angiotensin Ⅱ

AIM: To investigate the effect of ERK1/2/c-Fos signal pathway during angiotensin-(1-7) inhibiting proliferation of rat glomerular mesangial cell strain (GMCS) induced by angiotensin Ⅱ. METHODS: Rat glomerular mesangial cells (GMC) were co-cultured with angiotensin Ⅱ and different doses of angiotensin-(1-7). The numbers of GMC were evaluated by crystal violet staining. The amounts of p-ERK1/2 and c-Fos expressions were detected by Western blotting. RESULTS: Angiotensin- (1-7) showed its inhibitory effects on GMC number increasing induced by angiotensin Ⅱ as well as the amounts of p-ERK1/2 and c-Fos expressions in a concentration dependent manner. CONCLUSION: ERK/c-Fos signal pathway is involved in the inhibitory effects of angiotensin-(1-7) on angiotensin Ⅱ -induced GMC proliferation.     

Effects of endothelial progenitor cell-conditioned medium on proliferation and differentiation of type Ⅱ alveolar epithelial cells exposed to hyperoxia

AIM: To investigate the effect of hyperoxia exposure on the paracrine function of endothelial progenitor cells (EPCs), and to explore the effects of paracrine factors of EPCs on the proliferation and differentiation of type Ⅱ alveolar epithelial cells (AECⅡ) exposed to hyperoxia. METHODS: Bone marrow-derived mononuclear cells were isolated and cultured in EGM-2MV medium for 7~10 d to obtain and identify EPCs. EPCs were cultured in room air (RA) or 60% O₂. The normoxia EPC-conditioned medium (E-CM-RA) and hyperoxia EPC-conditioned medium (E-CM-O₂) were collected. The levels of VEGF, FGF10, PDGF-BB and EGF in E-CM-RA and E-CM-O₂ were detected by ELISA. AECⅡ from adult rats were isolated, purified and cultured for 2 d, then divided into RA group, O₂ group, O₂+E-CM-RA group and O₂+E-CM-O₂ group. The proliferation of AECⅡ was detected by MTT assay and cell counting. The mRNA expression of SP-C and AQP5 was quantified by real-time PCR. RESULTS: The expression of VEGF and FGF10 in E-CM-O₂ group decreased significantly compared with E-CM-RA group (P<0.01). There were significant differences in AECⅡ viability and number among the 4 groups at 12 h, 24 h, 2 d and 3 d (P<0.01). Compared with RA group, AECⅡ viability and number in O₂ group decreased significantly at 12 h, 24 h, 2 d and 3 d (P<0.05). The AECⅡ viability and number in O₂+E-CM-RA group were significantly higher than those in O₂ group at 12 h, 24 h, 2 d and 3 d (P<0.05). However, no significant difference in AECⅡ viability and number between O₂+E-CM-O₂ group and O₂ group at 12 h, 2 d and 3 d was observed. There were significant differences in the mRNA expression of SP-C and AQP5 in the 4 groups at 24 h, 2 d and 3 d (P<0.01). Compared with RA group, the mRNA expression of SP-C in O₂ group was significantly inhibited (P<0.01), but the mRNA expression of AQP5 was promoted (P<0.01) at 24 h, 2 d and 3 d. Compared with O₂ group, the mRNA level of SP-C in O₂+E-CM-RA group and O₂+E-CM-O₂ group (P<0.05) at 24 h, 2 d and 3 d was increased, and the mRNA expression of AQP5 (P<0.01) at 2 d and 3 d was inhibited.CONCLUSION: EPCs secrete VEGF and FGF10, and hyperoxia impairs this paracrine function. Hyperoxia exposure inhibits AECⅡ proliferation and the mRNA expression of SP-C, but promotes the mRNA expression of AQP5. EPC-conditioned medium improves the proliferation of hyperoxia-exposed AECⅡ, and inhibits the transformation of AECⅡ. Hyperoxia exposure impairs the paracrine function of EPCs, and weakened the effects of E-CM-O₂ on AECⅡ.     

群体密度对亚种间杂交稻Ⅱ优162产量形成的影响

通过设置９～３６株／ｍ２１０个水平的栽插密度试验,探讨了群体密度对亚种间杂交稻Ⅱ优１６２生长发育与产量形成的影响,结果表明：有效穗数随着栽插密度的增大而增多,穗粒数则相反,产量（Ｙ）与栽插密度（Ｘ）满足Ｙ＝Ｘ３３０６＋５９８６×１０－６×Ｘ１．２２３７２６方程,产量在密度１２～３０株／ｍ２范围内差异不显著,说明亚种间杂交稻Ⅱ优１６２自我调节能力很强;单株分蘖数和成穗率随着群体增大而降低,达到最高苗的时期和有效分蘖终止期随栽插密度增大而提早;抽穗后干物质积累量和ＲＧＲ随密度增大而降低。     

伯氏致病杆菌SN269发酵液中madumycin Ⅱ的分离与纯化

利用硅胶柱层析、凝胶柱层析技术从伯氏致病杆菌SN269发酵液中分离得到化合物D3。通过核磁共振波谱、质谱及旋光度等分析,并结合相关文献,将其鉴定为madumycinⅡ。采用菌丝生长速率法测定了madumycin Ⅱ对植物病原真菌的抑菌活性。结果表明:madumycin Ⅱ对辣椒疫霉病菌Phytophthoa capsici和番茄灰霉病菌Botrytis cinerea菌丝生长具有明显的抑制作用,其EC50值分别为35.32和35.40 mg/L。