基于三维荧光光谱法的水样中苯酚和对苯二酚含量测定

[目的]研究用荧光分光光度法测定水中苯酚和对苯二酚的含量,为环境样品中痕量物质的分析提供测定方法。[方法]取水样,加入β-环糊精溶液、EDTA溶液及缓冲溶液后测定。[结果]在波长对为λEx/λEm=240 nm/309 nm时测定苯酚含量,线性范围为0～1×10-4mol/L,检出限为6.6×10-8mol/L;在波长对为λEx/λEm=310 nm/340 nm时测定对苯二酚含量,线性范围为0～1.5×10-5mol/L,检出限为5.2×10-9mol/L。[结论]通过三维荧光扫描来选择干扰少而测定灵敏度较高的检测波长,实现了荧光分光光度法直接测定水样中的苯酚和对苯二酚含量。     

Effects of Yeast Oligosaccharide Diet Supplements on Growth and Disease Resistance in Juvenile Nile Tilapia,Oreochromis niloticus

Commercially available yeast and yeast subcomponents consisting mainly of β-glucan or oligosaccharide feed additives were added to diets of juvenile (12–18g) Nile tilapia (Oreochromis niloticus) at rates recommended by suppliers. Three experiments were conducted following a basic protocol with varied rates of supplementation, duration of feeding, and stocking densities. Experimental diets were fed twice daily to apparent satiation for a period of two or four weeks, at the end of which feed consumption and weight gain were measured. Following the experimental feeding period, serum components, including protein and immunoglobulin concentrations, as well as lysozyme and complement activities, were measured. A disease challenge was conducted with pathogenic isolates of Streptococcus iniae or Edwardsiella tarda. Weight gains were not significantly different in fish fed the supplemented diets when compared to the control diet. There were significant differences in fed intake within individual experiments; however, this effect was not consistent in all three experiments. Overall feed efficiency was not significantly affected by diet. There were no differences in serum components of fish sampled at two or four weeks. Fish fed the experimental diets did not have lower mortality or morbidity after disease challenge compared to fish fed the control diets. Specific antibody against S. iniae or E. tarda measured by ELISA did not reveal differences in the fish surviving the challenge. We conclude that the incorporation of these commercial yeast component products into the diet of juvenile Nile tilapia at these rates and for these feeding periods had no effect on growth, serum components, antibody responses, or survival following S. iniae or E. tarda infection.     

β-兴奋剂在畜牧业上的应用及残留检测方法(综述)

本文对β－兴奋剂的化学结构、作用机理、应用情况、检测方法以及使用不当 可能产生的负作用和毒性估计作了比较详尽的综述．     

可变剪接体WNT4-β对山羊卵泡颗粒细胞增殖和激素分泌的影响

旨在研究WNT4的一个可变剪接体（WNT4-β）对山羊卵泡颗粒细胞增殖的影响。本研究选取4~6月龄健康母羊20只,采集双侧卵巢,体外分离卵泡颗粒细胞进行培养。通过免疫荧光染色技术确定WNT4-β的表达位置;在山羊颗粒细胞中过表达或干扰WNT4-β后,利用RT-qPCR、Western blot检测WNT4-β和WNT信号通路中关键标记因子ROA1、RHOA及颗粒细胞增殖标记基因cyclin-D2、CDK4的表达变化;CCK-8技术检测颗粒细胞增殖情况;并通过ELISA分析颗粒细胞中生殖激素水平的变化。免疫荧光染色结果显示,WNT4-β只在山羊卵泡颗粒细胞中表达,在卵母细胞不表达;过表达WNT4-β后,WNT4-β和颗粒细胞增殖因子cyclin-D2、CDK4的mRNA相对表达量极显著增加（P<0.01）,蛋白表达水平显著增加（P<0.05）;WNT信号通路标记因子ROA1、RHOA mRNA表达水平显著增加（P<0.05）,β-catenin蛋白表达水平显著增加（P<0.05）;干扰WNT4-β后,WNT4-β、cyclin-D2、CDK4、ROA1和RHOA 的mRNA表达显著降低（P<0.05）,WNT4-β、cyclin-D2、CDK4及β-catenin蛋白表达显著降低（P<0.05）。CCK-8结果显示,过表达WNT4-β促进颗粒细胞增殖（P<0.05）;ELISA结果显示,过表达WNT4-β后,颗粒细胞中雌二醇（estradiol,E₂）水平显著增加（P<0.05）,孕酮（progesterone,P₄）水平升高但不显著（P>0.05）;干扰WNT4-β后则结果相反,颗粒细胞增殖受到抑制（P<0.05）,E₂和P₄的水平显著降低（P<0.05）。综上所述,WNT4可变剪接体WNT4-β通过调控WNT信号通路促进山羊卵泡颗粒细胞增殖及类固醇激素分泌,本研究为解析WNT4调控山羊颗粒细胞增殖的潜在分子机制提供理论基础。     

β-葡聚糖对肉仔鸡生长性能、免疫功能和肠道微环境的影响

本试验旨在研究饲粮中添加β-葡聚糖对肉仔鸡生长性能、免疫功能和肠道微环境的影响。选取1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡672只,随机分为4个组,每组14个重复,每个重复12只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别饲喂在基础饲粮上添加100、150和200 g/tβ-葡聚糖的试验饲粮。试验期为42 d。结果表明:1)150 g/t剂量组1~21日龄肉仔鸡体增重显著高于对照组(P0.05)。2)150 g/t剂量组肉仔鸡血清免疫球蛋白含量高于对照组(P0.05)。3)21日龄时,150 g/t剂量组肉仔鸡盲肠内乳酸菌数量显著高于对照组(P0.05),空肠和回肠内沙门氏菌数量显著低于对照组(P0.05);42日龄时,150和200 g/t剂量组肉仔鸡盲肠内沙门氏菌数量显著低于对照组和100 g/t剂量组(P0.05)。4)饲粮添加β-葡聚糖对42日龄肉仔鸡空肠绒毛高度与隐窝深度比值影响显著(P0.05)。由此可见,饲粮中添加适量的β-葡聚糖可提高肉仔鸡出栏重,改善肉仔鸡生长性能,增加盲肠内乳酸菌数量,减少空肠、回肠和盲肠内沙门氏菌数量。     

慈竹β-tubulin基因片段的克隆及序列分析

利用Trizol一步法提取慈竹幼笋总RNA,运用RT-PCR方法首次在慈竹中克隆到3条β-tubulin基因部分序列,命名为Na-βtub1、Naβ-tub2、Naβ-tub3,长度分别为958bp、958bp和959bp,分别编码318、318和319个氨基酸。核酸和氨基酸的序列比对分析结果表明,慈竹中3条β-tubulin基因核酸和推测的氨基酸序列之间相似性分别为92.46%和98.22%,与禾本科植物水稻、玉米、小麦的β-tubulin基因核酸和氨基酸序列相似性分别在89%和95%以上。     

β-1,3-1,4葡聚糖酶基因双拷贝工程菌株的构建与发酵研究

本试验旨在研究β-1,3-1,4葡聚糖酶双拷贝基因毕赤酵母工程菌株的构建及发酵。首先,通过对质粒pGAP-glu-opt进行PCR扩增获得密码子优化的β-1,3-1,4葡聚糖酶基因glu-opt,用EcoR I和Not I双酶切后与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,获得重组质粒p9K-glu-opt。该重组质粒经Sac I线性化后转化毕赤酵母GS115菌株,利用不含组氨酸的MDS平板和摇瓶培养,筛选重组菌株,命名为GS115/9K-glu-opt。制备GS115/9K-glu-opt感受态细胞,再用线性化的重组质粒pPIC-glu-opt二次转化,在含有抗生素Zeocin的YPDS平板上筛选glu-opt基因双拷贝重组菌株GS115/2xglu-opt。双拷贝重组菌在10 L发酵罐中进行高密度发酵培养及甲醇诱导表达,β-1,3-1,4葡聚糖酶最高酶活达到21 600 U/mL,约为单拷贝工程菌株X33/pPIC-glu-opt发酵活力的1.44倍;蛋白表达量达8.4 g/L,约为X33/pPIC-glu-opt的1.68倍。     

甘肃高山细毛母羊血浆中雌二醇和孕酮的含量变化

选用6只甘肃高山细毛周岁母羊,于5月30日～9月20日采集血样,用RIA方法进行血浆中雌二醇、孕酮激素含量的测定分析。结果表明:乏情期雌二醇的平均值为(7.42±4.69)pg/mL,7月17日达到第一个峰值(16.81±7.03)pg/mL,P<0.05,8月11日达到第二个峰值(9.82±1.37)pg/mL,P<0.05;孕酮的平均值为(0.26±0.08)ng/mL,7月9日达到峰值(0.5±0.3)ng/mL,P<0.05,波动周期在15d左右;发情后24h雌二醇的平均值为(9.76±2.4pg/mL),孕酮的平均值为(0.76±0.21)ng/mL。     

中药产复康对免疫功能低下小鼠细胞因子的影响

[目的]研究产复康对免疫功能低下小鼠细胞因子的影响,为进一步研究其对机体免疫功能的影响提供基础：[方法]通过给小鼠2次皮下注射40mg/kg体重的环磷酰胺,建立免疫抑制模型,并分别以10、15、2．0g/kg的剂量灌服产复康,检测小鼠血清中细胞因子IL10、IL-2和TNFα水平的变化,[结果]单一灌服产复康明显提高了正常小鼠血清中的IL-1β、IL-2和TNFα水平;环磷酰胺降低了小鼠血清中IL-1β、IL-2和TNFQ水平;产复康显著提高免疫抑制小鼠血清中IL-1β、IL-2和TNFα水平。[结论]产复康能拮抗环磷酰胺的免疫抑制,提高机体的免疫功能。     

发酵和酶解结合对乳清蛋白抗原性影响的研究

以瑞士乳杆菌为发酵菌种,胃蛋白酶和碱性蛋白酶为水解用酶,研究了乳酸菌发酵和蛋白酶酶解结合对乳清中β-乳球蛋白（β-LG）和α-乳白蛋白（α-LA）抗原性的影响。试验结果表明：与直接酶解相比,乳清先经瑞士乳杆菌发酵会促进胃蛋白酶对β-LG和α-LA的降解,提高最终水解液中的游离氨基酸浓度,减少大肽的生成,但β-LG的抗原性仅比直接酶解降低了5%,而α-LA的抗原性反而升高了6%～7%。对于碱性蛋白酶,发酵并没有提高最终水解液中的游离氨基酸浓度,对β-LG和α-LA抗原性也没有显著影响。