磷酸二酯酶在猪卵巢的表达与相关中药对其活性的影响

为了测定猪卵巢组织磷酸二酯酶（PDE）同工酶基因表达类型与活性规律，研究相关中药的作用机理，为繁殖障碍性疾病治疗积累资料。作者提取中国实验用小型猪卵巢组织总RNA，应用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）测定PDE同工酶在其中的表达。选取催情散等复方及单味药，运用高效液相色谱法（HPLC）根据作用前后cAMP/cGMP含量的变化，分析对PDE活性的影响。结果检测的18个PDE亚型中除PDE4C外，PDE 1A、1B、1C、2A、3A、3B、4A、4B、4D、5A、7A、7B、8A、8B、9A、10A、11A mRNA在卵巢组织中均有表达。卵巢组织PDE活性较强，其中cGMP-PDE活性大于cAMP-PDE活性。催情散对卵巢组织cGMP-PDE活性均有较强的抑制作用，其中单味药淫阳藿作用最强。研究结果表明卵巢组织含有丰富的PDE同工酶，在通过环核苷酸水平卵巢机能调节中发挥着重要作用，中药催情散的作用与显著抑制cGMP-PDE活性有关。     

牛分支杆菌CFP-10的原核表达及其在牛结核病诊断中的应用

低分子质量的蛋白抗原CFP-10是一种重要的牛分支杆菌早期分泌蛋白.为了检测该蛋白和其他几种抗原在牛结核病诊断中的临床应用,对CFP-10的基因进行克隆,鉴定,并在原核系统中表达.PCR法扩增cfp-10基因片段,连接到pET-22b( )原核表达载体中,再转入表达宿主E.coli BL21(DE3)PlysS菌株内,用IPTG诱导,进行蛋白表达、纯化.分别以CFP-10、ESAT-6、MPT83、MPT70、牛PPD、CFP-10与ESAT-6混合蛋白,MPT83与MPT70混合蛋白为抗原,用间接ELISA法诊断牛结核病.结果表明,以CFP-10与ESAT-6混合蛋白作为抗原检测牛结核病的特异性和敏感性分别达到了100%和63.6%,均超过了其他单抗原或抗原组合,为以筛选合适抗原为基础的血清学诊断技术提供了有力的支持并创造了良好的应用前景.     

民猪FSHβ-亚基基因的多态性分析

采用PCR-SSCP方法,对108头民猪的FSHβ-亚基基因的2个基因座位进行了研究。结果表明:FSHβ-亚基基因的这2个基因座位在民猪内都存在AA、AB、BB3种基因型,A、B基因频率之间差异显著。本实验进一步证明了FSHβ-亚基基因在民猪内存在着丰富的多态性。     

日粮中脂肪对β-胡萝卜素吸收的影响

β-胡萝卜素：分子式C40H56,相对分子质量为536.88（按1983年国际原子量表）,其结构式为：     

浅论酶联免疫吸附法在饲料安全检测中的应用

酶联免疫吸附技术作为先进的免疫化学检测技术正越来越广泛地应用于饲料安全检测。本文简要介绍了酶联免疫吸附法的原理在饲料安全检测中的运用及其试验的条件要求。     

酶解羽毛粉对蛋鸡生产性能的影响

选用192只23周龄产蛋良好的海兰褐商品蛋鸡,探讨日粮中添加不同比例的酶解羽毛粉对蛋鸡生产性能的影响,设3个处理,每个处理4个重复,每个重复16只鸡,三层阶梯式笼养,自由采食和饮水,进行饲养试验。试验期为30d。对各处理组的蛋鸡日只耗料量、产蛋率、日只产蛋量、平均蛋重、料蛋比的记录数据进行统计分析,研究用羽毛粉代替部分植物蛋白饲料（豆粕）的可行性。结果表明,日粮中添加2．5％和5％酶解羽毛粉对蛋鸡日只耗料量、产蛋率、日只产蛋量、平均蛋重、料蛋比5项指标均无显著影响（P〉0．05）。因此,在蛋鸡日粮中用羽毛粉代替部分植物蛋白饲料原料是经济可行的。大力开发利用羽毛粉,对解决我国目前蛋白资源紧缺的状况具有重要的理论和现实意义。     

酶联免疫分析技术及其在进出口动物产品兽药残留检测中的应用

进出口动物产品兽药残留对食品安全的影响越来越明显,日益成为阻碍国际间贸易的重要因素,这对食品兽药残留的快速检测提出了高要求。作者主要介绍酶联免疫分析技术的基本原理、分类和技术要点,并对其在动物产品兽药残留检测中的应用、问题和前景进行综述。     

蚕卵蛋白酶解产物的体外抗氧化活性测定

以家蚕卵为原料,采用碱溶酸沉法制备蚕卵蛋白粉后经碱性蛋白酶水解得到含多肽类的酶解液。以总抗氧化能力、总还原能力、清除亚硝酸盐能力及清除羟自由基(·OH)能力等为考核指标,以维生素C(Vc)及谷胱甘肽(GSH)为对照,测定蚕卵蛋白酶解液的体外抗氧化活性。结果表明:蚕卵蛋白酶解液的总抗氧化能力在质量浓度2.7 mg/m L时高于相同浓度的Vc和GSH溶液,其质量浓度2.7 mg/m L时高于相同浓度的GSH而低于Vc溶液;蚕卵蛋白酶解液的总还原能力低于Vc和GSH溶液;对亚硝酸盐的半数清除浓度(EC_(50))为1.44 mg/m L,清除能力小于Vc和GSH溶液;对·OH自由基的EC_(50)为0.19mg/m L,清除能力大于Vc和GSH溶液。研究结果显示蚕卵蛋白酶解液中的多肽类物质具有较好的体外抗氧化活性,这为利用生产上的废弃蚕种资源提供了新思路。     

家蚕微孢子虫烯醇化酶(Enolase)基因的克隆及序列分析与原核表达

烯醇化酶(enolase,ENO)是糖酵解途径的限速酶,对家蚕微孢子虫(Nosema bombycis,Nb)烯醇化酶的研究有助于了解微孢子虫的能量代谢机制。依据微孢子虫基因组数据库中的家蚕微孢子虫烯醇化酶编码序列设计引物,以家蚕微孢子虫基因组DNA为模板,PCR扩增获得家蚕微孢子虫烯醇化酶基因(Nb ENO)。该基因ORF全长1 242 bp,编码413个氨基酸,预测蛋白质分子质量46.323 k D,等电点6.13;蛋白质二级结构主要由α螺旋(28.33%)、延伸片段(22.52%)和无规则卷曲(49.15%)组成,含有25个磷酸化位点和1个糖基化位点,无信号肽和跨膜结构域。系统进化树分析Nb ENO与蜜蜂微孢子虫(Nosema ceranae)烯醇化酶基因序列(Nc ENO)的亲缘关系较近,序列比对显示二者的一致性为62.10%。将Nb ENO基因插入原核表达载体p ET-28a并转化大肠埃希菌Rosatta(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达后获得预期大小约50 k D的重组Nb ENO蛋白,有利于进一步研究Nb ENO的功能及亚细胞定位。