微囊藻毒素MCLR的分离与纯化

通过萃取和常压柱层析色谱技术的合理组合,建立了从实验室培养的铜绿微囊藻中提纯微囊藻毒素MCLR的有效方法。MCLR粗提液先经过正己烷萃取脱脂、固相萃取净化,再用Sephadex LH-20凝胶过滤层析色谱分离去除杂质和色度,流出液分管收集,通过测定流出组分在238nm处的吸光度值,并对峰值组分进行鉴定,证明第2个洗脱峰为MCLR,其纯度为40.5%。最后利用DEAE Sepharose CL-6B阴离子交换层析进一步纯化,以水为初始缓冲液,以3mmol/L NaCl水溶液洗脱MCLR,得到MCLR在238nm的特征吸收峰,MCLR的纯度达90%以上,最终得率为66.2%。     

微囊藻毒素的快速提取方法研究

我国水体蓝藻水华主要产生两种微囊藻毒素microcystin-LR(MCLR)和microcystin-RR(MCRR),针对蓝藻藻细胞内微囊藻毒素的提取和检测问题,提出微波和沸水浴取代传统溶剂萃取前处理的改善方法,采用标准品和实际样品分析了方法的可行性和提取效率.结果表明,沸水浴和微波(800W)处理10 min不会引起标准品的变异;以实验室培养的产毒铜绿微囊藻(Microcystis.aeruginosa)PCC7820为样品的提取实验表明,两种快速提取方法与传统的5%乙酸、70%甲醇萃取法提取效率的相对误差分别为4.6%(MCLR)和1.7%(MCRR).两种方法操作方便,并且可以有效地避免有机溶剂耗费和甲醇等有机溶剂残留对后续检测的干扰.应用该方法分析了天然水样,表明方法具有实用性.