Plasma levels of vitamin D3 metabolites during parr-smolt transformation of Atlantic salmon Salmo salar L.

Plasma vitamin D and vitamin D metabolites were measured in Atlantic salmon parr during smoltification and after transfer to seawater. The fish were fed commercial feed for 5 months under natural light, and Na⁺/K⁺ ATPase was measured as an indicator of the smoltification status. No significant differences were recorded in the level of plasma vitamin D metabolites. However, a tendency of increasing plasma concentration of 25OHD₃ and also a temporary increase in plasma 1,25(OH)₂D₃ and 24,25(OH)₂D₃ were recorded prior to seawater transfer. The minor changes in plasma levels of the metabolites indicate a role of the vitamin D metabolites during parr–smolt transformation, although we do not know whether the increased levels are caused by increased synthesis of the metabolites or by decreased binding to receptors or decreased excretion.     

海洋贝类Toll样受体及信号通路的研究进展

Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)是模式识别受体家族(PRR)中重要的一员,它可以特异地识别病原体相关的分子模式(PAMP),激活信号级联、诱发固有免疫反应,在抵御病原微生物过程中发挥重要作用。TLRs最早在果蝇胚胎中发现,是一类进化高度保守的免疫受体家族,在果蝇及脊椎动物中研究得较为透彻。海洋贝类具有较高的经济价值及重要系统进化地位,近年来,大量贝类的Toll样受体及信号通路相关因子被发现。本文综述了Toll样受体的结构、信号通路和海洋贝类TLR及信号通路相关因子的研究进展,有助于丰富海洋贝类固有免疫理论研究。     

基于改进Hough变换的农田作物行快速检测算法

选取苗期农田作为研究对象,采集了包含行栽作物和土壤背景的农田图像,针对现有作物行定位方法易受外界干扰和处理速度较慢的不足,提出将投影法和直接Hough变换法相结合检测作物行的算法.采用2G-R-B 法和OTSU法将图像二值化,通过快速中值滤波算法去除噪声,再利用垂直直方图投影将图像进行水平条划分获取作物垄平均定位点,最后通过Hough变换检测垄定位点,得到作物行中心线.试验结果表明:基于垂直直方图投影的Hough变换检测作物行中心线的算法在保证高定位精度的同时,算法处理速度比直接Hough变换检测法提高了3倍,得到的定位基准线能代表作物行走向.     

油菜黑胫病菌T-DNA插入诱变因素优化及突变体筛选

油菜黑胫病是由Leptosphaeria biglobosa引起的一种真菌病害。这种病害在我国油菜产区广泛发生,并造成一定的经济损失。为通过获取突变体来研究L. biglobosa的生态适应性机制及致病机制,本文优化了影响农杆菌介导转化（ATMT）油菜黑胫病菌L. biglobosa菌株Lb731的因素,评估转化子质量,并筛选相关突变体。结果明确了农杆菌介导转化菌株Lb731的最佳因素：潮霉素B浓度为50 μg/mL,转化受体（分生孢子）培养时间为15 d (20℃),浓度为2 × 10^7~8孢子/mL,农杆菌-受体共培养温度为25℃,共培养时间为72 h。在最适条件下的转化效率达到80个转化子/百万分生孢子。T-DNA插入基因组的频率为100%,单拷贝插入频率为72.7%,转化子抗潮霉素性状能稳定遗传。从2136个转化子中获得了11个菌丝生长减缓突变体,7个色素产生缺陷突变体和14个分生孢子产生缺陷突变体,并从这些突变体中鉴定出7个致病力丧失突变体。采用hiTAIL-PCR技术,从3个突变体中获得了T-DNA插入位点侧翼序列。上述结果为深入研究L. biglobosa的生态适应性机制及致病机制提供了材料和线索。     

提高甜菜遗传转化频率的研究

以甜菜叶柄为外植体，通过农杆菌介导转化，将玉米胚乳核糖体失活蛋白基因(cRIP)导入甜菜，对影响转化频率的因素：卡那霉素的浓度、头孢霉素的浓度、农杆菌感染时间和浓度等进行了探讨，初步建立了转化频率较高的转化系统．当卡那霉素浓度为100mg／L，头孢霉素浓度为500mg／L，农杆菌浓度OD值为0.3-0．4，感染时间为8～10min时．抗性不定芽分化率可达36．5％。该转化系统为转基因植株的获得奠定了基础。     

亚麻转基因中抗生素应用效果的研究

在利用农杆菌介导法进行亚麻抗除草剂草丁膦(Basta)目的基因(Bar)导入工作中；对选择培养基内加入．500mg/l克拉维酸钾(timentin进口) 200mg/l头孢噻肟(claforan进口)的抗菌素来取代500mg/l头孢噻肟(Cefotaxime国产)不仅脱菌效果彻底，期效长，且不影响亚麻愈伤形成和芽的分化；同时对再生植株进行了盆栽Basta抗性筛选试验，获得不同抗性的植株和种子。     

根癌农杆菌介导柱花草炭疽菌遗传转化体系的优化

选取含有氯嘧磺隆抗性标记的ILV1基因和报告基因GFP二元载体的农杆菌AGL-1,采用单因子和双因子方法研究根癌农杆菌AGL-1介导柱花草炭疽菌CH008转化过程中各主要因素对转化率的影响,优化构建ATMT转化柱花草胶孢炭疽菌体系条件,使转化效率达到300 ～400个转化子/106个炭疽孢子,即根癌农杆菌AGL-1浓度OD600=0.8,炭疽菌分生孢子浓度为1x106个/mL,AS浓度为100 μmol/L,诱导时间为6h,共培养温度和时间分别为25 ℃和4d.经PCR检测都有GFP片段,并能够表达绿色荧光蛋白.这为进一步开展炭疽菌对柱花草的致病机理研究提供了依据,优化转化体系有利于后续突变体库的扩大、筛选突变体和致病功能基因的研究.     

耐盐碱基因eIF1A对玉米遗传转化研究

以来自柽柳的耐盐碱基因eIF1A为研究对象,构建其单子叶植物表达载体,并利用农杆菌介导法转化极早熟玉米自交系加2和M1的胚性愈伤组织,创制转eIF1A基因玉米新材料,为耐盐碱转基因玉米育种提供技术和材料支持。结果表明,成功构建eIF1A基因的单子叶植物表达载体pCAMBIA3300-Ubi-eIF1A,共获得33株除草剂抗性植株,其中,12株目的基因和筛选标记基因PCR呈阳性反应,RT-PCR检测表明,目的基因正常转录表达。     

基因枪转化的bar基因表达盒在水稻中的重组结构

应用Southern杂交和引物组合PCR技术研究了基因枪转化的bar基因表达盒（包括启动子、编码区和终止子）在水稻（Oryza sativa L.）中的重组结构。bar基因表达盒的多个拷贝通过重组连接形成1～3个转基因串联子,彼此邻近整合在受体基因组内一个较大的染色体区域,不同转基因串联子之间由水稻基因组DNA间隔,形成转基因簇。bar基因表达盒形成转基因串联子时,存在头接头、头接尾、尾接尾3种连接方式,通常伴随着bar基因片段的截短。     

Effect of Phytosulfokine-α on Agrobacterium-Mediated Transformation in Rice

Phytosulfokine(PSK)is a new peptide plant hormone,which was isolated in the conditioned medium of cultures derived from both monoco-tyledonous and dicotyledonous plants,such as Asparagus officinalis mesophyll[1],rice[2],zinnia[3],and carrot[4].PSK has two types of structure:PSK-αand PSK-β.The former is a sulfated pentapeptide[H-Tyr(SO3H)-Ile-Tyr(SO3H)-Thr-Gln-OH],the latter is a sulfated terapeptide[H-Tyr(SO3H)-Ile-Tyr(SO3H)-Thr-OH].Both are heat-stable,susceptible to pronase…