猪粪中洛克沙胂的HPLC检测及排泄规律

在建立猪粪中洛克沙胂HPLC检测方法基础上,选用24头育肥猪,分别混饲给予0、25、50、100 mg/kg洛克沙胂,混饲给药后不同时间采集粪样,以高效液相色谱法测定其中洛克沙胂质量浓度,了解洛克沙胂混饲给药后在猪体内的排泄情况,然后从江苏和山东省15个使用洛克沙胂的集约化猪场采集150头猪的粪样,调查猪粪样中的洛克沙胂含量。结果表明,所建立的猪粪中洛克沙胂HPLC检测方法的平均回收率为82.09%~84.03%,变异系数为2.92%~5.45%,检测限为0.05 mg/kg,定量限为0.1 mg/kg;以不同剂量混饲给药后,洛克沙胂在粪中排泄量在36~48 h达峰,峰质量浓度分别为12.31、22.52、34.78 mg/kg,猪粪中检测不到洛克沙胂的时间分别为72、108、132 h;所调查150个粪样中洛克沙胂平均质量浓度为23.13 mg/kg。     

洛克沙胂在土壤柱中的淋溶迁移

畜禽粪便中残留的兽药进入土壤后的移动性是评价其淋溶能力（对地下水的污染风险）的重要信息。通过土壤柱稳定流实验,考察了不同淋溶剂、粪浸液等对洛克沙胂在不同深度（0～20、20～50、50～80 cm）灰潮土中的迁移行为影响。结果表明,水、0.01mol.L^-1 CaCl2、0.01 mol.L^-1 EDTA-Na2淋溶剂,对不同深度土壤柱中洛克沙胂的淋溶穿透曲线（BTCs）呈现不同程度的不对称性,在不同深度土壤柱中对洛克沙胂的淋出率分别为：水为92.3%～97.1%,0.01 mol.L^-1 CaCl2为71.0%～84.9%,0.01 mol.L^-1 EDTA-Na2为75.4%～91.2%;土壤柱先用粪浸液通过后,洛克沙胂的穿透曲线峰时间均有不同程度的提前,淋出率均有增加,在不同深度土壤柱中的淋出率分别为：水为96.4%～110.4%,0.01 mol.L^-1 CaCl2为94.5%～106.8%,0.01 mol.L^-1 EDTA-Na2为90.8%～103.2%。说明洛克沙胂随粪便进入土壤后可较快地淋溶迁移,可进入地表水和地下水中,对水环境质量的影响较大。     

洛克沙胂对鲫鱼暴露胁迫的毒性效应

进行了洛克沙胂对鲫鱼的急性毒性试验,通过急性暴露胁迫对抗氧化系统的影响进行了探讨.试验发现,洛克沙胂对鲫鱼的急性毒性较低,24h LC50为181.69 mg/L,48 b LC50和96 h LC50均为176.57 mg/L.30、45 mg/L(以 As计)洛克沙胂连续暴露5 d,鲫鱼脑和肝乳酸脱氢酶受到显著抑制(P<0.05)并呈剂量-效应关系.鱼脑和肝的丙二醛含量显著升高(P<0.05).鲫鱼脑、肝和鳃组织的超氧化物歧化酶活性在初期显著升高(P<0.05),但在试验后期随剂量增高而受到显著抑制(P<0.05).鱼脑谷胱甘肽-S-转移酶受到极显著的抑制(P<0.01).结果表明:洛克沙胂对鲫鱼巯基酶和抗氧化功能有明显抑制,鱼脑和肝脏氧化损伤最明显,呈现剂量-效应关系.     

Use of Bacitracin and Roxarsone to Reduce Salmonella Heidelberg Shedding Following a Necrotic Enteritis Challenge Model

This study was performed to determine if the enteric disease necrotic enteritis results in higher shedding of Salmonella. Fifty percent of the chicks per pen were challenged with a naladixic acid-resistant Salmonella Heidelberg. A necrotic enteritis challenge model using a coccidia vaccine to induce intestinal epithelium damage was used to demonstrate that neither the disease necrotic enteritis nor the control of that disease with the antibiotic bacitracin methylene disalycilate had an effect on the incidence of Salmonella Heidelberg. However, the feed additive 3-nitro-4-hydroxyphenylarsonic acid, which controls the cecal coccidia Eimeria tenella, significantly reduced the amount of Salmonella Heidelberg in the environment of the chick as measured by dragswabs and also reduced the number of ceca positive in the contact chicks.     

洛克沙胂代谢物在土壤中的累积及其植物有效性研究

为考察有机胂饲料添加剂降解转化后其含砷代谢物在土壤和蔬菜中累积及其植物有效性,利用鸡只喂饲含洛克沙胂饲料后排泄的粪便作为有机肥应用于茼蒿的种植,收获后测定土壤及茼蒿植株不同部位砷形态化合物的组分及含量。结果表明,洛克沙胂的降解产物主要为亚砷酸盐[As(Ⅲ)]、砷酸盐[As(Ⅴ)]、二甲基砷(DMA)、一甲基砷(MMA)、4-羟基苯胂酸(4-HPA)及少量其他未知形态含砷代谢物。经检测,茼蒿地上部的砷化合物仅为As(Ⅲ),地下部为As(Ⅲ)及As(Ⅴ)。施用对照鸡粪及含洛克沙胂代谢物鸡粪的茼蒿可食用的地上部As(Ⅲ)及总砷含量均低于我国规定的限量标准,与对照鸡粪相比,施用含洛克沙胂代谢物鸡粪显著提高茼蒿地上部As(Ⅲ)、地下部As(Ⅲ)及地下部As(Ⅴ)含量,提升率分别为13.8%±0.4%～37.4%±6.5%、112.9%±4.5%～123.2%±6.5%及44.4%±2.6%～78.0%±5.1%。添加洛克沙胂代谢物鸡粪显著提高土壤中可提取的As(Ⅲ)及As(Ⅴ)含量,提升率分别为49.1%±4.4%及33.4%±2.3%。3个不同生长阶段茼蒿采收后,添加洛克沙胂代谢物鸡粪土壤中可提取的As(Ⅲ)及As(Ⅴ)仍然比对照处理提高4.9%±1.0%～20.0%±1.2%及11.7%±2.4%～18.0%±4.7%。添加含洛克沙胂代谢物鸡粪的土壤中As(Ⅲ)及As(Ⅴ)的茼蒿吸收率分别比对照鸡粪处理提升25.8%及14.3%。综上所述,砷可通过有机胂→饲料→畜禽→畜禽粪便→土壤途径传递并被蔬菜吸收累积,当季施用含有机胂代谢物鸡粪对蔬菜是安全的,但会增加土壤中含砷代谢物的含量,因此不可忽视连续施用时的累积风险。     

慧星试验检测洛克沙胂对CHL细胞的DNA损伤

利用碱性单细胞凝胶电泳技术研究洛克沙胂对中国仓鼠肺细胞(CHL)的DNA损伤影响。洛克沙胂分为10、100、500、1000mg/L剂量组,分别以磷酸盐缓冲液和10mg/L亚砷酸钠为对照组,经3、6、12、24、48h暴露后进行单细胞凝胶电泳。结果表明,慧星试验参数尾DNA含量、慧星全长、慧尾长、尾距和Olive尾距等表现出剂量-效应、时间-效应关系,不同剂量洛克沙胂、不同暴露时间下对CHL细胞有不同程度的DNA损伤。     

持续污染下洛克沙胂在土柱中的迁移转化及其风险评估

由于禽畜粪便未做防渗的露天堆积，导致饲料添加剂洛克沙胂（ROX）进入环境从而诱发无机砷污染。本研究通过157 d的一维土柱模拟探究了ROX长期持续污染的前提下，垂向包气带上砷化合物形态和含量的时空变化，并通过高通量测序技术揭示了不同深度的微生物群落结构响应。结果显示，在157 d的ROX持续污染模拟过程中，ROX降解速率很高，显著高于迁移速率，ROX的降解与吸附均发生在土壤浅层（0~10 cm）。ROX降解产物主要为As（Ⅴ）和As（Ⅲ），其中As（Ⅴ）含量明显高于As（Ⅲ）含量，砷化合物均主要聚集在0~40 cm深度，土壤中砷化合物含量显著高于土壤溶液中的含量，土壤对砷化合物的固定能力很强，砷化合物的迁移速度十分缓慢，157 d最大迁移深度为40 cm。由此可见，土壤一旦被砷污染，其长期危害难以消除。表层土壤中微生物群落结构与其他深度显著不同，结合RDA与PERMANOVA分析证明深度和ROX含量是控制不同深度土壤中微生物群落多样性的主要影响因素。通过健康风险评估得知，表层土壤中ROX持续污染会诱发较大的砷致癌风险。因此，建议全面执行我国禁止使用ROX的规定，在仍然允许使用ROX的国家和地区，要加强对禽畜废弃物的规范处理，避免长期在未防渗的地面上露天堆积。