Morphological characterisation and agronomic evaluation of transgenic broccoli (Brassica oleracea L. var. italica) containing an antisense ACC oxidase gene

Morphological characterisation and agronomic evaluation was conducted on 12 transgenic broccolilines containing a tomato antisense1-aminocyclopropane-1-carboxylic acid (ACC) oxidase gene. Plants of three cultivars: Shogun (Sh), Green Beauty (Gy) and Dominator (D), were regenerated from hairy root cultures after co-cultivation with Agrobacterium rhizogenes strain A4T harbouring the binary vector pLN35. The T-DNA of pLN35 contains genes encoding a tomato antisense ACC oxidase gene (35S-ACC-5′7′) and a neomycin phosphotransferase II gene (NOS-NPTII-NOS) for kanamycin resistance. The transgenic plants were transferred to a greenhouse and fertile plants obtained. Integration of the foreign DNA into the broccoli genome was confirmed by the polymerase chain reaction and Southern analyses. Transgenic plants showed evidence of hairy root (HR)-induced morphological changes to varying degrees. Of the 12 characterised transgenic lines, three lines(Gy/7, D/1 and D/2) performed within the limits of acceptability for all head quality parameters analysed (size, density, colour, shape and leafiness). The ethylene production from stalks of four field-grown transgenic lines of Green Beauty broccoli showed significant reductions in activity relative to the control 98 h after harvest. The Dominator transgenic lines D/1 and D/2 showed significant improvements in head colour relative to the control from 48 h after harvest. These results are consistent with the ethylene production patterns determined previously for these lines. The head colour results are consistent with previous results suggesting that two enzyme systems may be involved in broccoli senescence, giving two bursts of ethylene production, with only the second burst inhibited by the antisense ACC oxidase gene used. This revised version was published online in August 2006 with corrections to the Cover Date.     

普洱生茶和熟茶茶多酚的提取及抗氧化活性研究

[目的]为普洱生茶和熟茶中茶多酚的开发利用提供理论依据。[方法]采用有机溶剂萃取法、离子沉淀法和吸附分离法分别从普洱生茶和熟茶中提取茶多酚,测定提取物对2,2-二苯代苦味酰基自由基(DPPH.)的清除作用。[结果]普洱生茶的茶多酚提取率都高于熟茶,普洱生茶茶多酚对DPPH.的清除率高于熟茶。[结论]普洱生茶的抗氧化活性高于熟茶。     

黄大茶茶汤成分分析及抗氧化活性研究

实验检测黄大茶茶汤、茶多糖类组分、茶多酚类组分儿茶素的含量,并通过自由基清除实验,以及对高脂日粮诱导肥胖小鼠肝脏和肠道氧化还原状态的调节,研究黄大茶各组分的抗氧化活性。结果表明,茶汤和茶多酚类组分儿茶素含量均高于茶多糖类组分。相同浓度下,茶多酚类组分清除DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基能力最强,茶多糖类组分最弱。动物实验研究表明,茶汤、茶多糖类组分和茶多酚类组分均可显著（P<0.05）提高高脂诱导肥胖小鼠回肠总抗氧化能力（T-AOC）;茶汤和茶多酚类组分显著（P<0.05）降低回肠丙二醛（MDA）含量。茶多糖类组分显著（P<0.05）降低高脂日粮小鼠肝脏 MDA的含量。3种物质均可提高高脂日粮小鼠回肠和肝脏 GSH-Px活力,但差异不显著。结论表明,黄大茶茶汤、茶多糖类组分和茶多酚类组分均具有抗氧化活性。     

四川野生百合不同部位多酚与抗氧化活性的相关性

以四川省9个采集地的野生百合为材料,测定百合鳞茎、茎秆、叶片和花的多酚、总黄酮、总黄烷醇、花色苷含量,采用清除DPPH自由基能力、铜离子还原能力、金属离子螯合能力、抑制脂质过氧化物活性评价野生百合的抗氧化活性.结果表明:野生百合鳞茎、茎秆、花和叶片中多酚平均含量分别为3.64、5.96、11.40、13.47 mg/g...     

烟草野火病菌(Pseudomonas syringae pv. tabaci)对烟草细胞内5种防御酶系统的影响

定期测定了感病品种红花大金元接种烟草野火病菌后叶片内5种酶活性的动态变化，研究结果表明：烟草接种病菌后，SOD活性先上升，后在8d下降，低于对照；POD活性接种后在1d略低于对照，后上升较快，10d达到高峰，此后一直高于对照；PPO活性在接种后1d低于对照15.8%，但此后上升，16d达到高峰，18d下降低于对照；CAT活性变化与POD相似，接种1d低于对照，但此后一直高于对照，并于6d达到高峰，10d虽有所下降，但接着升高；PAL活性与CAT、POD变化相似，接种后1d活性低于对照28.3%，其后上升，10d达到高峰，是对照的2.11倍，并维持较高的水平。     

松油烯-4-醇对粘虫几种代谢酶及酚氧化酶的影响

【目的】探讨杀虫植物砂地柏Sabina vulgaris精油中主要杀虫成分松油烯-4-醇的作用机理。【方法】以点滴法处理粘虫5龄幼虫后,测定兴奋期、痉挛期、麻痹期及复苏期等4个中毒阶段试虫体内4种代谢酶及酚氧化酶（PPO）的活性。【结果】松油烯-4-醇仅在麻痹期对酸性磷酸酯酶（ACP）具有一定的抑制作用,而在其它时期均可明显激活ACP及碱性磷酸酯酶（AKP）;对谷胱甘肽S转移酶（GSTs）则表现出先抑制后恢复的趋势;可显著抑制细胞色素P450 O-脱甲基活性,各中毒阶段酶抑制率分别为26.27%、46.03%、80.24%和90.22%;离体和活体条件下,均可显著抑制PPO活性。【结论】松油烯-4-醇对粘虫代谢酶系细胞色素P450、GSTs及PPO的抑制与其毒杀活性有关,而中毒试虫的复苏可能与GSTs活性的恢复有关。该化合物可开发为新型农药或增效剂,在害虫抗性治理中具有潜在的应用价值。     

钼对小鼠后代醛氧化酶和黄嘌呤氧化酶转录水平的影响

试验选用60只二月龄的清洁级ICR小鼠,随机分成4组,每组10只雌性和5只雄性小白鼠,雌雄分开饲养,饮水中加入不同剂量的钼,分别是空白对照组、低钼组(100 mg.L-1)、中钼组(200 mg.L-1)、高钼组(400mg.L-1),4周后雌雄合笼饲养。产仔后从每组仔鼠中随机雌性小白鼠30只和15只雄性小白鼠按原分组给予不同剂量的钼,8周后,再从每组中随机选取雌性小白鼠10只和5只雄性小白鼠合笼饲养,待其产仔。如此往复,使小鼠繁殖四代。以第三代(F2代)作为研究对象,应用实时荧光定量PCR的方法测定肝脏AOX和XO的转录水平。结果表明,与对照组相比F2代小鼠AOX和XO的转录水平随钼添加剂量的增加呈递增趋势,实验组与对照组差异显著(P<0.05)。可见长期钼暴露可提高小鼠后代AOX和XO的转录水平。     

铁观音茶叶中茶多酚提取工艺条件的优化

为了探究提取铁观音茶叶中茶多酚的最佳工艺条件,选取了液固比、浸提温度和浸提时间3个指标为因素,采用L9(33)正交试验设计对提取工艺进行了优化。结果表明,各因素对铁观音茶多酚提取的贡献由大到小排列依次为A(液固比)C(浸提时间)B(浸提温度),但这3个因素对茶多酚含量影响的差异不显著;最佳提取工艺条件为:液固比120︰1、浸提温度100℃、浸提时间30 min,在该条件下茶多酚的含量最高,达15.5%。     

亚砷酸氧化菌Sinorhizobium sp.GW3的鉴定与亚砷酸氧化酶基因的分离

亚砷酸氧化细菌能够将毒性大的As(Ⅲ)氧化成毒性小的As(Ⅴ),在生物修复砷污染方面具有应用价值。对一株新型亚砷酸氧化菌Sinorhizobium sp.GW3进行了较全面的鉴定,并分离及分析了亚砷酸氧化酶基因aoxAB。形态学、生理生化鉴定和16S rRNA基因等分析结果表明该菌为Sinorhizobium属。该菌对As(III)抗性的MIC(Minimum inhibitory concentration)为9 mmol/L。首次在Sinorhizobium属中分离了包括编码小亚基aoxA和大亚基aoxB在内的亚砷酸氧化酶基因,其编码的大小亚基与已发现的Agrobacterium tumefaciens(ABB51929)的大小亚基在氨基酸水平上分别有86%、80%的同源性。     

茄根中总多酚含量的测定

采用改进的Folin-Ciocalteu比色法测定茄根中总多酚的含量。结果表明,对照品标准曲线在0.0096～0.0768mg线性关系良好。茄根的75%乙醇提取物中总多酚的平均含量为0.272%,RSD为0.98%;平均加标回收率为97.47%,RSD为3.64%。