罗非鱼鱼皮提取明胶的酶法脱脂工艺研究

用脂肪酶对罗非鱼鱼皮进行酶法脱脂工艺研究。通过单因素与正交试验确定最适的酶法脱脂工艺为:pH值9,脱脂时间3h,酶添加量2%,料液比1:4,温度40℃,该工艺的脱脂率可达67.5%。通过超声波辅助脱脂研究表明其脱脂率并无明显的提高。     

大黄鱼发育进程中消化酶的活力变化

不同发育阶段大黄鱼(Pseudosciaena crocea)样品体重30～500g,取自厦门海区网箱养殖区。以酶学分析方法测定大黄鱼发育进程中胃蛋白酶、类胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶4种消化酶的活力。结果表明,在大黄鱼发育进程中,对蛋白的整体消化能力始终较强;4种消化酶活力表现出2种变化模式,其中胃蛋白酶和类胰蛋白酶活力逐渐降低,而淀粉酶和脂肪酶活力呈上升趋势。胃蛋白酶、类胰蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶的比活力随鱼体重的变化分别遵循回归方程Y=34．89／X 0．050;Y=53．36／X 0．29;Y=-22．38／X 1．13和Y=-1．35／X 0．13。初步认为,在大黄鱼发育过程中,150g体重为其生长发育的转折点,这一阶段各种消化酶的变化可反映其食性的变化情况,本研究旨为大黄鱼配合饲料的研制与开发提供基础依据。     

日粮能量水平对扬州鹅脂肪代谢及HL基因表达的影响

选用35日龄、体重相近的扬州鹅200只,随机分成4组,每组5个重复,每个重复10只(公、母各半),分别饲喂4个代谢能水平的日粮(A组10.11、B组11.19、C组12.37和D组13.45 MJ/kg),研究其对扬州鹅脂肪代谢及肝脂酶(HL)基因表达的影响。结果表明:与A组相比,D组扬州鹅的屠宰率显著提高(P<0.05),腹脂率极显著提高(P<0.01);随着能量水平的提高,血清极低密度脂蛋白和甘油三酯显著降低,低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、脂蛋白脂酶、肝脂酶活性及其表达量均显著增加(P<0.05)。本研究结果表明,日粮能量水平显著影响扬州鹅机体脂肪代谢和HL基因mRNA的表达。     

Impact of mash and crumble diets on intestinal amino acids transporters,intestinal morphology and pancreatic enzyme activity of broilers

The objective of this study was to evaluate effects of mash and crumble pre‐starter diets on pancreatic enzyme activity, intestinal morphology, gene expression of intestinal peptide and amino acid (AA) transporters of broilers. Broilers in battery cages were assigned to different feed forms of pre‐starter diet from 1 to 10 days of age. Significantly increased body weight gain (BWG), feed intake (FI) and lowered FCR were observed in birds fed crumble pre‐starter diet (CPD, p < 0.05). Feed forms had no effect on whole and small intestine length, but relative intestinal length and relative small intestinal length significantly increased in the broilers fed a mash pre‐starter diet (MPD, p < 0.05). Feeding CPD increased the weight of pancreas (p < 0.05), but relative weight of the pancreas was not influenced by treatments. Pancreatic protease and amylase activities significantly increased in the broilers fed CPD (p < 0.05) but the activity of lipase was not influenced. Crypt depth (CD) and villus height (VH) were higher in broilers fed CPD (p < 0.05) but villus width (VW), villus surface area (VSA) and villus height‐to‐crypt depth ratio (VCR) were not influenced by treatments. mRNA levels for peptide transporter 1 (PepT1), Na⁺‐independent cationic AA transporter1 (CAT1), Na⁺‐independent cationic and Na⁺‐dependent neutral AA transporter 1 (y⁺LAT1) and Na⁺‐dependent neutral AA transporter (B⁰AT) were lower in birds fed CPD (p < 0.05). There were no differences in mRNA abundance of Na⁺‐independent cationic and zwitterionic AA transporter (b^0,+AT) among treatments. Overall, the present data showed that feeding crumble diet during first 10 days of age, through higher FI, enhanced intestinal histomorphology, increased digestive enzyme activity is beneficial to growth performance of broilers. Indeed, dietary form can be an important factor in the expression of jejunal transporters.     

红松不同种源酯酶同工酶遗传变异的初步研究

通过对红松不同源酯酶同工酶遗传变异的初步研究，可找出种源遗传变化的规律，为合理的种子区区划，种源区划提供依据。     

来源于解酯菌的嗜热耐碱脂肪酶的表达纯化及其酶学性质研究

脂肪酶广泛应用于食品加工、生物柴油制备等领域。为了有效提高微生物脂肪酶的可利用度,将来源于解酯嗜热菌(Thermosyntropha lipolytica DSM 11003)的脂肪酶基因(tll2)克隆到大肠杆菌表达载体pET28a中,获得重组质粒pET28a TLL2,将pET28a TLL2转入大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌中进行高效表达。通过热处理和镍柱亲和层析得到电泳纯的蛋白TlLip2,对其进行酶学性质表征。结果显示,TlLip2的亚基分子质量为57 ku,比酶活为31 U/mg,最适反应pH及温度分别为8.0和60℃。在60℃以下、pH 6.0~11.0范围内,TlLip2的稳定性较好,相对酶活均维持在60%以上。金属离子K+和Na+对TlLip2有较大激活作用,而Co^2+、Zn^2+、SDS和Tween 80对TlLip2酶活力抑制作用明显。TlLip2在极性小的有机溶剂中具有较好的耐受性。TlLip2对中等碳链长度的对硝基苯酯显示出更高的活性,其中以对硝基苯己酯为底物时,TlLip2的酶活最高;以对硝基苯棕榈酸酯为底物时,该酶的动力学常数Km为0.29 mmol/L,Vmax为2.28 mmol/(L·min^-1),kcat为6.19 s^-1。此外,将其应用到油酸乙酯的合成研究中,以油酸和乙醇为底物,研究TlLip2催化制备油酸乙酯的转化条件,结果表明在60℃、加酶量为100 U/g的TlLip2,催化摩尔比为1∶2的油酸和乙醇,12 h后油酸乙酯的转化率达到62.1%,表明TlLip2在催化脂肪酸酯化方面具有较大的应用潜能。     

微生物脂肪酶概况及其动物营养效应的研究进展

微生物脂肪酶是工业用脂肪酶的重要来源,是生物技术和有机化学应用中广泛使用的酶类之一。文章从微生物脂肪酶来源、酶学特性、在动物消化道中的营养效应和作用机理方面进行综述,主要介绍国内外关于脂肪酶应用在动物饲料方面所取得的一些研究成果,为微生物脂肪酶在饲料中的开发与应用提供参考。     

碱性脂肪酶高产菌株的筛选及产酶条件的优化

利用筛选和验证相结合的方法筛选出了产碱性脂肪酶活性较高的菌株BL1011。经过形态观察、生理生化试验及分子生物学鉴定,结果表明该菌株为假单胞菌(Pseudomonas sp.)。运用单因素试验和均匀试验优化了BL1011菌株摇瓶产酶培养基和最佳发酵条件。在培养基为麦芽糖2.5%,蛋白胨3.0%,大豆油0.5%,K2HPO4 0.2%,培养条件为起始pH值7.5,温度33℃,转速180 r/min,装液量20 mL,发酵周期为60 h的条件下,酶活力达到最高,为223 U/mL。     

一株产香真菌的筛选鉴定及脂肪酶基因序列克隆分析

从香料植物天竺葵上分离筛选到一株产香真菌,对该菌株进行鉴定,确定其分类地位,并克隆其产脂肪酶基因进行序列分析。结果表明,分离筛选得到的菌株TZK-1形态为菌落圆形,质地疏松,菌丝由白色变为灰褐色,菌丝无隔膜,有假根,孢囊梗基部膨大形成球形孢子囊,孢囊孢子椭圆形;该菌株18S r DNA序列与米根霉Rhizopus oryzae(KF717370)相应片段的核苷酸序列同源性为99.6%。利用PCR扩增得到脂肪酶基因,该基因编码区全长为1 108 bp,编码369个氨基酸,脂肪酶核苷酸序列与推导的氨基酸序列与Rhizopus oryzae(AF229435)和Rhizopus oryzae(JN689988)聚为一支,支持强度分别达到92%和95%。结合形态学初步确定,产生浓郁甜酒香味的菌株为米根霉,能产生脂肪酶,克隆其脂肪酶基因全长。