苦荞杂交F2 代的植物学性状表型研究

以栽培苦荞和苦荞近缘野生种为亲本进行杂交,获得杂交后代并在F2代观察其性状分离比例.结果表明:栽培苦荞与苦荞近缘野生种杂交的F2代在花色、花序(小花疏密度)、茎色、分枝、叶形、叶色、瘦果表面有无刺、株型和落粒性等方面表现出性状分离现象,其中瘦果表面有无刺和种子落粒性性状的分离比例为9∶7,株型松散性状和分枝长短性状的分离比例为3∶1,通过X2测验,分别符合9∶7和3∶1的比例.其他各性状的分离比例尚不能确定.     

萝卜与苤蓝属间杂种胚离体培养…

以萝卜雄性不育系DH303A为母本,以苤蓝为父本进行属间远缘杂交,萝卜与苤蓝杂交的不亲和性发生在胚珠发育过程中,杂交荚荚长快速生长期在授粉后的第2~5天,而横径快速生长期在授粉后第2~4天。在杂种胚发育后第6天和第7天进行胚抢救,用诱导培养基:MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%;继代培养基:MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%;分化培养基:MS+IAA 0.5 mg/L+KT 1.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%;生根培养基:MS+NAA 0.2 mg/L+IAA 0.5 mg/L+蔗糖3%+琼脂0.6%,能成功获得幼苗。     

蝴蝶兰新品种‘天宝红’

 蝴蝶兰新品种‘天宝红’是以‘超群火鸟’为母本,以‘宝岛玫瑰’为父本,杂交选育而成。其株形匀称,叶长卵圆形,倒二叶平均叶长为（22.64 ± 0.94）cm,叶宽为（7.65 ± 0.21）cm;平均花横径为（10.8 ± 0.46）cm,花色鲜红,唇瓣深玫瑰红,花粉苞片雪白,花瓣质地厚,花正面朝向,花序排列整齐,花穗能自然弯曲,无需人工造形,具有较高的观赏价值,花期长,耐低温。     

Production of hybrid seed in a seed orchard of two larch species,Larix sibirica and Larix decidua

The larch seed orchard studied is intended to produce interspecific hybrid seed between Larix sibirica and Larix decidua. Only the L. sibirica clone (half of the grafts) in the orchard was intended to act as the seed parent, and the six L. decidua clones are pollinators. The proportion of hybrid seed produced was determined using Mdh3 locus as a genetic marker. The mean percentage of hybrid seed produced by the grafts of L. decidua was 93, but that of the hybrid seed produced by L. sibirica was only 18. The results can be explained by differences in flowering abundance. The grafts of L. sibirica produced several times more pollen than those of L. decidua. Contrary to the original plans, L. decidua should be used as the seed parent and L. sibirica only as the pollen parent in the studied seed orchard.     

猪肺炎支原体显色原位杂交研究方法的建立

为建立猪肺炎支原体(Mhp)显色原位杂交(CISH)定位检测方法,本研究利用地高辛标记的Mhp P36核酸探针和DAB/H2O2显色系统,对人工Mhp感染组、自然感染组和健康对照组的实验猪肺组织样品和临床样品进行显色原位杂交检测.结果显示,设计的地高辛标记探针针对Mhp具有特异性,而与其他的猪病原菌无交叉反应;检测结果可以通过显微镜观测到Mhp定位在支气管/细支气管黏膜表面.人工感染组、自然感染组和健康对照组的CISH结果与PCR检测结果一致,临床样品的CISH检测结果低于PCR检测结果.本研究建立的Mhp显色原位杂交法是一种集直观和敏感为一体的检测方法,可以用于Mhp的定位检测和致病机理研究.     

嫁接在杨树远缘杂交育种上的应用研究

为了在吉林省西部地区选育出耐盐碱性强,又能无性扦插育苗进行快速繁殖的杨树新品种,选用了白杨派的银新杨作母本与青杨派的小叶杨为父本进行远缘杂交育种,但两派之间杂交不亲和。为解决这一问题,进行了先嫁接再杂交的育种方法。试验表明,此方法在一定程度上提高了远缘杂交的结实率,而且杂种苗具有明显的父母本双亲的性状,为杨树新品种培育开辟了新的途径。     

香蕉果皮2个HSP70基因片段的克隆及其在热激和冷藏过程中的表达

温度逆境胁迫可以诱导热激蛋白的表达,而热激处理能够减轻果实冷害。为了探讨温度逆境对香蕉热激蛋白基因表达的调控、辨析香蕉热激蛋白基因的表达与果实冷害的关系,采用同源序列法分离了香蕉果皮HSP70基因序列-根据已经报道的HSP70基因的氨基酸保守序列设计引物、以香蕉果皮总RNA为模板,用RT-PCR方法克隆香蕉的HSP70 cDNA,Northern杂交分析该基因在不同贮藏温度下的表达特征。结果得到2个序列不同的HSP70基因片段,分别命名为Ma-HSP70-1和Ma-HSP70-2,Ma-HSP70-1和Ma-HSP70-2之间的碱基同源性为86.9%,氨基酸同源性为97.1%。Northern杂交的结果表明,38℃短期热激处理诱导了Ma-HSP70-2基因的表达,低温冷藏能使2个基因的表达增强。并初步认为Ma-HSP70可能与香蕉果实耐冷性有关。     

普通西瓜3个变种45S rDNA和5S rDNA的染色体定位

【目的】为了探明普通西瓜种(Citrullus lanatus)3个变种间的亲缘关系和进化与驯化过程,【方法】利用双色荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridization,FISH),将核糖体45S rDNA和5S rDNA在11份栽培变种(Citrulluslanatus subsp.vulgaris)、2份Egusi变种(C.lanatus subsp.mucosospermus)和3份Citroides变种(C.lanatus subsp.lana-tus)有丝分裂中期染色体上进行了定位研究。11份栽培变种西瓜和2份Egusi类型西瓜都含有2对45S rDNA位点和1对5S rDNA位点,3份Citroides变种都含有1对45S rDNA位点和2对5S rDNA位点。【结果】结果表明,普通西瓜种3个变种内部各基因型间具有相同的45S rDNA和5S rDNA分布模式,栽培变种和Egusi变种具有相同的分布模式,但它们均与Citroides变种存在明显差异,说明栽培变种与Egusi变种之间的亲缘关系更近一些。【结论】rDNA序列分布分析为在分子细胞学水平开展栽培西瓜的进化与驯化分析提供了证据。     

应用抑制消减杂交技术克隆鼻咽癌转移调控基因

目的：分离并鉴定高低转移表型不同的人鼻咽癌细胞株差异表达cDNA序列,了解鼻咽癌转移抑制基因或具有抑制活性的核苷酸序列。方法：以具有高低转移潜能不同的人鼻咽癌细胞株为研究对象,应用抑制消减杂交技术（suppression subtractive hybridization,SSH）和T／A克隆法构建差异表达cDNA消减文库,对差异表达的cDNA进行测序和生物信息学分析。结果：成功构建人鼻咽癌细胞克隆株差异表达cDNA消减文库,从随机测序10个克隆中获得6个在低转移鼻咽癌细胞株中高表达cDNA序列,它们都与已知的人类基因片段具有高度同源性。结论：应用抑制消减杂交技术,从一对具有高低转移表型差异的鼻咽癌细胞株中获得6条可能与肿瘤转移抑制相关的cDNA序列,它们可能在维持肿瘤细胞的稳定和抑制肿瘤转移中起重要作用。     

香蕉果实采后抑制差减文库的构建与鉴定

抑制差减杂交技术(suppression subtracfive hybridization,SSH),是抑制PCR与差减杂交技术相结合而产生的。其优点是在差减杂交过程中使不同丰度cDNA的拷贝数差异趋于均衡,因此不同丰度的差异表达基因都能得到有效克隆,能有效分离低丰度的差异表达基因,避免了表达序列标签分析中高丰度基因重复测序的缺点。因此SSH技术被应用于植物差异表达基因的分离。香蕉果实采后成熟过程中发生一系列复杂的生理变化,这些变化涉及到许多基因的表达。为了研究香蕉果实采后与采前在基因表达上的差异,我们首次采用抑制缩减文库的方法,以分离香蕉果实在采后表达的基因。以采后0h的香蕉果实cDNA为驱动子,对香蕉果实采后48h果实cDNA为待测子,进行抑制缩减杂交,抑制缩减杂交产物与pGEM—TEasy Vecter连接,转化E．coli DH5α,构建了抑制缩减文库。该文库共包含312个克隆,采用PCR方法对文库进行了重组子的鉴定,共有302个重组子。该文库的构建成功为深入研究香蕉果实采后基因的表达奠定了基础,为研究香蕉果实采后成熟的分子生物学机理提供了一个新的思路。