基于多重串联式PCR的基因碟片技术检测转基因作物

【目的】建立基于多重串联式PCR（multiplexed tandem PCR,MT-PCR）的基因碟片技术,并使之应用于转基因作物的大量、快速和稳定地检测。【方法】以转基因作物研究中常用的调控序列NOS终止子、FMV35S启动子及外源基因NPTⅡ、Cry1Ab、Cry1Ab/Ac、CP4-EPSPS、PAT和玉米内源基因IVR、棉花内源基因sad1、菜籽粕内源基因PEP为检测对象,针对每个基因设计内外2对引物,先进行一次循环数较少（10-20 cycles）的高通量多重PCR,以便在均匀地扩增各基因和调控序列的同时避免引物之间的竞争,然后利用巢式荧光定量PCR检测各个基因和调控序列,最后根据扩增曲线和熔融曲线分析结果。【结果】该方法能够快速（＜2 h）、高通量、准确地（＞0.000292 ng）检测出棉花、玉米、大米、菜籽粕中的多种转基因成分,可以分辨出3种转基因物种,适合大批量检测。【结论】该方法适合转基因作物的高通量、定量检测,具有较好的应用前景。     

转基因大豆MON89788检测质粒标准分子构建与应用

[目的]构建适用于转基因大豆MON89788检测的质粒标准分子.[方法]利用定性PCR和连接、转化等分子克隆技术,将大豆内标准基因lectin、MON89788的3'端特异性序列和5'端特异性序列依次克隆到pMD18-T载体上,获得质粒标准分子pMD-LM3M5,并进行适用性验证.[结果]获得了3 700 bp的质粒标准分子,其中重组DNA片段1 029 bp.该质粒标准分子的定性PCR检测灵敏度达到10 copy.[结论]该研究构建的质粒标准分子pMD-LM3M5能替代NON89788基体标准品,用于MON89788大豆及其产品的定性PCR检测. Abstract： [Objective] The aim was to construct a plasmid reference molecule (PRM) for detection of transgenic soybean MON89788.[Method]the lectin gene sequence,3'-junction and 5'-junction sequence between host plant DNA integrated DNA of MON89788 soybean were amplified independently,and the three fragments were cloned into the cloning vector pMD18-T in order through molecular manipulation method to construct pMD-LM3M5,the applicability of the constructed novel PRM was tested. [Result] Sequencing confirmation result showed that the PRM was 3 700 bp in length,containing 1 029 bp of recombined DNA fragment.The limits of qualitative detection of the PRM were 10 copies,[Conclusion]The PRM constructed in this study was suitable for the identification of MON89788 event.     

加味丹参饮预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨加味丹参饮（JDSH）预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤（IRI）的保护作用及机制。方法 采用结扎大鼠冠状动脉左前降支30 min后再灌注30/60 min模型,将56只SD雄性大鼠随机分为7组：假手术组、缺血/再灌注（I/R）30 min组、I/R 60 min组、p38MAPK阻断剂SB203580+I/R 30 min组、SB203580+I/R 60 min组、JDSH+I/R 30 min组、JDSH+I/R60 min组。各组干预2 d后,HE染色心肌组织标本,全自动生化分析仪测定血清CK、LDH,免疫组化法检测p38MAPK、COX-2和ICAM-1蛋白的表达。结果 经JDSH预处理或p38MAPK阻断剂SB203580处理后心肌细胞形态结构保持更好。与假手术组比较,I/R30 min组和I/R 60min组大鼠血清中的CK、LDH明显升高（P<0.01）;与I/R 30/60 min比较,SB203580＋I/R 30/60 min组和JDSH＋I/R 30/60 min组均明显降低（P<0.01）。与假手术组比较,I/R使大鼠心肌组织的p38MAPK、COX-2、ICAM-1蛋白表达增加（P<0.01）,且随再灌注时间的延长而增加;与I/R 30/60 min组比较,SB203580和JDSH均能减少其蛋白表达（P<0.01）。结论 大鼠心肌IRI时,激活了p38MAPK信号通路,且与再灌注时间（30~60 min）呈正相关。JDSH通过抑制p38MAPK信号通路,降低其下游基因COX-2和ICAM-1的表达,降低CK、LDH,减轻心肌损伤,起到保护心肌作用。     

加减苍附导痰汤对痰湿阻滞型非酒精性脂肪性肝病氧化应激水平及脂质代谢的影响

目的 观察加减苍附导痰汤对痰湿阻滞型非酒精性脂肪性肝病（non-alcoholicfattyliverdisease,NAFLD）氧化应激水平及脂质代谢的影响。方法 将82例痰湿阻滞型NAFLD患者随机分为治疗组42例和对照组40例。治疗组给予口服加减苍附导痰汤,对照组给予口服奥利司他胶囊,两组的疗程均为12周。观察两组患者治疗前后总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、血清天冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）水平、肝脏脂肪含量（LFC）及不良反应的发生情况。结果 治疗后两组患者TC、TG、LDL-C、HDL-C均较治疗前显著改善（P<0.05）,且治疗组各项指标的改善优于对照组（P<0.05）;两组血清ALT、AST、MDA及LFC较治疗前明显降低,而血清SOD水平升高（P<0.05）,且治疗组各项指标的改善优于对照组（P<0.05）。结论 加减苍附导痰汤对痰湿阻滞型NAFLD患者保肝降酶及降低肝脏脂肪含量有较好的疗效,可能与其提高抗氧化及脂质代谢水平有关。     

转基因作物对畜禽肠道非预期效应的研究进展

随着基因工程技术的发展,全球转基因作物种植面积持续增加,转基因作物及其加工副产物75%以上用于动物饲料原料,因而,非常有必要开展转基因作物饲用安全性评价研究。肠道是机体最大的免疫器官,肠道健康对动物正常生理功能的维持具有重要作用,转基因作物对肠道的非预期效应研究是转基因作物饲用安全性评价的热点。介绍了转基因作物饲用安全性评价的特殊性与必要性,分析了饲料中转基因成分在体内的潜在消解和转移规律,综述了转基因作物对畜禽肠道形态结构和微生态平衡非预期效应的研究进展,旨在为转基因作物饲用安全性评价体系的建立与完善提供参考。     

基于RFID技术的水产品供应链中信息管理的研究

介绍了我国水产品的发展,剖析了水产品供应链技术的发展现状。针对我国水产品供应链中存在的信息不明、滞后、失真等问题,提出将RFID技术应用到水产品供应链中,通过电子标签记录水产品物流中生产物流、加工物流和销售物流的重要信息,包括生产、加工、仓储、运输和销售5个环节。首先提炼出水产品物流中各环节的关键信息,对信息进行标准化编码,建立适用于电子标签编码规则的编码生成平台,实现对水产品过程中信息有效的管理,为水产品的质量安全可追溯系统提供重要的信息。     

中国转基因作物产业化分析

伴随着经济全球化和世界人口的不断地增长,转基因作物产业化对全球的经济、社会、环境起了重要的影响。中国作为转基因作物种植面积400万hm2的发展中大国,转基因作物产业同样对经济、社会和环境起重要作用。文中对中国转基因作业产业的现状及研究状况进行了分析并提出:在中国转基因作物产业化未来的发展中,要加强转基因作物研发能力;构建以企业为主体,市场为导向,形成和完善生产、加工、销售一体化的转基因作物产业体系;强化转基因作物安全管理,完善生物安全评价体系和转基因作物的科普工作。中国做好转基因作物产业化不仅能保障粮食安全,而且能产生巨大的经济、社会和环境效益,为中国可持续发展战略提供不竭动力。     

Nonphytate Phosphorus Requirement and Efficacy of a Genetically Engineered Yeast Phytase for Yellow Broilers at 22- to 42-d-Old Age

An experiment was conducted to investigate the requirement of nonphytate phosphorus (OP) and efficacy of a genetically engineered yeast phytase (PHY A) for Lingnan yellow broilers from 22- to 42-d-old age. A total of 1320 1 -d-old male chicks were randomly divided into 11 dietary treatment groups, which consisted of 4 replicate floor pens with 30 birds per pen.The control group (treatment 1) was fed with basal diet of nPP 0.08% without dicalcium phosphate or phytase supplementation. Dietary levels of nPP were 0.16, 0.24, 0.32, 0.40, 0.48, and 0.56%, respectively, for treatments 2 to 7,through addition of dicalcium phosphate (chemistry grade) to the basal diet. Diets of treatments 8 to 11 were supplemented with PHY A at 200, 400 and 600 U kg-t, a commercial phytase product (PHY B) at 400 U kg-1 level, respectively. The birds in 0.32-0.56% nPP groups gained more than those of the other groups (P<0.05). The nPP supplementation significantly improved feed intake (P<0.05). The feed gain ratio was significantly decreased by 0.40% nPP diet compared to the control birds (P<0.05). The level of 0.48% nPP was required for optimum tibia development. The additions of PHY A at 400 and 600 U kg-1 level and PHY B all significantly improved ADG (P<0.05), ADFI (P<0.05), and dry defatted tibia weight (P<0.05).Similarly, the percentage of tibia ash was increased by 600 U kg-1 PHY A supplementation (P<0.05). The requirement of nPP for maximal ADG and highest percentage tibia ash both was 0.40%. The phosphorus equivalency value of PHY A was estimated as 685 U kg-1 for male yellow broilers of 22- to 42-d-old age.     

实施蓝海战略 振兴民族大豆产业

我国大豆产业面对国外大量涌入的转基因大豆的冲击、广大豆农无钱可赚、国产大豆加工企业没有利润空间的严峻形势,只有实施蓝海战略,才能突出重围,谋求新的发展,实现民族大豆产业的振兴。     

不同薄膜自发气调包装对西兰花的保鲜效果

为探讨适合西兰花的自发气调包装材料,用0.02 mm的双向拉伸聚丙烯(BOPP)、聚丙烯(PP)和聚乙烯(PE)薄膜对西兰花进行自发气调包装,5℃下贮藏30d。结果表明,3种自发气调包装处理不同程度地改善西兰花的保鲜效果。其中,BOPP包装的保鲜效果最好,贮藏30d仍有较高的质量属性和外观属性,叶绿素、维生素C、可溶性糖、可溶性蛋白等营养物质均保持较高的水平,同时霉变率、切口褐变率、MDA和相对电导率处于最低水平。PP包装效果次之,PE包装效果较弱。因此,BOPP适宜作为采后西兰花的自发气调包装材料。