入境肉种鸡检出衣原体阳性及其处理

目的随着加入世界贸易组织,我国海关检疫压力增大,为了维护国家主权和国际声誉,加强出入境检验检疫势在必行。衣原体病是一种重要的人畜共患病,也给养禽业带来巨大的经济损失,必须给予足够的重视,鹦鹉热衣原体对多种动物宿主有广泛的寄生性引起不同动物的多症候群疾病,是世界动物卫生组织动物名录疾病。方法对入境的一批肉种鸡进行抽样检验,按照中华人民共和国出入境检验检疫行业标准用间接血凝检测鹦鹉热衣原体病,做出试验报告。结果经检测出现阳性,肉鸡携带有衣原体病毒。结论根据中华人民共和国进出境动植物检疫法第二章进境检疫第十六条检出二类传染病、寄生虫病的动物,退回或者扑杀,同群其他动物在隔离场或者其他指定地点隔离观察。     

猪李氏杆菌病的病原分离鉴定与药敏试验

为确诊发生脑膜炎的死亡仔猪病例,对病原进行了分离鉴定和筛选敏感药物试验。采用分离培养、染色镜检与纯培养、动物试验、生化试验等方法分离鉴定病原,并用纸片扩散法筛选敏感药物。试验结果表明,分离菌的生化特性、培养特性、溶血性等符合单核细胞增多性李氏杆菌的病原特性,确诊为猪李氏杆菌病;分离菌株对丁胺卡那霉素、头孢噻呋、万古霉素、四环素高度敏感;对土霉素、多黏菌素、磺胺类药物、新霉素耐药。     

PRRSV重组N蛋白表达、纯化及间接ELISA检测试剂盒的研制

采用RT-PCR扩增出大小409bp猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因（PRRSV N gene）,将该基因克隆到表达载体pGEX-KG,构建重组表达载体pGEX-KG-N,转化表达菌株BL21（DM3）诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,重组N蛋白获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为41 000,并具有良好的免疫学活性。扩大诱导培养,收集菌体,提取包涵体,用GST-Protein Purtification Kit亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳检测纯度达到90%以上,可满足诊断抗原质量要求。用纯化PRRSV重组核衣壳蛋白GST-N为包被抗原,建立检测PRRSV血清的间接ELISA诊断方法,并组装ELISA试剂盒。优化后抗原最适包被质量浓度为2.5mg/L;血清最适稀释度为1∶100;对血清样本检测临界值为0.224;与美国IDEXX公司的HerdChek ELISA试剂盒符合率为92%,特异性为95%,敏感性为90%;与猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒等常见猪繁殖障碍病标准阳性血清无交叉反应。ELISA试剂盒批内和批间变异系数分别为3.44%～6.34%和5.04%～7.64%。置4℃条件保存12个月,试剂盒稳定性无明显改变。该试剂盒对350份临床疑似血清检出率为88.6%。研制的ELISA试剂盒为PRRSV临床血清抗体检测及流行病学调查提供了技术手段。     

抗菌肽与抗生素的体外抗菌效果比较

应用由 Hancock实验室改进的微量肉汤稀释法测定了 cecropin P1、cecropin A、magainin 2、defensin 1、bactenecin、lactoferricin和 indolicidin等 7种抗菌肽和盐酸金霉素、去甲万古霉素、土霉素、强力霉素等 4种抗生素的体外抗菌活性 ,并且使用薄层琼脂糖孔穴扩散法比较了抗菌肽中 cecropin P1和 cecropin A与土霉素和呋喃唑酮对大肠杆菌 K88的抑菌效果。结果发现 ,抗菌肽与抗生素一样对几种革兰氏阳性菌和阴性菌都有不同程度的抗菌效果。其中 cecropin A、cecropin P1和 defensin1对大肠杆菌的 2个菌株 ATCC2 5 92 2和 K88的抗菌活性高于抗生素 ,defensin1是各种抗菌肽中对金黄色葡萄球菌抗菌效果最好的。抗生素对试验用金黄色葡萄球菌的抑制活性总体上要好于抗菌肽。与抗生素相比 ,cecropin A、cecropin P1和 indolicidin对猪霍乱沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌具有更好的抗菌效果。另外 ,抗菌肽的抑菌圈边缘十分清晰 ,而抗生素的整个抑菌圈都比较模糊且界线不明。因此 ,从抗菌效果方面考虑 ,抗菌肽可以代替抗生素用于疾病的预防和治疗     

山毛豆对小白鼠的亚慢性毒性试验研究

为开发山毛豆(Tephrosia canadida DC.)作为蛋白质饲料资源,进行了山毛豆亚慢性毒性试验,即在饲粮中用山毛豆叶粉替代20%、40%和60%的基础日粮饲喂小白鼠,对各组小白鼠的采食、生长、脏器系数及组织切片等指标进行了测定和分析。结果表明:①试验期间,小白鼠活动正常,对照组和试验组小白鼠都没有死亡;②试验组小白鼠的各脏器无明显肉眼可见剖检病变;③试验组小白鼠的各脏器系数与对照组差异不显著(P0.05);④40%和60%试验组小白鼠肝脏、肾脏的组织形态发生轻微变化,其他脏器均正常。研究结果表明,山毛豆草粉可安全用于动物饲料中。     

注射用硫酸链霉素细菌内毒素检查法的探讨

按照《中国兽药典》二○○五年版一部[1]中注射用硫酸链霉素细菌内毒素检查法对样品复核检验,试验表明该方法是可行的;并与《美国药典》进行了比较,结果说明《中国兽药典》注射用硫酸链霉素细菌内毒素检查法对细菌内毒素的限值表达比《美国药典》29版[2]更合理、更科学。     

犬瘟热,猫细小病毒,犬腺病毒弱毒株的理化特性及生物学试验

以鸡胚成纤维细胞（ＣＥＦ）、猫肾传代细胞（ＣＲＦＫ）、狗肾传代细胞（ＭＤＣＫ）从引进的疫苗中分别分离到犬瘟热ＣＤＶ－Ａ株、猫细小病毒ＦＰＶ株、犬腺病毒ＣＡＶ１株。对三个弱毒株的细胞病变规律,形态特征,病毒滴度,理化特性,核酸型,血清学交叉反应,本动物的安全性及免疫原性等内容进行了试验。鉴定结果表明,３个弱毒株均可作为制苗用毒种     

用丙硫苯咪唑检测羊线虫抗药性的体外虫卵孵化试验

为探讨用丙硫苯咪唑进行体外虫卵孵化试验检测羊线虫对苯并咪唑类药物的抗药性,对23个羊场的25份田间样品用丙硫苯咪唑和噻苯咪唑进行了虫卵孵化试验并与先前减卵试验（faecal egg count re-duction test,FECRT）的结果比较。结果表明,25份样品中,丙硫苯咪唑和噻苯咪唑对受检虫卵的半数致死量（LD50）均值分别为0.050 1和0.054 0μg/mL,差异不显著。FECRT检测有抗药性的4个羊场,75%的样品对丙硫苯咪唑和噻苯咪唑的LD50均值均在0.1μg/mL以上,只有1个羊场的的LD50值分别为0.068 9μg/mL（丙硫苯咪唑）和0.071 2μg/mL（噻苯咪唑）。检测为可疑的2个羊场,其样品的LD50值为0.04～0.07μg/mL;FECRT检测敏感的蠕虫群体的LD50均在0.04μg/mL以下。此外,丙硫苯咪唑用纯的二甲基亚砜溶解和稀释后于4℃保存7 d,LD50值变化不大,提示药效无明显下降,而保存14 d后药效有下降趋势。     

滁菊挥发油提取工艺研究

目的:采用正交试验法筛选滁菊挥发油最优提取工艺。方法:以挥发油得率为考察指标,分别以药材粉碎度、加水量、浸泡时间、蒸馏时间为考察因素进行正交试验设计,确定滁菊挥发油的最佳提取工艺。结果:影响滁菊挥发油提取的最主要因素为粉碎度,其次为蒸馏时间、加水量、浸泡时间,滁菊中挥发油最佳提取工艺条件为:菊花粉碎度80-100目,14倍加水量,浸泡10 h,提取13 h。结论:此提取工艺合理可行,试验重复性较好,可用于滁菊挥发油的提取。     

家蚕新品种夏芳×秋白的试验与推广

经过小区试验,夏芳×秋白比(苏_3·秋_3)×(苏_4·苏_12)在结茧率、万头蚕产茧量、全茧量、茧层率等成绩方面略优于苏字号.夏芳×秋白与黄鹤×朝霞的试验成绩,经方差分析,其结茧率、克蚁产茧量、万头蚕收茧量在品种间差异极其显著,全茧量差异也达到了显著水平.中试成绩显示:无论是1994年秋还是1997年秋,夏芳×秋白的单产成绩大大优于(苏_3·秋_3)×(苏_1·苏_12),两年单产分别增产57.6%和46.1%.通过对中试控制点调查数据的方差分析,品种间和季节间的单产差异都达到了极显著水平,尤其是品种间的差异大大超过了极显著水平.干茧的缫丝成绩是:夏芳×秋白的光折比(苏_3·秋_3)×(苏_4·苏_12)少8.05公斤,出丝率高3.19%.