多孢木霉HZ-31菌株胁迫下野燕麦内参基因的选择

为构建多孢木霉（Trichoderma polysporum） HZ-31菌株胁迫下野燕麦（Avena fatua L.）基因表达的RT-qPCR技术体系,筛选稳定内参基因,本研究利用GeNorm,NormFinder,BestKeeper和RefFinder 4个程序,对接种多孢木霉HZ-31菌株的野燕麦样本中8种候选内参基因（18S,28S,TUA,UBC,ACT,GAPDH,TBP和EF-1α）进行基于SYBR Green的RT-qPCR分析。结果表明TBP,18S和UBC是木霉侵染时野燕麦中表达最稳定的内参基因,TBP和TUA,TBP和GAPDH,18S和TBP,UBC和18S为最适宜两内参基因组合,可作为多孢木霉HZ-31菌株与野燕麦互作过程中功能基因表达分析的内参基因。     

土壤杀菌剂对木霉根际竞争的影响及木霉对玉米生长作用的初步研究

利用木霉对五氯硝基苯的天然抗性,在土壤中施用4~12μg.g-1土五氯硝基苯。结果表明,哈茨木霉T7在用4μg.g-1土五氯硝基苯处理的玉米根际土中的根际竞争指数为4.332,明显高于对照(RC=3.758)。表明适量浓度的土壤杀菌剂,能提高其在玉米根际土中的种群密度,从而提高其根际竞争;但在6~12μg.g-1土五氯硝基苯处理的玉米根际土中均低于对照,表明过高浓度的杀菌剂会因影响木霉的生长而降低其在根际的竞争能力。盆栽试验表明,用哈茨木霉T7处理土壤,对玉米的出苗无明显作用,但对玉米植株后期的生长有明显的促进作用。     

利用还原糖法测定木霉菌产几丁质酶特性

分别以几丁质和胶态几丁质为唯一碳源对木霉菌（Trichoderma spp.)进行液体发酵培养，发酵上清液与胶态几丁质混合，37℃恒温水浴30min，加入3，5-二硝基水杨酸试剂（DNS），沸水浴10min；通过液体的颜色变化检测是否存在还原糖，进而确定木霉产几丁质酶特性。采用此种方法筛选产几丁质酶木霉菌株，结果更为直观、准确。     

土壤杀菌剂对木霉根际竞争的影响及木霉对玉米生长作用的初步研究

利用木霉对五氯硝基苯的天然抗性,在土壤中施用4～12 μg·g-1土五氯硝基苯.结果表明,哈茨木霉T7在用4μg·g-1土五氯硝基苯处理的玉米根际土中的根际竞争指数为4.332,明显高于对照(RC=3.758).表明适量浓度的土壤杀菌剂,能提高其在玉米根际土中的种群密度,从而提高其根际竞争;但在6～12 μg·g-1土五氯硝基苯处理的玉米根际土中均低于对照,表明过高浓度的杀菌剂会因影响木霉的生长而降低其在根际的竞争能力.盆栽试验表明,用哈茨木霉T7处理土壤,对玉米的出苗无明显作用,但对玉米植株后期的生长有明显的促进作用.     

木霉菌REMI转化子解磷筛选及其解磷效果分析

[目的]为了获得具有防病和解磷双重功能的木霉菌REMI转化子。[方法]从康氏木霉菌(Trichoderma koningii)T30及其60株REMI(限制性内切酶介导的基因整合技术)转化子中筛选出3株解磷作用较好的转化子,并研究不同碳、氮源对转化子TK!46解磷作用的影响。[结果]结果表明,碳源对转化子解磷能力影响较小,而氮源的作用较大,其中转化子在解磷过程中最适氮源是氨态氮。[结论]该研究为研制多功能木霉剂奠定了基础,但完全揭示木霉菌解磷机理仍需进一步研究。     

筛选用于防治大豆尖孢镰刀菌根腐病的木霉菌株

采用平板对峙培养、温室盆栽的方法筛选来自黑龙江省海伦大豆轮作区的木霉菌,用于防治大豆尖孢镰刀菌根腐病.共测试了80个木霉菌株,筛选出3个防治效果较好的木霉菌株MM35、MM9、MM3 ,相对防效分别为26.95%～66.34%、21.52%～63.70%、22.78%～51.05%.盆栽试验表明MM35能够降低大豆根腐病的主要病原菌-尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)在土壤中的种群数目.其中MM9对大豆植株能起到增生作用,MM35、MM3则无明显的促生作用.     

青霉、木霉对平菇菌丝生长的影响及消毒液的初筛

[目的]研究青霉、木霉对平菇菌丝生长的影响,并筛选用于防控空气及环境中病原菌的有效消毒液。[方法]在平菇生长 PDA培养基上接种霉菌开展菌丝对峙试验,观察相交时两者菌丝生长状况。研究过氧化氢、新洁尔灭、84消毒液、来苏尔、高锰酸钾、75％医用酒精对侧耳木霉、绿色木霉、哈茨木霉、桔青霉、托姆青霉和短密青霉共6种青霉、木霉菌株的生长抑制作用。[结果]菌丝对峙试验表明,青霉、木霉菌对平菇的危害主要有争夺营养、竞争性杀伤菌丝、产生拮抗、侵袭缠绕穿透平菇营养菌丝、产生毒素毒害生长菌丝。6种消毒液对不同的霉菌抑制作用各有不同,均有一定的抑制,效果强弱与霉菌的不同属有明显的区别。新洁尔灭对6种霉菌的抑制作用差异显著,3％过氧化氢、84消毒液、5％来苏尔、高锰酸钾和75％酒精对3种木霉作用差异不显著,对3种青霉作用差异显著。[结论]新洁尔灭对青霉木霉菌的预防抑制效果显著,可作为生产中消毒防杂用药使用。     

Sequence analysis of rDNA intergenic spacer region (IGS) as a tool for phylogenetic studies in Trichoderma spp.

Different from ribosomal genes, which contain highly conserved sequences that are detected in all organisms, the intergenic spacer of rDNA (IGS) appears to be the most rapidly-evolving spacer region. For this reason we tested this region for phylogenetic studies. This report focuses on the study of IGS sequences of isolates belonging to Trichoderma section (T. viride, T. koningii, T. hamatum, T. erinaceus, T. asperellum) and Pachybasium section (T. harzianum, T. crassum, T. fascicu…     

木霉对食用菌侵染能力的分析

研究了49株木霉对食用菌菌丝的侵染能力,结果显示:不同木霉的侵染能力不同,对食用菌侵染能力强的木霉对植物病原真菌的侵染能力并不一定强,表现出木霉对真菌侵染的特异性。木霉侵染食用菌的机理研究结果显示:木霉可通过溶壁、缠绕等方式作用于食用菌菌丝细胞壁,木霉发酵液对食用菌和植物病原菌都有很好的抑制作用,但木霉产几丁质酶的能力与木霉的侵染能力没有直接关系。     

草果疫病初步研究*

 从发病的草果茎杆上组织分离得到草果疫病病菌，用不同农药进行药剂筛选试验，经哈茨木霉（Trichoderma harzimum）不同菌株和病菌在PDA平板上对峙培养，结果表明：易保1000倍药液下病菌菌丝无法生长，百菌清600倍、易保1500倍、春雷霉素400倍药液对病原菌菌丝生长抑制率在60%以上；哈茨木霉不同菌株对草果疫病病原菌有很好的抑制力，且药物诱变和紫外线诱变的突变菌株抑菌效果比野生型菌株好。