美洲黑杨新无性系的ISSR鉴别及SCAR标记转化

为了从分子水平上对美洲黑杨新无性系材料进行准确快速鉴定,从100条ISSR引物中筛选出10条具多态性的引物对包括钻天杨和69杨在内的6个黑杨无性系开展指纹图谱的初步构建,并将钻天杨和03-北-1-15中扩增出的特异ISSR条带转为可用于快速鉴别黑杨无性系的SCAR标记。结果表明,ISSR指纹分析结合SCAR标记可以对供试黑杨无性系进行区分与鉴定,进而为杨树林木品种鉴定以及黑杨育种研究提供理论依据。     

无花果叶形性状的SCAR分子标记

无花果(Ficus carica)为桑科(Moraceae)无花果属(Ficus)植物,是人类最早栽培的果树之一(Mordenchai et al.,2006).无花果不仅具有较高的营养价值,还具有多种医疗效果.另外,还可以加工成保健饮料、酒、茶、果干、果脯、果酱、罐头、果汁等产品,市场供不应求.近年来,无花果与草莓、猕猴桃等同为新开发的第三代水果.另外,无花果树在净化空气和绿化方面也有很好的作用.但目前我国无花果只在新疆、江苏、山东及以南的部分省区有少量种植,而且品种资源较为混乱,给种植者带来较大的经济损失.所以加强对无花果资源的鉴定和管理具有重要的现实意义.     

Analysis on ‘Whole Red’ of patterns Oujiang colour carp (Cyprinus carpio var.color ) by SRAP and SCAR markers

The sequence‐related amplified polymorphism (SRAP) technique was applied to identify the genetic difference between the ‘Whole Red’ (‘WR’) population and the ‘Whole White’ (‘WW’) population. The specific SRAP band, namely SR_2,7^{173 bp} (SR indicates the first two letters of SRAP) from ‘WR’ and ‘WW’, was identified from the amplified bands of 12 primer pairs (PP) screened from 88 SRAP PP. After gel extraction, cloning and sequencing of specific band from the two populations, the sequence was submitted to database of Genome Sequence Survey. blast analysis showed that this SRAP fragment shared high similarity to functional genes of Danio rerio. Four primers (22–26 bases) were designed according to the sequence information. Then, polymerase chain reaction amplification was carried out in the two populations. The experimental results also showed that among four sequence‐characterized amplified region (SCAR) markers, only SC‐3 (154 bp) developing from SR_2,7^{173 bp} (me2‐em7) showed specificity to ‘WR’. Examination with a large sample size showed that SCAR 3 (SC‐3) could be positively amplified with 85% frequency in the ‘WR’ population rather than in the ‘WW’ population. The results indicated that the SC‐3 marker could be used as a specific molecular marker for population identification, providing an effective, easy and rapid method for discriminating different populations and conducting genetic analysis.     

基于SCAR标记的坛紫菜“闽丰1号”多重PCR鉴定技术的建立

为建立坛紫菜“闽丰1号”(Z-26)品系的种质分子鉴定方法,采用300条RAPD引物对6个坛紫菜纯系进行标记扫描,从中筛选出“Z-26”品系的特异性随机扩增多态DNA(RAPD)标记9个,经克隆和测序,其中两个特异性标记成功转化为特异SCAR标记(Z26-600和Z26-360),标记片段大小分别为530 bp和242 bp.并进一步通过4个不同实验验证,确定Z26-600和Z26-360两个标记是坛紫菜“Z-26”品系的特异和稳定性标记.最后为进一步简化种质鉴定程序,建立更为便捷和准确的种质鉴定方法,经过条件优化,以此两个标记为基础建立了坛紫菜“Z-26”品系的多重PCR鉴定方法,该方法可以在一次PCR反应中同时鉴定两个特异性标记.     

籽用大麻性别连锁标记的验证及SCAR标记开发

大麻是雌雄异株的异花授粉作物,在苗期鉴定出植株的性别,对大麻育种及生产具有重要的意义。为开发与籽用大麻品种性别连锁的SCAR标记,本研究以汾麻3号、榆社麻和苍山麻为试验材料,研究已有的11个性别连锁标记在籽用大麻品种中的适用性。结果表明,3个标记（OPD-05、UBC-354和MADC2）在籽用大麻品种中呈雄性特异,尚未发现雌性特异条带。回收雄性特异条带并测序,根据测序结果新开发了6个SCAR标记,其中MADC2-8表现最好;进而利用123份已知性别的样本来检测MADC2-8的准确性,发现其平均准确性高达98.34%。该研究不仅丰富了大麻性别鉴定的分子标记,而且为大麻性别研究和实际应用奠定基础。     

小麦-华山新麦草7Ns异附加系的分子细胞遗传学研究

为了给有效利用华山新麦草基因提供新的种质材料,利用细胞遗传学、分子标记等技术,结合田间农艺性状考察,对从小麦-华山新麦草七倍体材料H8911-99与硬粒小麦D4286杂交F4代分离群体中选育的杂交后代12DH25进行了鉴定。华山新麦草基因组特异SCAR标记鉴定表明,12DH25含有华山新麦草遗传物质;有丝分裂和花粉母细胞减数分裂中期I染色体数为2n=44=22Ⅱ,基因组原位杂交(GISH)出现两条杂交信号,且能配对,表明两条外源染色体是华山新麦草的一对同源染色体。选取定位于小麦7个部分同源群上的28对STS标记对12DH25及其亲本基因组DNA进行扩增,定位于小麦第7同源群上的STS标记BE591127和BG274576能在12DH25中扩增出华山新麦草特征条带,将12DH25附加的华山新麦草染色体归属于小麦第7部分同源群。由此确定矮秆材料12DH25是一个稳定的小麦-华山新麦草7Ns二体异附加系。     

一个鉴别低温刺激型秀珍菇的ISSR-SCAR标记建立与应用

为了快速、准确地鉴别低温刺激型秀珍菇菌株,在对18个供试菌株进行拮抗试验、现蕾出菇试验、ISSR图谱分析的基础上获得了秀珍菇菌株的ISSR特异性标记,将其克隆、测序.根据测序结果,应用Primer 6.0软件设计SCAR引物进行引物筛选,获得1对引物并成功转化为低温刺激型秀珍菇的稳定SCAR标记.采用该引物对供试秀珍菇...     

甘蓝型油菜黄籽基因的SCAR标记鉴定和快速检测

将一个甘蓝型黄籽油菜RAPD标记（S1130）发展成显性SCAR标记（SCS1130）。比较SCS1130的三种检测方法，包括测定PCR反应物浓度、PCR板EB直接染色和电泳，结果表明EB直接染色是最简单快速的检测方法，可降低成本、省时。SCS1130的发展为开展甘蓝型黄籽油菜分子标记辅助选择创造条件，将便利和加快其选育。     

小麦 黑麦大粒1BL/1RS易位系的分子细胞学鉴定

为明确小麦 黑麦大粒衍生系14 1 2的遗传组成,综合采用细胞学、基因组原位杂交(GISH)、SCAR标记、SSR标记对该衍生系进行鉴定。黑麦基因组特异SCAR标记鉴定表明,14 1 2含有黑麦遗传物质;有丝分裂和减数分裂中期Ⅰ染色体数目为2n= 42=21Ⅱ。以黑麦基因组为探针的GISH检测表明,14 1 2含有2个黑麦染色体臂。黑麦7条染色体上的特异标记鉴定表明,只有黑麦1RS上的特异SCAR标记在14 1 2中扩增出黑麦特异条带。小麦7个部分同源群染色体长短臂上的SSR引物鉴定表明,只有1BS上的4对引物在14 1 2中未扩增出1BS的条带,其余染色体上的引物均扩增出了相应条带。由此证实小麦1BS被黑麦1RS所替代,衍生系14 1 2为1BL/1RS易位系材料。     

中国葡萄属野生种抗旱基因的分子标记及遗传分析

以葡萄属种间杂交组合燕山葡萄×河岸葡萄的F_1代群体为试材,采用BSA法构建抗旱植株DNA混合样,从300个随机引物中初步筛选出7个可以扩增出多态性DNA的随机引物,用于对供试材料扩增分析,获得了与中国葡萄属野生种抗旱基因连锁的RAPD标记S226-1100、S271-550、S1165-1500、S264- 1300、S195-1000、S1345-1400和S513-1700。并将7个RAPD标记在中国葡萄属野生种、欧洲葡萄、美洲种的冬葡萄和沙地葡萄等18个株系或品种中做了进一步分析。对与目标性状连锁较紧密的RAPD标记S226- 1100进行了克隆测序,转化成专一性的SCAR标记DR-760。经JoinMap 3.0软件分析表明,RAPD标记S226-1100、S271-550、S1165-1500与目标基因位点处于同一个连锁群上,其中以S226-1100与目标基因位点距离较近,为21.8cM。