关于超级稻品种培育的资源和基因利用问题

 超级稻育种是矮化育种和杂种优势利用的深化,其本质是资源或基因及基因与环境互作的综合利用。为给超级稻育种提供思路,回顾和分析了超级稻育种中的资源及基因综合利用现状,包括籼粳基因渐渗及利用、栽培稻产量QTL累加及利用、野生稻产量及抗病基因发掘及利用、株型和根系相关基因的发掘及遗传改良等。指出由于真正能用于超级稻育种的有利基因及连锁标记还不多,水稻基因研究成果还不足以支撑超级稻分子育种,目前的超级稻育种仍以常规杂交技术和资源的综合利用为主。需要进一步发掘高产、优质、抗病虫、抗逆基因,常规育种技术与分子育种技术相结合,培育广适性或绿色超级稻。     

基于转基因产品成分低水平混杂问题探究我国转基因阈值制度

随着全球经济贸易一体化发展,转基因产品商业化为多边国际贸易带来无限的机遇和挑战.随之而来的转基因低水平混杂(LLP)问题作为不可规避的现实问题,成为国际贸易中的前沿议题.转基因阈值制度作为国际社会缓解转基因低水平混杂问题的重要因素,逐渐引起各国政府关注.以转基因低水平混杂问题现状为立足点,从技术和政策层面分析了建立转基...     

Genetic diversity in the coconut lethal yellowing disease phytoplasmas of East Africa

DNA primers, based on the ribosomal sequences of lethal yellowing-type disease (LYD) phytoplasmas, were used to analyse genetic variation within the lethal yellowing-type diseases of coconut in East Africa. Samples were collected from palms in Kenya, Mozambique and high, medium and low disease incidence areas of Tanzania. The mollicute-specific primer pair P1 and P6 amplified a 1.5 kbp product from all diseased palms and no product from symptomless palms, indicating that phytoplasmas were associated with all of these diseases. However, the Rohde forward and Rohde reverse primers (a second rRNA primer pair designed to detect East African LYD-associated phytoplasmas) only amplified products from Tanzanian and Kenyan diseased palms and not from those of Mozambique. Conversely, primers Ghana 813 and AK-SR, designed for specific detection of coconut-associated phytoplasmas in West Africa, amplified products only from the Mozambique palms, indicating that the phytoplasma associated with LYD in Mozambique is more closely related to those from West Africa. This was supported by restriction enzyme digestion of PCR products. DNA sequencing of PCR products from phytoplasmas within Tanzania revealed no detectable differences in the rDNA sequences of isolates from high, medium and low incidence areas.     

北京地区禽传染性支气管炎病毒分子变异机制研究

 从北京地区传染性支气管炎病毒（IBV）肾病变分离株BJ#-1、BJ#-2、BJ#-3株中利用RT-PCR成功扩增出1054bp纤突蛋白S#-1基因高变区。将3段S#-1基因分别克隆到Puc19质粒中,对3个重组阳性质粒进行双向测序,获得3个分离株S#-1基因高变区的序列。将得到的序列与标准株M#-（41）、Beaudette株和疫苗株H#-（120）及广东地方分离株D#-（41）株进行核苷酸和氨基酸同源性比较分析,并进一步推导它们的蛋白二级结构进行比较。结果表明,3株分离株与M#-（41）株的核酸碱基序列和氨基酸序列同源性比与H#-（120）株和Beaudette株的高,而蛋白二级结构却与H#-（120）疫苗株最为相近,暗示核酸碱基序列差异与病毒抗原决定簇的二级结构变化进而导致血清型变化三者之间的复杂关系。     

鸡贫血病毒山东分离株全基因克隆

设计了 Ｃ Ａ５、 Ｃ Ａ６ 和 Ｃ Ａ７、 Ｃ Ａ８ 两对引物,分别扩增鸡贫血病毒（ Ｃ Ａ Ｖ）山东分离株 Ｓ Ｊ１ 的 １５ Ｋｂ 和 ０８ Ｋｂ Ｄ Ｎ Ａ 片段。并将这两个片段分别克隆至 ｐ Ｕ Ｃ１１９ 和ｐ Ｂｌｕｅｓｃｒｉｐｔ（ Ｓ Ｋ＋ ）载体质粒,最后一起克隆到 ｐ Ｑ Ｅ３２ 载体质粒上,使两个片段前后连接成一个全长的病毒 Ｄ Ｎ Ａ。用该质粒转染 Ｍ Ｄ Ｃ Ｃ Ｍ Ｓ Ｂ１ 细胞,经免疫荧光抗体法和 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 检测到 Ｃ Ａ Ｖ 病毒,结果证明我们得到了一个 Ｃ Ａ Ｖ 感染性全基因克隆。     

我国鸡传染性支气管炎病毒地方性流行毒株S1基因的RT-PCR扩增及其克隆与鉴定

采用ＲＴ－ＰＣＲ方法,以ＩＢＶＳ１全基因特异性引物分别从我国华东（ＨＤ）、华北（ＨＢ）、华中（ＨＺ）、华南（ＨＮ）、西北（ＸＢ）及东北（ＤＢ）等地的ＩＢＶ流行株基因组中扩增出预期的１．７ｋｂ左右的ＤＮＡ片段。ＰＣＲ产物的ＨａｅＩＩ酶切分析及其与英国ＩＢＶＳ１全基因核酸探针的分子杂交证实所获６个ＩＢＶ流行株的ＰＣＲ产物为ＩＢＶＳ１基因。将此６个毒株的Ｓ１基因ＰＣＲ产物分别进行５’和３’端的ＢａｍＨＩ和ＨｉｎｄＩＩ酶切识别位点的分子修饰之后插入到克隆质粒ｐＵＣ１８的ＢａｍＨＩ／ＨｉｎｄＩＩ位点,在大肠杆菌中实现了目的基因的分子克隆。Ｓ１基因的ＲＦＬＰ分析表明我国ＩＢＶ已有分子水平的变异。     

广西南宁甘蔗赤条病调查及分子检测

2020年在广西南宁市金光农场发现'桂糖58'和'柳城05-136'疑似感染甘蔗赤条病,为明确其病原,本研究对不同甘蔗品种进行了发病率调查,并采集病样进行了PCR检测分析.田间调查结果表明:不同品种自然发病率不同,'桂糖58'发病率为29％～52.33％,发病严重田块平均发病率为49.67％,发病中等田块平均发病率为3...     

一种挑取重组子克隆的简易方法

本研究应用菌落ＰＣＲ 方法挑取重组子克隆,简单易行,可减少提取质粒的工作量,使繁重的实验工作得以简化。     

柚类果树叶片斑驳病的病原鉴定与检测

柚类是柑桔中的一类重要品种,在我国有广泛的分布、近年来,在福建等产区发现柚类病树日趋２增多、基病状为叶片斑驳、小果、植株矮化、暂称为叶片斑驳病。本有通过组织嫁接从病柚树传染到柚健苗和芦柑健苗。在电下观察,其病原功体的形态和细胞壁构造与柑桔黄龙病的病原十分要似。应用柑桔黄龙病病原ＤＮＡ的特异性引物进行ＰＣＲ试验产生的ＰＣＲ产物,其分子量与柑桔黄龙病病原ＤＮＡＰＣＲ产物的基本相同,为５６３ｂｐ;以及应     

益生地衣芽孢杆菌天门冬氨酸激酶Ⅱ基因的PCR扩增及序列分析

通过聚合酶链反应（ＰＣＲ） 扩增得到了益生地衣芽孢杆菌Ｈ８８ － ３ 株天门冬氨酸激酶（Ａｓｐａｒ ｔｏｋｉｎａｓｅ,ＡＫ） Ⅱ基因,并用ＡＢＩＰＲＩＳＭＴＭ ３７７ ＤＮＡＳｅｑｕｅｎｃｅｒ 进行序列测定,所得核苷酸序列及推导的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌ＶＢ２１７ 株进行了比较,结果它们的同源性非常高。