Establishment of Digital RT-PCR Assay for Detection of Swine Influenza Virus H3N2 Subtype

A new assay for the detection of swine influenza virus (SIV) was developed with a novel nucleic acid probe——Molecular beacon in this study. The specific primers and molecular beacon probes were designed according to the conserved region of H3 and N2 genes of SIV H3N2 subtype. A digital RT-PCR assay was developed for detection of SIV H3N2 subtype. The results showed that SIV H3N2 subtype could be identified simultaneously on this microarry with high sensitivity and reproducibility,which could reach to 10⁶ dilute viruse. The conclusion was that the digital RT-PCR method could analyze quantitatively the RNA templates.On the identification of H3N2 SIV,the digital RT-PCR method was much more scientific than Real-time quantitative PCR method.     

干旱胁迫和施氮对结缕草种群特征和生理特性的影响

分析了氮、水分与上海结缕草(Zoysia japonica cv. Shanghai)生长之间的相互关系,为上海结缕草草坪科学施肥和灌溉提供依据。试验选择干旱胁迫和施氮2个因素,各设置3个水平,结果表明:轻度干旱胁迫+中氮组合处理的草坪品质非常好,草坪密度和地上生物量高于或接近无干旱胁迫+中氮组合处理,且显著好于轻度干旱胁迫的其他处理和重度干旱胁迫的全部处理(P0.05);高氮处理的结缕草株高在同一干旱水平中均明显高于其他处理(P0.05)。在相同干旱胁迫下,施氮后第19天,结缕草叶片的相对电导率、游离脯氨酸含量和可溶性糖含量均随施氮量的增加而呈现升高的趋势;与此相反,施氮后第41天时,则呈现出随施氮量的增加而降低的趋势;随着干旱胁迫程度的增加,叶片丙二醛含量呈现增加的趋势。研究结果表明,适度的干旱胁迫和适量的氮肥有助于维持上海结缕草较好的坪用品质。     

甲型H1N1流感病毒NS1蛋白核仁定位的研究

为研究2009年甲型H1N1流感病毒的NS1蛋白的核仁定位情况,采用RT-PCR对其NS1基因进行了扩增,将其克隆至PEGX-KG载体,构建重组质粒KG-NS1,转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达重组蛋白.然后采用GST柱亲和层析方法纯化NS1重组蛋白,免疫家兔来制备多抗,Western blot检测抗体.通过间接免疫荧光对表达不同长度NS1 (NS1-219、NS1-230、NS1-237)的3种重组流感病毒进行了核仁定位的研究,3种重组毒的NS1蛋白存在于细胞核和细胞质,但都不能定位于核仁,说明NS1蛋白的截短与否并不影响其核仁定位,其生物学意义有待于进一步研究.     

IBV AH1-99分离株N基因的克隆及序列分析

利用RT-PCR技术成功扩增出IBV AH1-99分离株的N基因全长cNDA,将其克隆到pMD18-T载体上。经酶切分析、PCR鉴定及核苷酸序列测定,成功获得该分离株N基因的重组质粒。序列分析结果表明,分离株N基因全长1 230个核苷酸,编码409个氨基酸。同部分IBV参考毒株相比,核苷酸同源性为85.8%~89.9%,氨基酸同源性为86.6%~91.0%,在进化关系树中,AH1-99与国内分离株X、LX4亲缘关系较近。     

Bird flu (H7N9) outbreak and its implications on the supply chain of poultry meat in China

During the past two decades, food safety issues in China not only posed serious threats to Chinese consumers but also damaged the image of Chinese products internationally. In China, food safety is not only about scientific discoveries, advanced laboratories, and sanitation equipment; it is more about the role of different players in the food supply chain. The poultry meat supply chain is instrumental in the spread of the avian influenza A virus (H7N9), raising questions about how policymakers respond to such threats and whether industries need to be restructured to manage and control this epidemic so that it does not recur. As a short-term measure, to prevent the spread of this disease, government authorities enforced the closure of live bird markets (LBM) in disease-affected areas of China. However, in the long term, the poultry meat supply chain needs to be restructured. The aim of the current study was to analyze distribution channels for chicken meat in China and then describe arrangements in poultry meat sectors that incorporate small- and medium-scale producers into the supply chain while responding to shifts in LBMs. We also assessed the role of LBMs in spreading H7N9 and how these interventions affect the poultry meat supply chain in the Chinese market.     

施氮量对一年生黑麦草生长特性的影响

研究了不同施氮水平(0、100、200和300 kg/hm2,分别表示为N0、N100、N200和N300)对扬州地区一年生黑麦草产量、分蘖数、株高等生长特性及经济效益的影响.结果表明:施氮量为100,200和300kg/hm2时,黑麦草鲜草总产量分别比不施氮增产75%,146%和134%.当施氮量达到200 kg/h...     

氮肥施用量对嵌合体‘金旗'玉簪叶色的影响

以嵌合体花叶玉簪代表品种‘金旗'为试验材料,研究了4个水平的氮肥处理(盆栽土尿素用量0,1,2,3g/kg)对其不同叶色部位叶色值、叶绿素含量、全氮含量、氮代谢关键酶活性以及叶绿体超微结构的影响.研究结果表明,氮肥主要影响‘金旗'玉簪叶片黄色部位的叶色变化,0和1 g/kg氮肥处理能够维持其花叶性状,叶绿素、全氮含量以...     

H5N1亚型禽流感病毒低剂量感染小鼠发病模型的建立

为模拟哺乳动物感染H5亚型高致病性禽流感病毒(HPAIV)的发病进程,本研究采用对哺乳动物高度致病的H5N1亚型HPAIV株A/bar-headed goose/Qinghai/3/05 (BHG/3/05),以低剂量鼻腔接种小鼠,观察发病、存活、病毒复制及组织病理损伤情况.结果显示,100.4 EID50即能够100％感染小鼠,但发病表现缓慢,死亡延迟至8d以后,存活达60％;体内病毒复制可持续10 d以上,感染后前3d病毒的增殖限于呼吸道,随后扩散至脑、脾、肾等其他器官;组织病理学观察肺脏早期表现出渗出性炎症,第10d发展为典型的间质性肺炎.本研究结果为探讨人禽流感的病理发生机制提供了具有价值的模型.     

绿肥与化肥配施对植烟土壤微生物量及供氮能力的影响

通过田间试验,研究绿肥与化肥配施对植烟土壤微生物量碳、氮及土壤供氮能力的影响,为探索发展低碳烟草农业、构建资源节约型和环境友好型农业,实现烟叶生产的可持续发展和特色烟叶开发提供理论依据。结果表明,绿肥与化肥配施能明显提高土壤微生物量碳、微生物量氮和土壤的供氮能力。在烟株生长发育过程中,绿肥与化肥的不同配施比例对土壤微生物量碳、微生物量氮及土壤供氮能力的影响有明显的差异。与对照相比,配施绿肥的各处理在烟株不同生育时期土壤微生物量碳、微生物量氮和脲酶活性的提高幅度分别为7.07%~123.32%,3.28%~157.69%和3.13%~50.00%,土壤全氮和碱解氮含量的最高提高幅度分别为22.21%和15.42%,绿肥配施量以15 000~22 500 kg/hm²的综合效果较好。在烟草不同生育时期,土壤微生物量碳和微生物量氮的动态变化不同,微生物量碳的高峰出现在团棵期和现蕾期,而微生物量氮的高峰出现在团棵期和圆顶期。绿肥与化肥配施后,绿肥对促进微生物生物量增加和酶活性增强的贡献更大,绿肥矿化释放的氮素可以作为微生物量氮和土壤氮的重要给源,同时绿肥还具有明显的保存氮素的作用,能够提高土壤的供氮能力,表明配施绿肥后土壤生物过程活跃,有利于土壤有机物质的转化和烤烟正常生长所需要的营养供应。     

奶牛饲喂不同精粗料比TMR对排泄粪尿和氮磷的影响

将18头荷斯坦产奶牛随机分为试验6组,每组3头,试验Ⅰ～Ⅵ组奶牛依次饲喂不同精粗料比（精料：粗料）的TMR1（20∶80）、TMR2（30∶70）、TMR3（40∶60）、TMR4（50∶50）、TMR5（60∶40）、TMR6（70∶30）的日粮,探讨不同精粗料比TMR对奶牛粪尿、N、P的排泄量和CH4释放量的影响。结果,饲喂TMR4与饲喂TMR1和TMR6的奶牛相比,每头奶牛每年CH4释放量减少15.20Kg和89.84Kg;粪便排泄量减少1.37t和1.41t;N降低3.71kg和17.50kg;P减少2.59kg和4.07kg,比TMR1FCM提高10.54%（P〈0.05）;乳脂率增加9.67%（P〈0.05）;乳糖增加7.26%（P〈0.05）,能减少奶牛对土壤水源及空气的污染,提高奶牛的生态效益和经济效益。