不同倍性菘蓝幼苗对盐渍胁迫的耐受能力及保护性酶的响应机制

为了比较不同倍性菘蓝对盐胁迫的耐受能力及其体内保护性酶的响应机制,采用在MS培养基中加入小同浓度的NaCl模拟盐胁迫处理,观测二倍体和四倍体菘蓝种子的萌发和幼苗生长状况,测定幼苗中丙二醛及脯氨酸含量,同时对其地上部分保护性酶SOD、POD和CAT的活性进行测定.对种子萌发、幼苗生长以及丙二醛和脯氨酸含量的测定结果均表明,四倍体较二倍体耐盐胁迫能力强.对其体内保护性酶的研究结果表明,在不同NaCl浓度下,起主要保护作用的酶是不同的,无论有无盐胁迫、NaCl浓度高低,四倍体中的SOD、POD和CAT三种保护性酶活性均高于二倍体,这说明在盐胁迫下四倍体菘蓝对活性氧的清除能力要高于二倍体菘蓝,部分解释了四倍体比二倍体对盐胁迫耐受能力高.     

甘蓝型油菜与菘蓝原生质体融合及植株再生体系的研究

以甘蓝型油菜(Brassica napus)和菘蓝(Isatis tinctoria)叶片为材料提取原生质体,采用PEG-高钙高pH法融合亲本原生质体,采用固液双层培养法诱导愈伤组织的形成.研究适宜原生质体分离的酶种类及浓度,并考察了激素种类和用量对愈伤组织诱导和分化的影响.结果表明,5 mg/L纤维素酶+3 mg/L离析酶适合甘蓝型油菜和菘蓝的酶解.各培养基中适宜的激素浓度分别为,诱导培养基PellB 1.0 mg/L6-BA+1.0 mg/L NAA+0.25 mg/L 2,4-D;增殖培养基PellC 2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+0.1 mg/L2,4-D;分化培养基PellE 2.0 mg/L 6-BA +0.1 mg/L NAA+0.02 mg/L 2,4-D.获得了15株再生植株,杂种幼苗叶片均呈深绿色,叶表面覆有厚的蜡质,叶片肥厚,植株在成熟期时株高比甘蓝型油菜矮,开花较晚,雄蕊发育不完全,杂种体细胞染色体数目为48～66.     

氮、磷、钾对菘蓝生长和氮代谢相关酶的影响研究

[目的]研究氮、磷、钾对菘蓝生长和氮代谢相关酶的影响。[方法]采用砂培方法栽培菘蓝,测定不同氮磷钾配比处理下,菘蓝生物量、硝酸还原酶(NR)和谷氨酰胺合成酶(GS)的活性。[结果]菘蓝营养生长各阶段对氮磷钾需求不同,营养生长后期氮磷钾的共同作用对菘蓝生物量积累有重要影响,根冠比以低氮水平下较高;一定氮素水平下,增加钾水平促进了菘蓝叶片硝酸盐的积累,叶片NR活性受到氮和钾的共同作用的影响,GS活性与氮钾水平及二者比例有关。[结论]氮、磷、钾等营养成分对菘蓝生长和氮代谢相关酶均有影响。     

板兰根中三种拟除虫菊酯杀虫剂的残留分析

研究了板蓝根中3种拟除虫菊酯杀虫剂残留分析方法。以石油醚为萃取溶剂，分别用索氏抽 提法、浸渍振荡法、超声波法提取。提取液经100 mL丙酮∶0.05 mol/L氯化钙溶液(1∶1)液 -液分配净化后，以弗罗里硅土柱净化，5%乙酸乙酯-石油醚淋洗，气相色谱法电子捕获检 测器测定。结果表明，方法的线性范围为0.4×10-10～4×10-10g，氯氰菊酯 、氰戊菊酯、溴氰菊酯最低检测浓度分别为5×10-3、5×10-3、2×10-3 mg/kg。3种提取方法对板蓝根的添加回收率、变异系数符合农药残留分析的要求。     

水分胁迫对菘蓝幼苗生长和生理特性的影响

选用产自陕北黄土高原的菘蓝种子,用盆栽称量控水法,研究水分胁迫对菘蓝幼苗生长和生理特性的影响。研究发现,随着干旱胁迫程度的加深,菘蓝叶片长度、宽度均受到明显的抑制,根冠比明显增大,Pro、可溶性糖、超氧阴离子含量均有所升高,类胡萝卜素含量下降。同时,在同一水分水平下,随胁迫时间的延续,可溶性蛋白、Vc、类胡萝卜素含量均先下降后升高;叶片保护酶SOD、CAT、POD活性上下波动;超氧阴离子、可溶性糖含量逐渐升高。研究结果认为,土壤干旱明显抑制菘蓝生长,同时其保护酶系统和渗透调节物质能够快速变化以适应外部环境,维持植株的正常生理代谢功能,因此,菘蓝具有较强的抗旱能力。     

基于草甘膦筛选的菘蓝转化体系的建立

介绍了以菘蓝草甘膦筛选的遗传转化体系,以携带植物表达载体pASM12的根癌农杆菌LBA4404对四倍体菘蓝进行叶盘法转化,在选择培养基中加入8 mg/L的草甘膦进行筛选,获得草甘膦抗性的再生植株,对再生植株进行PCR检测和草甘膦抗性试验,结果表明:PCR检测表明子叶的转化频率达30%,下胚轴的转化频率达40%;对PCR阳性植株的草甘膦抗性试验表明,多数植株在不同程度上表现出对草甘膦的抗性。     

菘蓝试管苗玻璃化过程中抗氧化物酶活性的变化

为明确植物体内抗氧化酶活性变化与组培玻璃苗发生的关系,以菘蓝(Isatis indigotica Fort.)正常试管苗和玻璃苗为研究材料,对其抗氧化物酶活性和膜脂质过氧化水平进行了比较分析.结果表明:正常苗和玻璃苗中过氧化物酶(POD)活性随培养时间的延长先降低后升高,过氧化氢酶(CAT)活性先升高后降低,过氧化物歧化酶(SoD)活性和丙二醛(MDA)含量始终呈上升趋势.同一培养时期,玻璃苗中CAT、SOD活性均低于正常苗,而MDA水平远远高于正常苗.表明组培过程中有氧自由基的胁迫,而玻璃苗细胞内保护酶的调节功能紊乱,从而发生了更严重的脂质过氧化.此外,与正常苗相比,玻璃苗中POD同工酶电泳谱带出现增加、缺失等异常现象,表明玻璃苗中酶的表达失常,遗传稳定性改变.     

激素对菘蓝叶片组织培养的影响

[目的]为提高菘蓝的生产效率、降低其生产成本提供技术支持。[方法]以菘蓝无菌苗的叶片为外植体,利用正交设计研究6-BA和NAA对菘蓝叶片分化的影响。[结果]处理6-BA 1．5mg／L ＋NAA0．6mg／L和6-BA2．0mg/L＋NAA0．2mg／L的不定芽分化率均为93．75％,分化系数分别为40．0和38．75。NAA对叶片分化率的影响最大,其与6-BA的交互作用较强,6-BA的影响相对较小。菘蓝叶片分化的最佳培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA 0．6mg／L。IBA和NAA对菘蓝试管苗生根均有一定的促进作用。单独使用0．1mg／LNAA的生根率迭卯％以上且根的质量较好,而过高浓度抑制生根。IBA对菘蓝生根的促进作用不如NAA,生根率较低且根的质量较差。菘蓝生根的适宜培养基为MS＋NAA0．1mg／L。[结论]该研究为菘蓝的组织培养和快速繁殖奠定了初步基础。     

菘蓝生殖方式的初步研究

对十字花科菘蓝属植物菘蓝的生殖方式进行观察,观察结果表明:(1)菘蓝花两性,四强雄蕊,花粉较多,主要靠昆虫传粉;(2)P/O(花粉/胚珠)值为9 426~28 280,属于异交繁育系统,其传粉过程观察、自异交试验及花粉在柱头上萌发的显微观察结果也证明菘蓝主要以异花传粉的方式进行交配;(3)菘蓝花期自交结实率只有7.8%,具有较强自交不亲和性,自交不亲和的作用部位是柱头表面,属于孢子体自交不亲和型。     

板蓝根病害的发生及其防治技术

板蓝根为广泛种植的中草药之一,但根腐病、霜霉病、灰斑病、菌核病、白锈病、黑斑病、白粉病等病害的频繁发生严重影响了其生产。综述了板蓝根主要病害的症状、病原菌、发生规律和防治方法,并对综合防治方法进行了探讨和展望。