猪肝脏基因组DNA提取与纯化的研究

对血液中提取基因组DNA的方法加以改进,获得了一种提取猪肝脏组织中DNA的有效方法。试验表明,利用SDS裂解,氯仿、异戊醇抽提母猪肝脏中基因组DNA,得到了纯度较高的DNA。     

基因组原位杂交辨别芸薹属异源四倍体AA、BB、CC基因组研究

利用基因组原位杂交（GISH）技术，以标记的白菜型油菜（AA，2n=20)的基因组总DNA）为探针，分别同芥菜型油菜（AABB，23n=36）和甘蓝型油菜（AACC，2n=38)的中期染色体和间期核杂交，结果芥菜型油菜有20条染色体表现大而明亮的杂交信号，其它染色体上信号很弱或无，可以区分A、B基因组，甘蓝型油菜染体上表现有38个信号，A、C基因组不能分区分开来。以黑芥（BB,2n=16）的基因组总DNA为探针与埃塞俄比亚芥（BBCC，2n=34）的中期染色体和间期核杂交，16条染色体上显示明显的杂交信号，其它染色体上信号很弱，说明在长期的进化过程中，芸薹属中BB与AA和CC基因组间分化程度较大，而AA与CC基因组分化较小，基因组原位杂交表明最强的信号多集中分布于着丝粒区，本文讨论了这种分布的可能原因。     

春兰基因组DNA提取方法的研究

本文以春兰(Cymbidiumgoeringii(Rchb.f.)Rchb.f.)为研究试材,对植物基因组DNA提取方法中的若干影响因子诸如药品、试剂配制方法、DNA取材部位、蛋白质去除次数、DNA析出时间、提取样品水浴时间等进行了比较分析,试图找出春兰基因组DNA提取的最佳方法。结果表明:采用进口的CTAB提取效果比国产的CTAB要好,特别适用于花药的提取,蛋白质去除效果很好;SDS提取缓冲液配制方法很重要,不同的SDS缓冲液配制方法,其提取效果差异较大。春兰花苞的DNA提取得率较叶片高,但是叶片DNA的纯度则相反,叶片较花苞高。在提取花苞基因组DNA过程中,增加氯仿/异戊醇抽提次数,对去除DNA中蛋白质、多糖及其它杂质有一定的作用,但是对DNA的损失也是很明显的。从实验效果来看,氯仿/异戊醇抽提次数以2次为宜。提取基因组DNA在异丙醇沉淀时,采取挑取絮状沉淀的方法,也可减少蛋白质、多糖等其它杂质的影响,从而提高DNA纯度。无论是叶片还是花苞材料,采用异丙醇沉淀5min,一般析出的以核酸基因组DNA为主,蛋白质为次,核酸析出量在80%以上。继续沉淀(15min)的产物中DNA含量明显较低,而且沉淀的纯度相对不高,因此异丙醇沉淀时间可以缩短到10min之内以提高DNA的纯度。使用CTAB法提取DNA时,水浴时间至少需要30min,过短的水浴时间会造成DNA得率的下降,同时过长的水浴时间,如超过1h,则可能会引起DNA的降解,或者最后产物中增加其他杂质,因此,适宜的水浴时间当为40￣60min。     

香蕉黑星病菌黑色素合成关键酶小柱孢酮脱氢酶基因SCD的克隆与分析

形成黑色素化的附着胞从植物体表面直接侵入寄主是香蕉黑星病菌主要的侵染方式.通过利用Genome Walking方法对香蕉黑星病菌黑色素生物合成关键酶编码基因之一的小柱孢酮脱氢酶基因SCD进行克隆, 得到其序列全长为1696bp.序列测定及软件分析结果表明,该片段包括完整的开放读码框(738bp),其中含有一个长29bp的内含子,编码203个氨基酸.该序列具有典型的启动子结构,在5'端调控序列中发现几个典型的真核生物顺式调控元件TATA motif、CAAT-motif、TGAC -motif、ACTGC -motif等.试验结果为深入研究该基因的功能和结构奠定基础,并为进一步防治该病害提供新的理论依据及手段.     

从50年来在《Science》发表的蚕丝学文献看中国家蚕基因组研究

检索、概括了50年来在《Science》杂志刊登的10篇蚕丝学文献的基本情况和内容,介绍了家蚕基因组框架图在家蚕全基因组序列分析、比较基因组学和丝腺、激素及发育相关基因等功能基因研究方面取得的重要进展,显示了中国家蚕基因组研究对世界蚕业科学的重大贡献。     

Cytogenetic Analysis of the Primary Amphidiploid Derived from Interspecific Hybridization in Cucumis and Its Selfed Progenies

Studies on the reproduction and cytogenetic characterization of a primary amphidiploid Cucumis species C. hytivus Chen and Kirkbride (2n = 4x = 38) indicated that a more comprehensive cytogenetic analysis of this species and its first selfed progeny would increase its potential utility in cucumber improvement. With tendrils used as source materials for mitotic analysis, chromosome numbers in all selfed progenies were 2n = 38, confirming chromosomal stability in this synthetic amphidiploid species. Detailed meiotic processes were described by comparing the primary and the selfed amphidiploids.Meiotic abnormalities, such as chromosome lagging, unequal separation, chromosome multi-polarization and polyads were observed frequently in all amphidiploid plants except for the selfed no.8, in which meiosis was arrested prior to metaphase I. Generally, the frequency of multivalents was higher and the configurations were more complex in the selfed progenies, demonstrating a more extensive genetic exchange between cucumber and C. hystrix Chakr. Genome separation between cucumber and C. hystrix was observed through prophase ! to anaphase I in both generations of the amphidiploids. Consequently, in addition to n = 19, a new gamete with n = 7 was produced, which was confirmed by the chromosome counts 2n = 14 in the backcrossing progenies from cucumber × amphidiploid mating. Fertility varied among the selfed amphidiploid plants. The selfed plant no. 1 was found to have an improved fertility (e.g., pollen staining ability 40.8% and 25.6 seeds per fruit) and then was used as source germplasm in further introgression and gene exchange experiments.     

主要家畜种基因组连锁图现状和展望

对主要家畜种基因组研究中用多态遗传标记,如微卫星标记、RFLP等,制作遗传连锁图现状进行了综述。在过去近半个世纪中,家畜基因组遗传连锁图的研究随着遗传标记技术,特别是DNA 微卫星等多态标记的迅速发展,取得了很大进展。其中主要介绍了主要家畜种牛、猪、绵羊、马和家禽基因组遗传连锁图发展的现状以及将来的发展趋势。     

基因组重排技术在链霉菌育种应用的研究进展

文中介绍了基因组重排技术的原理,并着重介绍了其在链霉菌育种方面的常规方法及主要过程,同时提出了解决一些常规问题的方法.     

启动子捕获技术及其研究进展

启动子捕获技术是一种产生大规模随机插入突变体库的有力手段,对于揭示大量基因序列所对应的基因功能具有重要的应用价值。阐述了启动子捕获技术的基本原理、研究方法及其在分子生物学领域的研究进展。