回流法提取山楂叶悬钩子叶片中黄酮类化合物的工艺研究

[目的]采用加热回流法提取山楂叶悬钩子叶片中黄酮类化合物,筛选最佳提取工艺。[方法]以乙醇作为提取剂,研究了在不同乙醇浓度、料液比、回流温度和回流时间等单因素影响下的黄酮类化合物提取得率,并在单因素试验结果的基础上设计正交试验,筛选最佳工艺条件。[结果]影响黄酮类化合物得率的单因素顺序为料液比〉乙醇浓度〉回流温度〉回流时间。加热回流法提取山楂叶悬钩子叶片中黄酮类化合物的最佳工艺条件为乙醇浓度70%、料液比1∶20（g/ml）、回流温度85℃,回流时间1.5 h,在此条件下黄酮类化合物的得率为9.51%。[结论]加热回流法提取山楂叶悬钩子叶片中黄酮类化合物得率较高,是一种简单可行的提取工艺。     

碱溶酸沉法提取银杏叶总黄酮

[目的]研究银杏叶总黄酮的碱溶酸沉法提取。[方法]采用碱溶酸沉法,对影响银杏叶总黄酮提取的pH值、固液比、提取温度和提取时间等因素进行系统研究。[结果]银杏叶总黄酮碱溶酸沉法的最佳提取工艺条件为:95℃时用40倍量pH值为10.0的NaOH溶液处理60 m in,酸沉pH值3.5,提取2次。[结论]在最佳提取工艺条件下,银杏叶总黄酮的提取率达到86.4%。     

青蒿中黄酮类化合物的提取及其抗氧化性研究

[目的]确定从青蒿中提取黄酮类化合物的优化条件,并研究其抗氧化活性。[方法]用正交试验法确定青蒿中黄酮类化合物提取的最佳方案,测定提取的粗黄酮类化合物的抗氧化活性。[结果]结果表明,青蒿中黄酮类化合物的最佳提取条件为：乙醇的体积分数为90%,提取时间3.0 h,固液比为1 g∶40 ml,提取温度为70℃,在此条件下青蒿中黄酮类化合物的提取率为2.885%。此外,青蒿黄酮类化合物具有明显的抑制脂质过氧化作用,随着猪油中黄酮类化合物添加量的增加,其抗氧化作用逐渐增强。[结论]青蒿中黄酮类化合物具有良好的抗氧化活性,作为天然的抗氧化剂,青蒿黄酮类化合物具有一定的开发利用价值。     

正交试验法优化蕨菜总黄酮的提取工艺

[目的]优化蕨菜[Pteridium aquilinum （Linn.） Kuhn var.latiusculum（Desv.）Underw.exHeller]总黄酮的提取工艺,为蕨菜黄酮类化合物的开发利用提供理论依据。[方法]在单因素试验基础上,以总黄酮得率为考察指标,采用正交试验对影响蕨菜总黄酮提取的因素,乙醇体积分数、沸腾时间、淋洗时间和料液比进行优化。[结果]蕨菜总黄酮最佳提取工艺为：乙醇体积分数60%,沸腾时间2.0 h,淋洗时间1.0 h,料液比1∶30（W/V）。在此优化工艺条件下,蕨菜总黄酮得率达8.80%。蕨菜不同器官中总黄酮含量趋势为：脱脂叶片〉叶片〉脱脂叶柄〉叶柄。[结论]该研究建立的提取蕨菜总黄酮的方法得率高于传统方法,且节省时间、简单易行。     

洋葱查尔酮合成酶基因的分子克隆和表达分析

查尔酮合成酶是类黄酮类物质合成的关键酶。本研究克隆了洋葱的查尔酮合成酶基因AcCHS1和AcCHS2。AcCHS1的ORF序列1182 bp,编码393个氨基酸残基;AcCHS2的ORF序列1 176 bp,编码391个氨基酸残基。在同等条件下,AcCHS2基因的表达明显高于AcCHS1。     

超声波提取酸枣仁总黄酮工艺研究

[目的]探索超声波提取酸枣仁总黄酮的最佳工艺条件。[方法]采用3种提取方法（95℃索氏提取器中浸提提取2h;60℃热回流浸提提取2h;超声提取50min）对酸枣仁总黄酮的提取效果进行分析,确定最佳提取方法。以乙醇浓度、料液比和提取时间为因子进行单因素试验和正交试验,确定超声波提取酸枣仁总黄酮的最佳工艺。[结果]用超声波提取总黄酮的提取率要高于回流提取和浸提法,超声波提取确定为理想的提取方法。影响总黄酮得率的主次因素为料液比〉乙醇浓度〉超声提取时间。超声波提取酸枣仁总黄酮的最佳工艺条件为：70％乙醇,料液比1：30,超声提取50min提取2次,提取率达到98．73％。[结论]采用超声波提取法的研究为酸枣仁总黄酮的工业化生产提供了拳者依据。     

普洱茶中黄酮类化合物提取方法和抗氧化性初步研究

[目的]研究普洱茶中黄酮类化合物的提取方法及其抗氧化性。[方法]采用正交试验,分别用索式提取法、微波法和超声法提取普洱茶中的黄酮类化合物,比较3种方法的提取效率及黄酮类化合物含量,从而得到最佳的工艺方案,并对普洱茶中黄酮类化合物抗氧化性进行研究。[结果]在3种提取方法中,超声波法提取的黄酮类化合物含量最大,为85．91mg／g,其最佳工艺方案为乙醇浓度90％,固液比1：10,超声时间15min,超声频率800W。3种方法的提取物对猪油的抗氧化能力为超声波法〉微波法〉索式提取法。[结论]超声波法是较好的提取方法;普洱茶中黄酮类化合物对猪油具有较强的抗氧化作用,并与黄酮溶液浓度具有剂量效应关系。     

苦菜中总黄酮的提取与含量测定

[目的]研究苦菜中总黄酮的提取方法和总黄酮含量随生长月份、部位的变化关系。[方法]采用正交试验设计提取总黄酮的最佳试验方案。[结果]所选取的3个提取因素的主次关系为,提取溶剂浓度料液比提取时间,最佳提取条件为:乙醇浓度75%,料液比1∶20(g/ml,W/V,下同),提取时间为2 h。苦菜中不同部位总黄酮含量的变化关系为花叶茎根;4月份苦菜的总黄酮含量最高。[结论]试验为合理开发利用苦菜资源提供了一定的理论基础。     

小叶锦鸡儿花和根中黄酮及多酚类的抑菌活性

[目的]分离小叶锦鸡儿花和根中不同极性的黄酮类和多酚类物质,并研究其体外抑菌活性。[方法]将小叶锦鸡儿花和根经超声波辅助提取后进行液-液萃取分离,用琼脂扩散法测定粗提物和不同极性组分的体外抑菌效果,并研究其与黄酮类和多酚类含量的相关性。[结果]小叶锦鸡儿花和根的不同极性组分对枯草芽孢杆菌和镰刀菌有抑制作用,但对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的抑制作用不明显。花的二氯甲烷层对枯草芽孢杆菌和镰刀菌的抑制活性最高,效价分别为176.78和243.97 IU/mg。相关性分析表明,黄酮类和多酚类是小叶锦鸡儿抑制枯草芽孢杆菌和镰刀菌的活性成分。[结论]小叶锦鸡儿花和根中的黄酮类和多酚类物质在开发植物源抗菌食品添加剂、水果保鲜剂和抗菌药物方面具有应用价值和开发前景。     

芸薹属查尔酮异构酶基因家族RNA干扰载体的构建

作为类黄酮途径的第二步关键酶,查尔酮异构酶(chalcone isomerase,CHI)催化四羟基查尔酮成为柚皮素,用于合成各种类黄酮物质,影响多种性状。芸薹属含有多种重要的油料、蔬菜和观赏植物。本研究从甘蓝型油菜克隆了芸薹属CHI基因家族的干扰片段BCHII(761bp),采用NcoⅠ+AatⅡ和BamHⅠ+XbaⅠ双酶切方案分别将其反义片段和正义片段亚克隆到植物RNA干扰(RNAi)平台载体pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成了11674bp的RNAi载体pFGC5941M-BCHII(简称pBCHII),多种PCR检测表明2个片段的插入方向正确,重组载体完整,将其转化根癌农杆菌菌株LBA4404以后获得了工程菌株LBA4404-pBCHII-①。本研究结果将促进研究CHI与芸薹属异花授粉、植株色彩、黄籽和抗逆性等性状的关系和开展相关分子育种。