活性氧对仔猪睾丸支持细胞微丝的影响

为阐明活性氧(ROS)对睾丸支持细胞(SC)的影响,并深入探讨精子发生调节机制,通过体外培养的仔猪睾丸支持细胞研究ROS对SC中微丝结构的影响.利用H2O2模拟细胞内的ROS环境,使用细胞松弛素B(CytB)破坏细胞中的微丝并利用维生素E(VE)抑制细胞内的ROS,通过细胞活性检测、免疫荧光、酶活检测、免疫印迹等方法检测ROS对睾丸支持细胞微丝的影响.结果表明,H2O2和细胞松弛素B均能提高SC内ROS的水平和细胞外信号调节激酶(ERK)的活性,降低抗氧化酶的活性,破坏细胞内微丝的结构和分布,二者具有协同作用,VE能降低ROS对SC的作用.上述证明,H2O2通过不依赖于微丝途径和降低细胞内抗氧化能力使细胞内ROS处于较高水平,并通过ERK级联,使细胞中微丝发生多聚化,破坏微丝的结构.     

成骨细胞与破骨细胞的体外培养

成骨细胞起源于间充质的骨祖细胞,可进行传代培养.破骨细胞来自于CD34+的骨髓造血干细胞,为终末细胞,不能进行传代培养.     

磷酸钙法转染COS7细胞及其表达产物检测

将重组真核细胞表达质粒导入哺乳动物细胞的方法 ,主要有磷酸钙介导法、DEAE-葡萄糖介导法、聚季铵盐法、原生质体融合法、电穿孔法等 [1] ,其中磷酸钙法简便易行 ,是目前真核细胞转染的最常用方法之一。我们用这种方法将外源基因 1 acz、g B转入 COS7细胞中 ,优化不同转染参数 ,并分别以 X-gal染色和荧光染色对转染的效果进行验证。1　材料与方法1 .1　材料　质粒 pc DNA3,p URMDVEg B,p SV- β-gal及大肠杆菌 DH5 α,均为本实验室保存 ;pc D-NA3- lacz和 pc DNA3- g B由作者构建 ;限制性内切酶 Eco RI,Bam HI,T4DNA连接酶…     

法氏囊活性肽BP7调节鸡未成熟B细胞的基因表达谱及功能分析

试验旨在探索法氏囊活性肽BP7调节鸡未成熟B细胞的分子基础.利用BP7刺激禽前B淋巴细胞DT40细胞,采用荧光定量PCR(qPCR)检测IgM的mRNA水平,并采用基因芯片分析基因表达谱及其生物学功能.结果 显示,BP7刺激的DT40细胞产生IgM的mRNA水平明显升高.基因芯片分析发现,BP7处理的DT40细胞中共有...     

奶牛犊牛腹泻源大肠埃希氏菌耐药情况及LEE相关基因的检测

为了明确宁夏地区奶牛犊牛腹泻源性大肠埃希氏菌的分离率、耐药情况和LEE毒力岛eaeA和ler基因的携带情况,采集宁夏5市16个规模化奶牛场1～2月龄犊牛病理性腹泻样本157份,采用微生物学方法培养、VITEK 2 Compact生化鉴定和PCR鉴定,应用PCR方法进行分离株LEE相关基因检测.结果分离鉴定到大肠埃希氏菌...     

日本开发用颜色观察细胞变化新方法

日本大阪府立大学教授杉本宪治最近开发出用红、绿、蓝三种颜色观察活细胞内蛋白质活动的新方法，这对研究未知的蛋白质功能大有帮助。从事生命科学研究的杉本教授分别利用珊瑚的蛋白质、水母的蛋白质以及改良后的水母蛋白质，制成红、绿、蓝三种颜色。     

蜂针真奇妙 患者称神效

蜂针治痔疮、囊肿 ,立杆见影 ,疗效神奇。但是 ,因属新的生物疗法 ,史无前例 ,效果是否可靠 ?我和众友不敢做结论。只得把治案存起来 ,十年后的今天 ,一一对照 ,寻访时 ,他们的回答是“蜂针真奇妙 ,不出门 ,不花钱 ,治疗又彻底 ,比任何药物都强。”1、内痔外痔一扫光1、1外痔。病例 1 :患者杨俊铃 ,女 ,现年三十四岁系汝州市纸坊乡后寨村人 ,素有痔疮 ,不时轻重 ,一九九六年秋因生孩子 ,努力过度 ,小病暴发———痔灶由原来的绿豆大急剧增至花生米样 ,疼痛便血 ,不敢坐。为了减轻排便痛苦 ,不敢饱食 ,因而消瘦不堪。满月后住娘家 ,父母得悉 …     

辣蓼黄酮正丁醇部分体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒的研究

为明确辣蓼黄酮正丁醇部分（n-butanol part of flavonoids from Polygonum hydropiper L.,FNB）体外抗猪繁殖与呼吸综合征病毒（PPRSV）的效果。本研究以Marc-145细胞和PPRSV弱毒疫苗毒株（TJM-F92）为对象,通过CCK-8法检测FNB对细胞的毒性作用,并检测先给药后接毒、先接毒后给药、药物与病毒同时作用这3种方式处理细胞后药物对病毒的抑制率。结果发现,FNB对细胞的最大安全浓度为500 μg/mL,因此,选择25~500 μg/mL浓度范围的FNB进行后续试验。各浓度的FNB处理病毒后,能不同程度的抑制PRRSV在细胞上的增殖,并呈现一定的剂量效应关系,药物的浓度越高,抗病毒效果越好。其中,先接毒后给药、药物与病毒同时作用这两种方式抗PRRSV效果显著,在25~500 μg/mL浓度范围内细胞存活率分别为21.55%~65.23%和24.85%~73.60%。而先给药后接毒,不能有效降低病毒的感染力,在药物最高剂量（500 μg/mL）时细胞存活率仅为7.00%,抗病毒效果不明显。FNB预先作用于Marc-145细胞虽未降低PRRSV感染细胞的能力,即药物对于PRRSV预防作用效果不理想,但是FNB对病毒感染细胞后呈现一定的作用,药物能够通过抑制病毒的合成、释放及直接杀灭病毒,进而能够有效抑制PRRSV在细胞上的增殖。本试验结果不仅为FNB在临床上治疗猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）提供参考依据,而且可以为辣蓼的深度开发和利用提供理论依据。     

绵羊宿营法防除天然草地灌木杂草研究Ⅲ新鲜羊粪尿对土壤和植物细胞形态结构及生理的影响

采用盆栽试验研究了绵羊新鲜粪尿对植物组织水势、细胞膜透性和细胞形态结构的影响。结果表明 ,在土壤含水量 30 %左右 ,植物无水分胁迫的可能时 ,各处理植物组织水势呈先上升后下降的趋势 ,而对照则呈持续上升趋势。说明绵羊新鲜粪尿加入土壤后 ,土壤溶液浓度升高 ,影响了植物水势。绵羊新鲜粪尿对植物生理影响表明 ,叶片细胞膜透性在 UD处理与对照差异显著 (P<0 .0 5) ,U和 D单处理与对照间差异不显著 (P>0 .0 5)。根细胞膜透性 UD和 U处理与对照差异显著 (P<0 .0 5)。D处理与对照无显著差异 (P>0 .0 5)。植物细胞形态结构显示 ,各处理均无质壁分离现象 ,但 U和 UD处理的皮层细胞出现叶绿体 ,这可能是尿中尿素水解释放的游离氨被植物吸收所致     

中国广东家蚕微粒子孢子在Antheraea eucalypti细胞系的感染增殖

将中国广东的Ｎｏｓｅｍａ ｂｏｍｂｙｃｉｓ ＣＧＳ,用０２ｍｏｌ／ＬＫＯＨ 处理后,接种感染Ａ．ｅｕｃａｌｙｐｔｉ 细胞系。孢子的发芽率达８７％ ,在Ａ．ｅｕｃａｌｙｐｔｉ 细胞初期感染率为２７ ％ 。发育各阶段具２ 核,可观察到短极丝孢子和二次感染体形成,孢子芽母细胞按二分裂形成２ 个双核的孢子芽,具典型 Ｎｏｓｅｍａ 属特征。Ｎｏｓｅｍａｂｏｍｂｙｃｉｓ ＣＧＳ 生物学特性、血清学类型与日本Ｎｏｓｅｍａ ｂｏｍｂｙｃｉｓ ＮＩＳ００１ 大致相同,但孢子大小、裂殖体的形态、在Ａ．ｅｕｃａｌｙｐｔｉ 细胞寄生的细胞感染率、每个细胞的产孢数,２ 种微孢子虫却有差异。