南瓜基因CmNAC的克隆与序列分析(英文)

[目的]克隆南瓜基因CmNAC并进行序列分析。[方法]以南瓜叶片为材料,根据甘蓝型油菜NAC1、番茄NAC和辣椒NAC保守结构域设计一对简并引物,采用RT-PCR方法扩增得出长度约为440bp大小的DNA片段,将其克隆至pMDl9-T载体上,对重组克隆进行测序,用BLAST和DNAMAN软件对核酸及氨基酸序列进行分析。[结果]所获得的南瓜NAC基因片段由442个碱基组成,编码147个氨基酸,命名为CmNAC;该基因片段具有其它植物NAC基因中存在的保守区,并且属于NAC家族中ATAF1/2亚家族。[结论]实验拟在南瓜中获得和抗逆性相关的NAC基因,为进一步研究该基因的生物学功能和植物基因工程奠定理论基础。     

柑橘黄龙病侵染相关抗病基因同源序列的克隆鉴定与表达分析

[目的]从黄龙病耐病寄主植物cDNA中筛选抗病基因相关序列并对其进行表达分析研究。[方法]根据已克隆的植物抗性基因表达产物NBS-LRR保守区域设计简并引物,以耐HLB的柑橘属柚cDNA为模板扩增RGAs,并进行实时荧光定量PCR。[结果]通过RFLP分析及克隆测序共得到5个NBS类抗病基因相似序列(RGAs)片段,在GenBank上登录号为HM777043～HM777047。通过Clustalx、DNAMAN等软件分析5个RGAs及其推导的氨基酸的相似性,结果显示它们均含有典型NBS-LRR类抗性基因所具有的保守区域:P-loop、Kinase-2a、GL-PLAL,其与已克隆的烟草N、亚麻L6、拟南芥RPS2、RPS5、RPP8、RPM1等抗病基因在保守区域氨基酸水平上的相似性为19.71%～42.86%。根据得到的序列设计特异性引物,对5个RGAs在HLB侵染过程中的表达进行定量PCR,结果显示嫁接病芽接穗后的8次连续采样中5个RGA的表达受到不同程度的调控。[结论]表明5个RGAs可能与黄龙病的侵染有关。     

巨型艾美球虫gam56基因的截短原核表达及其产物的免疫保护效果

为评价gain56基因重组表达产物作为亚单位疫苗预防鸡巨型艾美球虫(E.maxima),感染的效果,以E.maxima NT株配子体总RNA为模板,RT.PCR扩增和克隆gain56基因,选择该基因两段丰富抗原表位的编码区片段.利用原核表达载体pGEX-6P-1在大肠杆菌中进行截短表达.以可溶性的GST-gain56-2融合蛋白为免疫原,设立高、中、低(1.0 mg、0.5 mg、0.25 mg)3个剂量,单独或使用弗氏完全佐剂,于5 d、12 d和19 d对雏鸡进行3次免疫,26 d用5 ×10~4个E.maxima孢子化卵囊进行攻虫,8 d后迫杀,对各组的存活率、相对增重率、卵囊减少率、ACI等指标进行统计分析.结果显示:就相对增重率而言各免疫组比未免疫攻毒组的高27.6%以上,而各免疫组之间差异不显著(p>0.05);就卵囊减少率指标而言,各免疫组较未免疫攻毒组均有不同程度减少,但是均小于75%;就ACI指标而言,各免疫组较未免疫攻毒组均有不同程度增加,以中剂量蛋白佐剂组为最高.GST-gam56-2融合蛋白对于E.maxima感染具有一定的免疫保护效力.     

巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)地理株研究Ⅰ.11株巨型艾美耳球虫的分离与基本特征

采用单卵囊分离技术，从江苏、安徽、山东、广东、福建和上海等省(市)10个地区的鸡场及美国的球虫病疫苗中获得了11株纯种球虫。根据下列特征：(1)卵囊的大小、形态和颜色；(2)孢子囊的大小和形态；(3)形状指数(卵囊长宽之比)；(4)虫体肠道中的寄生区；(5)肉眼病变的性质；(6)最早孢子发育时间；(7)最短的潜在期，对这11株纯种球虫作了鉴定。结果表明，11株纯种球虫均为巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima Tyzzer，1929)地理株。应用SPSS软件系统，对各株进行描述性统计和方差分析，结果显示，11株间存在不同程度的差异，而美国株与国内各株均有显著差异。     

南瓜种质资源遗传多样性的RAPD分析

 应用RAPD技术对70份南瓜种质进行遗传多样性分析, 从100条随机引物中筛选出21条引物, 共扩增出168条带, 其中157条为多态带, 比率为93.5%。系统聚类分析将70份南瓜种质分为3大类: 中国南瓜、美洲南瓜、印度南瓜, 与传统分类学的结果相符。同时在3大类群内又将种质进行细分,第1类分为3组, 第2类分为6组, 第3类分为5组, 其结果与地域来源和形态特征有一定的相关性。主成分分析与系统聚类分析结果基本一致, 但系统聚类分析在揭示密切相关的个体间的关系上能提供更丰富的信息。     

Studies on the phloroglucinol–HCl reactive material produced by squash fruit elicited with pectinase: Isolation using hydrolytic enzymes and release of p -coumaryl aldehyde by water reflux

Pathological tissues from a variety of plants turn red when treated with the histochemical reagent phloroglucinol (PG)–HCl. This induced PG–HCl reacting material has been termed both wound gum and, more recently, induced lignin or lignin-like material. We are exploring alternative approaches to better identify this induced material. In this report, we describe methods for purifying the PG–HCl reactive material from solvent-washed tissue preparations and measuring the amount of p -coumaryl aldehyde released from the purified material by boiling in water. Acorn squash fruit wall tissue was sliced, sprayed with pectinase to elicit the formation of PG–HCl reactive material and incubated up to 72 h at 27°C. Sampled tissue was washed extensively with water and organic solvents. Insoluble residues were treated with cell wall degrading enzymes to remove cell wall materials, and dimethyl sulfoxide was used to dissolve starch. Yields of residual material increased from 7.5% in the time zero samples to 29.7% after 72 h. Refluxing the purified material in water released <6 μ g p -coumaryl aldehyde g⁻¹ from preparations of tissue at time zero and 8100 μ g p -coumaryl aldehyde g⁻¹ from samples incubated for 48 h. These results suggest that the function of the material is to sequester phytoalexins, but are not consistent with the material being lignin. Published by Elsevier Science Ltd.     

旱地油瓜生长节律的研究

观测旱地油瓜（cucurbita foetialissma）的形态特征、物候期、生长节律、开花结果习性,结果表明：与原产地比较旱地油瓜在太原地区生长良好,主枝蔓、侧枝、叶片及根系,都生长正常;旱地油瓜有较好的水保效果和开花结实能力,果实品质较好,有一定的经济价值。     

柑橘黄龙病对沙田柚树体特性和果实品质的影响

柑橘黄龙病（Citrus Huanglongbing,简称HLB）是柑橘的毁灭性病害,柑橘感染后不仅导致叶片黄化,影响果实品质,而且会使树势减弱直至植株死亡。本研究以感染黄龙病和健康沙田柚[Citrus maxima (Burm.) Merr. cv. Shatian Yu]为材料,对比分析黄龙病树（HLB⁺）和健康树（HLB^-）在叶片形态特征、果实品质、矿质元素等方面的差异,旨在掌握黄龙病对沙田柚树体和果实的影响,为促进柑橘黄龙病的防控提供理论参考。沙田柚黄龙病植株与健康植株相比,叶片面积减少28.13%,叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素分别降低40.38%、44.00%和40.47%;果实外观着色异常且果实偏小,平均单果重下降45.62%,果皮变薄,种子败育增多,果实维生素C升高26.44%,达到显著水平,并且不同组织的多个元素发生显著变化。与健康植株相比,黄龙病叶片N和Ca元素分别减少19.00%和49.72%,果肉N元素减少18.00%,而果皮和果肉Ca元素显著升高;病树根、叶片、果皮和果肉S元素均显著低于健康树。病树叶片B和Cu元素分别降低了35.07%和54.45%,果皮Cu元素显著降低了42.96%,果肉Zn元素显著升高了41.30%。黄龙病严重影响了沙田柚叶片形态和果实品质以及矿质元素代谢,应高度重视提高沙田柚果园的黄龙病防控管理水平。     

西葫芦PRSV-W病毒病抗病种质鉴定及抗性遗传分析

番木瓜环斑病毒西瓜株系(PRSV-W)是危害西葫芦生产的主要病害之一,为减少产量损失,加快西葫芦抗病品种的选育,本研究拟通过人工苗期子叶摩擦接种,结合酶联免疫吸附测定法(ELISA)及反转录PCR(RT-PCR)检测分析,建立西葫芦PRSV-W抗性鉴定技术,并对148份西葫芦品种及高代自交系育种材料进行抗性评价,同时利...     

籽用和肉用印度南瓜果实发育过程中淀粉合成途径相关基因的表达分析

以籽用印度南瓜自交系98-2 及肉用印度南瓜自交系312-1 为试材,对印度南瓜果实淀粉含量及淀粉代谢相关基因的表达模式进行研究。结果表明：312-1 和98-2 果实中的总淀粉和支链淀粉积累模式存在明显差异,312-1 中总淀粉和支链淀粉积累模式相似,都是随着果实发育逐渐积累,在授粉后40 d 时达到高峰,随后略有下降,而98-2 中总淀粉和支链淀粉含量一直维持在果实发育初期（授粉后5 d）水平,没有显著积累的过程;在果实发育的各个时期312-1 中总淀粉和支链淀粉含量均极显著高于98-2。2 份材料中直链淀粉的积累模式大致相同,都维持在果实发育初期的积累水平,但在果实发育的各个时期312-1 中直链淀粉含量均显著或极显著高于98-2。在淀粉组成上,2 份材料均是以支链淀粉为主。淀粉合成途径关键酶基因除ISAⅢ、SSSⅡ和SBEⅡ基因外,GPT、AATP、PGM、AGPaseL、GBSSⅠ、SSSⅢ和SBEⅠ基因在2 份材料果实发育过程中的表达趋势相似,其表达量在2 份材料中存在较大差异,结合2 份材料果实中直链淀粉和支链淀粉含量,推测GPT、AATP、AGPaseL、GBSSⅠ、SSSⅡ、SSSⅢ、SBEⅠ和SBEⅡ基因是调控印度南瓜果实中淀粉积累的关键酶基因。