重组胸腺肽α1在大肠杆菌中的表达与免疫活性检测

根据大肠杆菌密码子偏嗜性修改、合成胸腺肽alpha 1（Tα1）基因并连接到pET32α（＋）中构建融合表达载体pET32α-Tα1,转化大肠杆菌BL21（DE3）,IPTG诱导,经15%SDS-PAGE检测,Tα1获得可溶性表达。将诱导表达菌高压均质破碎后进行亲和层析纯化,洗脱蛋白峰经脱盐处理后进行免疫活性测定。通过脾淋巴细胞转化试验测定纯化重组Tα1和人用Tα1的活性,结果显示,重组表达的Tα1具有明显的促进淋巴细胞增殖的活性;脱E受体法E玫瑰花环试验测定结果显示,制备的重组Tα1的E玫瑰花结百分率高于空白对照组14.3%以上（胸腺肽溶液的质量标准为提高10%）,能够明显增强T细胞的活性。     

赖氨酸二肽对奶牛乳腺mTOR信号通路元件基因表达的影响

为研究赖氨酸二肽对奶牛乳腺组织中哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路的影响,在体外培养的奶牛乳腺组织培养液中分别添加赖氨酸—赖氨酸、赖氨酸—亮氨酸和赖氨酸—组氨酸二肽,等量取代培养液中φ=5%、5%和15%的游离赖氨酸(赖氨酸总质量浓度为210 mg/L);在此基础上,在赖氨酸组和赖氨酸—赖氨酸二肽5%取代组分别添加终浓度为0和100 nmol/L的mTOR抑制剂雷帕霉素。试验结束后收集乳腺组织用于αs1酪蛋白、mTOR、4E-BP1和S6K1的基因表达检测。结果发现,与游离氨基酸相比,添加3种赖氨酸二肽显著增加αs1酪蛋白、mTOR、4E-BP1和S6K1基因的表达;添加雷帕霉素抑制上述基因的表达,赖氨酸—赖氨酸二肽可以降低雷帕霉素的抑制作用。结果表明,除作为合成底物外,赖氨酸二肽还可能通过调控mTOR信号通路促进乳蛋白的合成。