绿色木霉Fn10-1纤维素酶的分离纯化及酶学特性测定

试验研究了绿色木霉Fn10-1纤维素酶的初步纯化及酶学性质开展研究。结果表明,该纤维素酶的最适催化温度为70℃,最适pH 7.6,在温度为4~50℃下均能保持较稳定的酶活,高于50℃以后,热稳定性变差,酶活力开始急剧下降。pH在5.6~7.6时该酶有较好的稳定性。Na+、Mn2+、Fe2+、Mg2+、Co2+、Ca2+、Ba2+、Al3+对纤维素酶具有一定的激活作用,Ag+、Fe3+、Cu2+、Zn2+、K+对该酶有一定的抑制作用,其中Cu2+的抑制作用尤为明显。     

ELISA和胶体金法在猪瘟病毒检测中的应用

为探讨胶体金检测技术和ELISA在猪瘟病毒检测中的应用,通过对西藏林芝地区某县采集的92个疑似猪瘟样品进行免疫胶体金免疫层析法与ELISA法检测猪瘟抗体和抗原,比较两法检测结果的符合率。结果表明,猪瘟胶体金法抗原和抗体检测阳性符合率为100%,ELISA法检测的阳性符合率为95%以上。猪瘟的胶体金法抗原和抗体检测阳性符合率较高,同时该结果与ELISA的抗原和抗体检测阳性符合率高,说明使用猪瘟疫苗进行免疫在西藏林芝地区某县可以取得95%以上的免疫效果。这两种方法操作方便、快速,适合于临床快速检测和疫病普查中高通量样品的筛查。     

干旱胁迫下杠柳种子萌发期保护酶活性及丙二醛含量变化

用含有5种不同质量分数PEG-6000的1/2 Hoagland溶液模拟干旱胁迫,研究杠柳种子萌发期的过氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量的变化。结果表明,随着干旱胁迫程度的增加,POD活性整体呈现增长趋势,说明低质量分数PEG能够刺激诱导自由基清除系统中POD活性的增加;MDA含量随PEG质量分数的升高而增长,说明干旱胁迫程度增加使种子内活性氧的量增加,膜质过氧化程度随之增加,产物MDA含量升高;在PEG质量分数为25%时,POD活性降低,MDA含量明显增加,说明干旱胁迫增加到一定程度时,POD活性会受到抑制,活性氧的量增加,膜的受损程度增加。     

马链球菌兽疫亚种烯醇化酶对小鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

旨在研究马链球菌兽疫亚种（Streptococcus equi ssp.zooepidemicus，SEZ）烯醇化酶（enolase，Eno）对小鼠肺泡巨噬细胞（RAW264.7）吞噬能力的影响。通过构建原核表达质粒获得重组烯醇化酶（rEno），采用台盼蓝活细胞计数法，判定在不同处理浓度和时间下rEno蛋白对RAW264.7细胞的细胞毒性。将rEno蛋白与RAW264.7细胞共孵育后，用SEZ作用于细胞并检测细胞吞菌数量，判断RAW264.7细胞对SEZ的吞噬活性。进一步通过活细胞稳定同位素标记技术（SILAC）和蛋白质谱分析技术（LC-MS/MS），筛选到RAW264.7细胞中可能与SEZ Eno存在相互作用的候选蛋白。结果发现，10 μg·mL^-1 rEno蛋白处理对RAW264.7细胞有明显的细胞毒性，且10 μg·mL^-1 rEno蛋白处理RAW264.7细胞2和4 h可显著抑制其对SEZ的吞噬作用（P<0.01、P<0.05）。初步筛选到RAW264.7细胞中动力蛋白激活蛋白亚单位蛋白（dynactin subunit protein 2，Dctn）、整合素α-M蛋白（integrin alpha-M）等17种可能与Eno发生互作的蛋白。本研究获得了rEno重组表达蛋白，发现rEno可减少RAW264.7细胞对SEZ的吞噬，互作蛋白的初步筛选也为进一步揭示Eno在SEZ抗吞噬中的作用机制奠定了基础。     

解读酶联免疫（ELISA）法测定食品中玉米赤霉烯酮的影响因素

以酶联免疫（ELISA）法测定食品中玉米赤霉烯酮为例，通过对标本采集及其处理、测量前的物品准备、操作过程的影响因素、判读结果的分析等环节中注意事项的描述及分析，减少人为因素对实验的影响，提高检测的准确度。该文中部分内容在酶联免疫（ELISA）法测定食品中真菌毒素时是通用的，在食品卫生检测中会经常用到。     

海洋真菌BH0531代谢产物对感染根结线虫黄瓜保护酶的影响

枝顶孢霉(Acremonium sp.)BH0531已被证实是一株对根结线虫具有较好防治效果的海洋真菌。为探究其对根结线虫和黄瓜的作用机制,以根结线虫侵染后的黄瓜为材料,在土壤中分别加入质量浓度为5、10、20、40 mg·m L~(-1)的BH0531发酵液40 m L,用等量清水作对照,测定了丙二醛、脯氨酸含量以及保护酶SOD、POD、CAT、PAL、PPO的比活力。结果表明,接种根结线虫30 d后,黄瓜叶片丙二醛和脯氨酸含量增加,发酵滤液能够显著降低其含量,能够有效缓解根结线虫对黄瓜植株造成的危害。SOD比活力显著提高,能够抵御活性氧带来的伤害;防御酶活力随时间动态变化,先升高后降低,POD、CAT、PAL和PPO比活力与未受根结线虫感染组对比均降低,但施用发酵液时,酶活力均显著提高,能够有效增强植株的抗性。     

NaCl和Na_2SO_4胁迫对大青山碱蓬幼苗保护酶活性的影响

以大青山碱蓬幼苗为试材,研究了NaCl和Na2SO4盐胁迫对大青山碱蓬幼苗含水量和保护酶活性的影响。结果表明,NaCl胁迫能促进大青山碱蓬幼苗含水量的增加,而Na2SO4胁迫则抑制其增加;NaCl和Na2SO4胁迫对大青山碱蓬幼苗中保护酶影响较大。盐分浓度较低时,为了抵抗盐分对植物造成的伤害,碱蓬体内的保护酶活性增加,但其保护酶系统的调节能力有限,当盐分浓度较高时,保护酶活性升高不足以弥补膜、脂过氧化所引起的伤害,酶活性下降,且在NaCl浓度为或Na2SO4浓度为150mmol·L-1时,保护酶活性达到极限。     

Wx^mp基因背景下可溶性淀粉合成酶基因SSⅡa和去分支酶基因PUL对水稻蒸煮食味品质的影响

【目的】分析在同一主效基因(Wx^mp)背景下可溶性淀粉合成酶基因SSⅡa和去分支酶基因PUL对稻米蒸煮食味品质的影响,以期为水稻品质遗传改良提供依据。【方法】选择在SSⅡa和PUL存在多态性而其他淀粉合成酶相关基因没有多态性的半糯品系宁0145和粳稻品种武运粳21进行杂交,获得F2群体与F3株系。利用分子标记,选择含有Wx^mp基因的F2单株与F3株系,将这些F2单株与F3株系分成SSⅡa^nPUL^n、SSⅡa^nPUL^w、SSⅡa^wPUL^n和SSⅡa^wPUL^w4种基因型(n和w分别表示该基因来源于宁0145和武运粳21),分析不同基因型蒸煮食味品质性状的差异,探讨同一Wxmp基因背景下不同SSⅡa和PUL等位基因对蒸煮食味品质性状的影响。【结果】不同基因型间蒸煮食味品质性状均存在显著差异,来源于武运粳21的SSⅡa^w基因和PUL^w基因分别使直链淀粉含量增加0.29%~1.00%和0.62%~1.18%,且PUL的效应大于SSⅡa,两者间存在互作效应。SSⅡa^w基因和PUL^w基因降低胶稠度和崩解值,提高了热浆黏度、冷胶黏度、消减值和回复值,对糊化温度、峰值黏度和峰值时间的作用较小。【结论】明确了Wx^mp背景下SSⅡa和PUL基因对稻米蒸煮食味品质的遗传效应,该研究结果为SSⅡa和PUL基因的分子标记辅助选择改良稻米品质提供了理论依据。