出血性大肠杆菌O157eae-stx1/2B融合基因的构建和表达

构建表达eae和stx1／2B的融合基因，克隆eae基因的C端280个氨基酸残基(Int280)基因部分，以正确地阅读框定向插入到含有stx1／2B融合基因的质粒，构建重组质粒，将其转化于BL21(DE3)，用IPTG进行诱导表达，经SDS—PAGE电泳检测，该融合蛋白获得了高效表达。薄层扫描分析表明：目的蛋白表达量占菌体总蛋白含量的50．67％。由于该融合蛋白由eae、stx1B、stx2B等三部分抗原组成，可刺激机体产生针对紧密素和StxB的抗体，在EHEC O157亚单位疫苗设计或单克隆抗体抗制备中具有重要价值。     

基于线粒体基因标记的太平洋褶柔鱼群体遗传结构及变异分析

为科学管理和开发利用太平洋褶柔鱼（Todarodes pacificus）渔业资源,该研究利用线粒体DNA（mtDNA）细胞色素C氧化酶I（CO I）和细胞色素b（Cytb）两种标记基因对西北太平洋褶柔鱼进行群体遗传结构和变异分析。结果显示：得到太平洋褶柔鱼两种基因片段的序列长度分别为465 bp（CO I）和404 bp（Cytb）,分别定义了18和21个单倍型,总体呈现低单倍型多样性（h=0.493、0.479）和低核苷酸多样性（π=0.0013、0.0014）;遗传分化系数（Fst）值均为负值,而分子生物学方差（AMOVA）分析结果表明该群体变异都来源于种内;太平洋褶柔鱼CO I基因序列的Tajima’s D和Fu’s Fs的中性检验D值和Fs值显著偏离0,且二者显著性检验P＜0.01,与Cytb基因标记的群体结果相似。综上,位于东海和日本海海域的太平洋褶柔鱼种群遗传多样性较低,群体间基因交流频繁未出现遗传分化,且变异基本来源于种内,群体大约在1.2万-1.5万年前出现过种群扩张。故建议将太平洋褶柔鱼划分为一个管理单元,以便该渔业资源更加合理的保护与开发利用。     

鸭IFN-β启动子及其NF-κB结合位点荧光素酶报告质粒的构建与活性检测

通过PCR方法,扩增得到鸭I型干扰素β(IFN-β)基因启动子功能区域的DNA片段和其4个重复NF-κB结合位点的DNA片段,亚克隆到含萤火虫荧光素酶报告基因pGL4.2-basic载体上,构建了包含鸭IFN-β启动子及其NF-κB结合位点的荧光素酶报告质粒pduIFN-β-luc和4×NF-κB-luc;分别将构建的两个报告质粒与海肾荧光素酶内参质粒pRL-TK用JetPEITM转染试剂共转染至鸭胚成纤维细胞系DEF,在转染24 h后,用poly(I∶C)刺激转染细胞,结果表明,与未刺激组相比,刺激组的荧光素酶活性均显著增加。为进一步研究鸭天然免疫信号通路提供了重要的研究工具。     

复合维生素对文昌鸡肉品质及抗氧化能力的影响

试验旨在研究维生素C和维生素E组成的复合维生素对110~140日龄文昌鸡肉品质和抗氧化能力的影响。试验选取360只110日龄体重一致的文昌母鸡,随机分成2组,每组6个重复,每个重复30只母鸡。试验期30 d。对照组文昌鸡饲喂基础日粮,试验组文昌鸡在基础日粮中添加复合维生素(80 mg/kg VE、200 mg/kg VC)。结果显示,试验组文昌鸡生长性能无显著变化(P>0.05)。与对照组相比,复合维生素使文昌鸡胸肌剪切力和胸肌45 min的红度值(a^(*))显著降低(P<0.05),胸肌宰后24 h的pH值、胸肌宰后45 min、24 h的亮度值(L^(*))显著升高(P<0.05)。与对照组相比,复合维生素使文昌鸡宰后24、120 h胸肌丙二醛(MDA)含量和宰后45 min胸肌总挥发性盐基氮(TVBN)含量显著降低(P<0.05)。研究表明,试验所用复合维生素可以提高文昌鸡机体抗氧化能力,改善肉品质。     

猕猴桃GalUR表达与抗坏血酸积累的关系

 通过RT-PCR从美味猕猴桃（Actinidia deliciosa）果实中克隆了D–半乳糖醛酸还原酶（GalUR）全长 cDNA序列,并分析其序列特征,进行原核表达,制备特异抗体,分析其mRNA及蛋白表达水平与果实发育过程及不同组织中抗坏血酸（AsA）合成和积累的关系。结果表明：克隆的GalUR cDNA（GenBank登录号为GU339035）包含的最大开放阅读框（open reading frame,ORF）为990 bp,编码329个氨基酸残基,预测分子量为37 kD,与报道的草莓等其他植物GalUR具有较高的相似性。构建的pET-32a（＋）-GalUR载体在大肠杆菌BL21（E. coli BL21）中异源表达后,获得了主要以包涵体存在约58 kD的融合蛋白GalUR-His（His约21 kD）。以该蛋白制备抗体,与重组蛋白的Western杂交表明该抗体能与GalUR蛋白发生特异反应。对猕猴桃可溶性蛋白杂交显示,猕猴桃体内GalUR蛋白的分子量约37 kD。在猕猴桃不同组织和发育过程中,GalUR表达水平与AsA含量表现为高度一致,但前体饲喂发现,与L–半乳糖相比,D–半乳糖醛酸并不能有效促进猕猴桃AsA的合成。这些结果表明以单体形式存在的GalUR与猕猴桃AsA合成有着密切关系,但它可能并不是猕猴桃AsA积累的主要调控环节。     

Heymann肾炎发病机制的研究现状

本文对Heymann肾炎发病机制中的致病性抗原、补体活化及调节和足细胞特异蛋白的改变的研究现状进行了综述。     

医用点滴滴速监测和告警系统的设计

为确保医疗工作中不同类型患者点滴输液的安全,设计一种基于单片机AT89C51的红外监测系统和网络通信系统。本文阐述了该系统的硬件组成、工作原理和软件设计。该系统可以实现对医用输液状况的实时网络化监测和声音告警,主从通信程序中增加的定时程序可避免从机关闭或不能正常通信时出现死循环。实验测试结果表明该系统网络通信和声音告警性能较好、操作简便,误差范围为(0.96±0.17)%滴/min。     

太行山南麓核桃-菘蓝/决明复合系统种间水分关系

[目的]旨在通过研究不同果药复合模式的种间水分竞争/互惠关系,为太行山南麓低丘山区高效果农复合模式筛选提供理论依据.[方法]采用稳定碳同位素方法,结合热扩散探针等技术,研究核桃-菘蓝/决明复合系统的水分利用效率(WUE)、耗水量和土壤含水量等,以期量化其种间水分关系.[结果]复合系统的土壤含水量比单作核桃和单作作物地块...     

反相高效液相色谱法测定饲料中三聚氰胺的含量

三聚氰胺（Melamine）,别名又称蜜胺、氰尿酰胺、三聚氰酰胺,一种重要的氮杂环有机化工原料。为纯白色单斜晶体,分子式为C3N6H6,结构式如图1。比重1．573（14℃）,熔点354℃,沸点升华。能溶于甲醛、乙酸、热乙二醇、甘吡啶,微溶于水及醇,不溶于醚、苯和四氯化碳,与盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、草酸等都能形成盐。