水稻几丁质酶的表达及其酶学基本性质

利用甲醇诱导重组Pichia pastoris在发酵罐中表达几丁质酶,在发酵过程中根据溶氧变化控制甲醇流加速度.结果显示,蛋白表达量随菌体密度的增加而增加,酶活最高达56 U/ml.该几丁质酶具有良好的耐热性和pH适应性,在pH 2.0和pH 5.0有2个最适反应pH;在pH 3.0稳定性最好;40 ℃为其最适反应温度;在60 ℃保温3 h仍保持81%的酶活性;该几丁质酶对病原菌生长有一定程度抑制作用.     

牙鲆Mx基因在毕氏酵母中的表达

以牙鲆为材料,通过RT-PCR扩增得到其Mx基因的cDNA序列,构建pPIC9K-Mx表达载体,并在毕氏酵母中实现了牙鲆Mx蛋白的真核表达,为进一步研究牙鲆Mx蛋白的抗病毒机制打下了良好的基础。     

灵芝多糖提取--水浸提条件的研究

为确定灵芝多糖的提取条件,以苯酚-硫酸法作为灵芝多糖的测定方法,对浸提过程中的温度、时间以及固液比3个因素进行了单因素试验和正交试验.结果表明,灵芝多糖的最佳提取条件为浸提温度90 ℃,浸提时间2.0 h,料液比115;浸提温度对多糖提取率的影响最大,其次为浸提固液比和浸提时间.     

白灵侧耳子实体多糖抗肿瘤活性研究

从白灵侧耳子实体中提取多糖，研究其体内抗肿瘤活性。结果显示：用0．2g/kg、0．4g/kg、0．8g/kg三个剂量组对荷S—180实体瘤的昆明小鼠进行灌胃，对肿瘤的抑制率分别为65．4％、68．7％和50．1％，同时能明显提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数，表明白灵侧耳子实体多糖是一种具有开发前途的抗肿瘤活性多糖。     

2种多糖对鲤鱼离体培养免疫细胞活性的影响

采用Percoll密度离心等技术,对鲤鱼的头肾巨噬细胞和外周血白细胞进行分离纯化,并离体培养。体外暴露不同浓度的黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)和香菇多糖(Lentinan,LNT)后,分别采用MTT(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide)法测定它们对鲤鱼外周血白细胞增殖的影响;NBT(nitroblue tetrazolium)还原法和Griess试剂显色法测定对头肾巨噬细胞的呼吸暴发的影响。结果显示,香菇多糖能显著诱导巨噬细胞的氧暴发活性,黄芪多糖则没有显著的诱导作用;香菇多糖低浓度时对细胞的氮呼吸暴发活性无显著影响,黄芪多糖能显著诱导氮呼吸暴发活性,随着两者作用浓度的增加均表现为高浓度抑制作用;香菇多糖和黄芪多糖都能显著促进鲤鱼外周血淋巴细胞的增殖。结果表明黄芪多糖和香菇多糖对离体培养鲤鱼免疫细胞有明显活性作用,对鲤鱼非特异性免疫和特异性免疫具有促进作用,是有潜力的鱼用免疫增强剂。     

南阳酵母原生质体制备与再生条件研究

研究南阳酵母原生质体形成与再生的最佳条件。获取原生质体采用酶法,再生采用双层高渗平板法,因素重要性分析采用正交试验。结果表明:菌龄10h,以2.0%蜗牛酶加0.5%纤维素酶的混合酶液进行酶解破壁,酶解温度30℃,酶解时间2.5h,以0.6mol.L-1蔗糖做再生培养基的渗透压稳定剂,原生质体形成率91.40%,再生率10.56%。不进行预处理,在试验条件下,对南阳酵母原生质体形成与再生影响因素依次为:菌龄>酶解时间>酶浓度>渗稳剂。     

固定化酵母锥形罐式生物反应器发酵生产啤酒的研究

固定化酵母锥形罐式生物反应器是依照罐式生产啤酒而设计的一种生物反应器。用于快速完成啤酒生产的主发酵过程,可使啤酒主发酵时间从原工艺的8d缩短为30h,啤酒生产周期缩短一半以上,同时,生产的啤酒质量达到大罐发酵啤洒水平。     

干旱胁迫条件下细菌多糖对玉米苗期抗旱性的影响

[目的]探究干旱胁迫条件下细菌多糖对玉米苗期抗旱性的影响。[方法]设置种子+土壤、菌液包衣种子+土壤、种子+土壤+80 ml发酵液、种子+土壤+80 ml灭活发酵液4个处理,研究不同处理对玉米苗期抗旱性的影响。[结果]玉米种子经发酵液包衣后,种子发芽率较对照可提高112.7%;对发酵液不同施用方式效果的研究表明,土壤中添加活菌液的方式对提高玉米苗期抗旱能力作用最为显著,幼苗干物质积累量、叶片中叶绿素含量、根冠比、根体积等生长指标均有显著提高,分别较对照提高130.6%、11.5%、78.1%、300.0%。[结论]该研究为有效发挥细菌多糖保水抗旱功能、开发农作物抗旱节水的新方法提供了一定的研究基础。     

啤酒酿造过程中废弃物的综合利用

啤酒酿制过程中的废弃物主要是啤酒糟和废酵母,其具有多种营养成分并易于提取,在食品工业、饲料工业和制药工业中有广泛应用.啤酒废弃物可以用于生产酵母浸膏、营养调味品、胞壁多糖、面包饼干等营养食品;在饲料工业上可以作为鱼虾饲料,生产发酵饲料及粗酶制剂;在医药上可作为提取SOD、FDP、RNA、葡聚糖及制取酒花素和复合磷酸酯酶等物质的好材料.啤酒废弃物的回收利用具有非常广阔的应用前景,具有较好的社会效益和经济效益.     

酵母穿梭表达质粒pGBKT7-hCK2α＇的构建

目的：用人蛋白激酶CK2α’(hCK2α’)cDNA片段构建酵母双杂交体系中“诱饵”载体。方法；通过PCR扩增已构建成功的重组质粒pThCKA’获得人CK2α’亚基编码区cDNA，将PstⅠ／NdeⅠ双酶切的PCR产物连接到同样酶切的“诱饵”载体pGBKT7，转化感受态细胞DH5α获得转化子．琼脂糖凝胶电泳初步筛选转化子，将阳性克隆进行限制性内切酶酶切与DNA测序的方法鉴定。将DNA测序验证的pGBKT7-hCK2α’转染感受态酵母株AH109．Westernblot签定hCK2α’蛋白表达．检测表达产物对报道基因的激活作用及对酵母株AH109的毒性。结果：限制性酶切结果表明，插入片段和重组质粒的大小与理论值推测值相符。重组质粒pGBKT7-hCK2α’转染的酵母株AH109中能够表达hCK2α’蛋白，pGBKT7-hCK2α’无自主激活报道基因的能力及对酵母的生长无毒性。结论：pGBKT7-hCK2α’酵母双杂“诱饵”载体构建获得成功，可应用于酵母双杂交体系。