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应用RT-PCR技术,参照GenBank报道的预测序列,从鸡多形核白细胞(PMN)mRNA中扩增出杀菌/通透性增加蛋白(BPI) 氨基端95个氨基酸的基因片段,并与pMD18-T连接,构建BPI氨基端的基因重组体,进行酶切鉴定和序列测定.结果表明,获得了BPI N端长度为284 bp的基因片段,序列分析证实该片段中有3个点突变,但均不在活性中心. 相似文献
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为了观察孢子在模拟昆虫中肠环境的变化,先配制不同组分的中肠模拟消化酶液(均为0.5%),将稳定表达绿色荧光蛋白菌株的分生孢子悬浮其中,25 ℃或35 ℃恒温孵育4 h后,分别采用流式细胞仪和扫描电子显微镜检测孢子荧光强度和孢子壁形态的变化.孢子荧光强度的改变可以反映酶液对孢子壁消解的程度.结果显示,5种模拟消化液导致荧光强度显著上升,分别为蛋白酶K、链霉蛋白酶E、纤维素酶、胰蛋白酶和α-淀粉酶,但昆布多糖酶、葡萄糖苷酶、蜗牛酶模拟消化液导致荧光强度下降.与单因素模拟消化液相比,复合酶类模拟消化液作用后的荧光强度大幅下降.在pH 5~11范围内,复合酶类模拟消化液处理后的分生孢子荧光强度变化情况差异显著.扫描电子显微镜观察到分生孢子经昆虫模拟消化液处理后孢壁表面结构发生明显变化.这意味着昆虫中肠消化液可能影响球孢白僵菌分生孢子壁结构及其侵染功能. 相似文献
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饲料氧化鱼油引起草鱼肠道黏膜结构屏障损伤 总被引:2,自引:1,他引:2
为了研究饲料氧化鱼油对草鱼肠道屏障结构和肠道通透性的影响。(实验目的)以豆油、鱼油、氧化鱼油作为饲料脂肪源,分别设计鱼油组(6F)、豆油组(6S)、2%氧化鱼油(2OF)、4%氧化鱼油(4OF)及6%氧化鱼油(6OF)5组等氮、等能半纯化饲料,在池塘网箱养殖草鱼(平均体重74.8士1.2)72d。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)的方法,测定了草鱼肠道紧密连接蛋白中闭锁蛋白Occludin,闭合蛋白Claudin3、Claudin15a和胞浆蛋白ZO-1、ZO-2、ZO-3的基因表达活性,并结合肠黏膜细胞间紧密连接结构透射电镜观察结果、肠道通透性标志性指标测定结果综合分析。(实验方法)结果显示:在添加氧化鱼油后,(1)血清二胺氧化酶活性、内毒素和D-乳酸含量都出现显著增加(P<0.05);(2)组成肠黏膜细胞间紧密连接结构的闭合蛋白Claudin-3、Claudin-15a和胞浆蛋白ZO-1、ZO-2、ZO-3基因表达活性显著下调(P<0.05),而闭锁蛋白Occludin基因表达活性出现不同程度的下调,但差异不显著(P>0.05);(3)透射电镜观察结果显示肠黏膜细胞间紧密连接结构出现缝隙;⑷饲料中的AV值、POV值、MDA含量与闭合蛋白Claudin-3、Claudin-15a,胞浆蛋白ZO-1、ZO-2、ZO-3和闭锁蛋白Occludin基因表达活性均显示负相关关系的变化趋势,其中饲料POV值、MDA含量与胞浆蛋白ZO-1基因表达活性呈极显著负相关关系(P<0.05)。(实验结果)结果表明,在饲料中添加氧化鱼油后,氧化鱼油中的过氧化物、丙二醛等油脂氧化产物导致组成肠道黏膜细胞间紧密连接结构的蛋白基因表达活性显著下调、紧密连接物理性结构显著损伤,致使肠黏膜屏障结构的完整性被破坏、肠黏膜通透性显著增加。(实验结论) 相似文献
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季铵盐络合碘对鱼类出血病和烂鳃病的防疗效果 总被引:1,自引:0,他引:1
季铵盐络合碘具有季铵盐与碘的双重杀菌作用,是目前比较理想的防治鱼类暴发性出血病和烂鳃病外用药物.季铵盐对菌体有很强的亲和力,通过吸附、溶解菌体胞浆膜,降低病原体的表面张力,增加胞膜的通透性,造成重要酶和营养物质的漏失,水渗人菌体,使其破裂或溶解,释放出的碘(I2)则氧化菌体蛋白的活性基因,并与蛋白中的氨基酸结合而导致蛋白变性和抑制菌体的代谢酶系统,促使病原体崩解死亡. 相似文献
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平畦生产的胡萝卜由于田间土壤通透性差、易受水害等影响,肉质根常常表现为表皮不光滑,色泽差、青头比例高,而如果采用拱棚垄作栽培,生产的胡萝卜商品性状优良,经济效益较好。现将胡萝卜早春拱棚垄作栽培技术介绍如下: 相似文献
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