聚合酶链式反应抑制剂的复合消除效果研究

由于抑制性物质的存在,PCR在检测复杂生物样品中的应用潜力受到了极大的限制,因此消除其抑制作用具有非常重要的现实意义。本实验研究了BSA、纳米银和SSB三种物质及其不同组合的消除效果,结果表明分别添加1μL、2μL2mg/mLBSA、2μL10mg/mL纳米银、0.5μL、1μL0.032mg/mLSSB都可以消除由加入2μL0.3MNaCl引起的抑制,而在混合消除实验中以1μL2mg/mLBSA和1μL0.032mg/mLSSB的组合效果最佳。     

饲用金属蛋白酶的研究和应用（二）

国内外大量的研究结果表明,酶制剂能够提高畜禽的生产性能,改善动物健康,提高动物产品品质,提高饲料利用效率,从而提高畜牧业经济效益。因此,复合酶制剂在动物饲料中的应用已经非常普遍。在饲用酶制剂的生产过程中,了解和熟悉单一酶种的功能和性质非常必要。然而在国内外对高效单一饲用蛋白酶制剂的研究并不多,特别是金属蛋白酶制剂对畜禽生产性能方面的应用研究国内外的报道更少。     

饲用金属蛋白酶的研究和应用（一）

蛋白水解酶（Protease）可分为内肽酶（Endopeptidase）和外肽酶（Exopeptidase）两大类。内肽酶根据其活性基团类型一般可分为5类,即：丝氨酸蛋白酶（EC3．4．21）、半胱氨酸蛋白酶（EC3．4．22）、天门冬氨酸蛋白酶（EC3．4．23）、苏氨酸蛋白酶（EC3．4．25）和金属蛋白酶（EC3．4．24）。     

蜘蛛蛋白酶对动植物饲料原料中的蛋白质分解效果的研究

为了提高饲料中营养物质的利用率,常常在饲料中添加酶制剂（Bedford等,1992;Lindemarm等,1986）。一般畜禽饲料大多以玉米、小麦、大麦、燕麦、黑麦等谷物为主,而大多数谷物的纤维素含量较高,会影响畜禽对其消化利用率,导致生长率降低。为了解决这个问题,在饲料中添加木聚糖酶、β－葡聚糖酶、果胶酶、淀粉酶等分解酶,可提高对碳水化合物的利用率。     

胆汁基质金属蛋白酶对鸡胃肠道消化有重要作用

美国阿肯色州州立大学先前的研究显示,鸟类的胆汁中富含基质金属蛋白酶(MMP),参与细胞外基质(ECM)的降解过程。研究人员假设胆汁MMP与ECM蛋白的消化有关,用以抵抗普通蛋白酶如胰岛素、糜蛋白酶以胃蛋白酶的消化。对鸡胆汁MMP特征及其与胃肠道消化的关系研究结果显示,胆汁MMP大小为75ku,属于IV型胶原酶。为探讨浓缩饲料添加剂是否对胆汁MMP活性有调节作用,研究人员在鸡饲料中分     

蜂蛹蛋白的酶解工艺研究

以蜜蜂蜂蛹为原料,研究蜂蛹蛋白质酶解工艺,并对所得结果进行分析。结果表明,胰蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为:酶解温度为60℃,酶用量为1.5%,酶解时间1.5 h,pH值为8.0,料水比为1∶8,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为1.526 mg/mL;中性蛋白酶水解蜂蛹蛋白质最适条件为:酶解温度为45℃,酶用量为2.0%,酶解时间为1 h,pH值为7.5,料水比为1∶6,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为2.068 mg/mL;最优水解酶是中性蛋白酶;双酶水解蜂蛹蛋白质的最适条件为:总酶量为2.0%,酶量比为1∶2,酶解温度50℃,酶解时间为2 h,最适水解条件下,水解液中的氨基氮质量浓度为1.889 mg/mL。双酶同时水解的效果不及中性蛋白酶。     

土壤脱氢酶与蛋白酶对酞酸酯污染的动态响应

为评价农田土壤酞酸酯(Phthalate acid esters,PAEs)污染的生态风险,采用室内模拟法,在土壤受邻苯二甲酸二(乙基-己基)酯[Dis(2-ehylhexyl)phthalate ester,DEHP]和邻苯二甲酸二丁酯(Di-n-butyl phthalate ester,DBP)2种酞酸酯类化合物单一和复合不同污染水平下,测定土壤脱氢酶与蛋白酶活性在培养期内对这2种化合物单一污染与复合污染的动态变化。结果表明:土壤中浓度小于10 mg/kg的DBP和浓度小于20 mg/kg的DEHP对土壤脱氢酶与蛋白酶活性没有明显影响,浓度为20 mg/kg时DBP对土壤脱氢酶表现出抑制-激活-恢复效应;在DBP浓度为20 mg/kg时土壤蛋白酶短期内有明显的激活效应;当土壤中DBP或DEHP污染浓度大于或等于50mg/kg时,土壤蛋白酶与土壤脱氢酶均被显著抑制;DBP与DEHP复合污染对土壤脱氢酶表现出协同抑制效应,而对蛋白酶没有类似的效应特征,主成分分析(PAC)也佐证了以上结果。因此,土壤脱氢酶与蛋白酶可以作为土壤酞酸酯污染生态风险评价的生物学指标,但对酞酸酯不同污染水平,这两种土壤酶活性的响应特征有所差异。     

不同环境条件对球孢白僵菌HFW-05的敏感性变化

通过对温度和紫外线等条件的变化,明确了该因素对HFW-05菌株生长与毒力的影响。结果表明,25℃培养有利于提高孢子萌发率及菌株产孢量;30℃培养有利于提高菌株产酶量,最适菌株生长的温度范围是25～30℃。生测试验表明,HFW-05菌株对小菜蛾的最佳致死温度范围为25～30℃。菌株在25℃下经紫外线1 h处理后,萌发率可比对照增加12%,产孢量增加26%,表明适量紫外处理有利于菌株生长。     

不同寄主植物对舞毒蛾幼虫发育和中肠总蛋白酶的影响

以加杨(Populus canadensis)、旱柳(Salix matsudana)、兴安落叶松(Larix gmelini)和家榆(Ulmus pumi-酶活性及寄主的蛋白质量分数无相关性,取食加杨的舞毒蛾幼虫发育最快,虫体最重,旱柳次之;取食兴安落叶松和家榆的幼虫在3龄以后发育历期延长,虫体质量较轻。幼虫中肠总蛋白酶活性在3龄期因取食不同寄主存在明显差异,4龄后酶活性显著降低,不同寄主间的差异减少。la)饲养舞毒蛾幼虫,研究了不同寄主植物的蛋白营养差异性对幼虫生长发育和中肠总蛋白酶活性的影响。结果表明:4种寄主植物可溶性蛋白质量分数由高到低为旱柳、兴安落叶松、加杨和家榆。幼虫生长发育与中肠总蛋白