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构建鼠伤寒沙门菌SL1344△cr户△nsd双基因缺失突变株,并对其生物学特性进行初步研究。首先以Y7213(pREAasd)为供体菌,SL1344Acrp为受体菌进行结合转移,通过自杀性质粒介导的等位交换技术两步法筛选sI,1344的AcrpAasd双缺失株。该缺失株在有外源DAP的存在下能够正常生长,且能稳定遗传缺失的“sd基因;其血清型与亲本株SL1344Acrp及强毒株SL1344保持一致;其生化特性与亲本株基本相同,但与强毒株相比变化较明显,且生长速度明显减慢;雏鸡毒力试验结果表明其毒力较SL1344降低约10j倍。鼠伤寒沙门菌SL1344AcrpzSasd缺失株构建成功,为进一步开发以鼠伤寒沙门菌为载体的口服疫苗奠定了基础。 相似文献
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原发性肝癌是常见的恶性肿瘤之一,传统的治疗方法主要是手术切除,放射治疗和化学药物治疗。这些疗法对早期肝癌可获得较满意的疗效,但对晚期肝癌伴有局部扩散和远处转移者,疗效往往较差。分子生物学的发展使基因治疗成为可能。肝癌基因治疗策略主要包括:①免疫基因治疗,又称细胞因子基因治疗,通过转导细胞因子基因,增强机体抗肿瘤免疫能力;②自杀基因治疗,使肝癌细胞产生对某些药物前体的特异敏感性而被杀灭;③基因置换或补充,置换突变的基因或补充缺失的抑癌基因;④反义核苷酸技术,用于抑制癌基因的表达。其中自杀基因治疗是近年来研究的一个热点,本文对近年来肝癌的自杀基因治疗研究情况作一综述。1自杀基因治疗系统自杀基因是指存在于细菌、病毒和真菌中的一类基因,其编码的酶能活化一些抗感染药物前体,从而产生细胞毒作用。由于这类酶并不存在于哺乳动物中,因此,前体药物对哺乳动物细胞通常是低毒或无毒的。肿瘤的自杀基因治疗策略就是将这类基因用基因工程技术构建在一定的表达载体上并导入肿瘤细胞中,利用其在特定条件下高效表达的酶将无毒性的药物前体转化为细胞毒性药物,从而达到杀伤肿瘤细胞的治疗目的[1]。自杀基因治疗系统种类较多,主要包括单纯疱疹病毒Ⅰ型胸苷激... 相似文献
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[目的]构建未引入任何遗传标记物的溶藻弧菌vscC基因框内缺失突变株。[方法]首先以溶藻弧菌ZJ51-O基因组DNA为模板,用重叠延伸PCR(gene splicing by overlapext ension PCR,SOE-PCR)扩增法构建体外vscC基因缺失片段;扩增产物经酶切后连接至自杀质粒pDM4,再转化入大肠杆菌SY327进行克隆,筛选阳性克隆子并进行PCR分析鉴定;提取阳性克隆子的自杀重组质粒pDM4-△vscC,用热休克法将其转入到大肠杆菌S17-1中,再经接合生殖的方式将自杀重组质粒导入溶藻弧菌ZJ51-O菌株中,利用抗生素筛选策略与蔗糖反向筛选系统,挑选疑似目的突变菌株,最后利用PCR鉴定与测序分析进行确证。[结果]溶藻弧菌ZJ51-O的vscC基因框内缺失突变株构建成功。[结论]该研究为进一步研究vscC基因的功能和T3SS在溶藻弧菌致病过程中所起的作用奠定基础,同时也为溶藻弧菌的其他基因突变株的构建和研究提供了参考和试验经验。 相似文献
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《农村实用科技信息》2011,(8):92-92
4月1613中午,山东济南历城区唐王镇39岁的农民韩进,在绝望中选择了在卧室上吊自杀。压垮韩进的最后一个稻草是8分钱一斤的卷心菜。韩进明白,自己的6亩卷心菜要赔掉上万元。而这6亩地,是韩进家仅有的经济支柱。韩进的自杀,引起了全国对“菜贱伤农”的关注。 相似文献
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<正>张家口市宣化区2006-01—2013-09月自杀死亡人员共106例,对此106例死亡人员进行性别、年龄、自杀方式与自杀原因分析,借以分析宣化区自杀人员死亡特点,为社会公共卫生问题的研究及自杀的预防、自杀死亡的法医学鉴定提供参考。1案例资料1.1死者性别与年龄106例死者中,男66例,女40例,男:女1.65:1。最小年龄12岁,最大年龄86岁,20岁以下10 相似文献
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死者长已矣,生者常戚戚,轰动全国的富士康跳楼自杀事件是正在进行式还是过去式,我们不想去过多的探讨,其产生根源众说纷纭,官方、资方、当事人、专家、媒体等莫衷一是,作为农机行业工作者,这些也不是我们讨论的焦点,我们要深究的问题是我国农机生产企业应从中汲取怎样的教训,怎样避免类似事件在农机行业出现。 相似文献