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《中国兽医学报》2014,(12):1982-1988
为了获得绵羊MSTN基因敲低成纤维细胞株,克隆获得MSTN基因序列构建其真核表达载体;设计合成并筛选3种MSTN基因干涉序列(M1、M2和M3),构建相应的3种RNA干涉载体;将MSTN基因真核表达载体单独或分别与3种RNA干涉载体共转染绵羊成纤维细胞后,分别检测其对MSTN基因表达的干涉效率以获得最佳的MSTN基因RNA干涉载体;将筛选的RNA干涉载体线性化后转染绵羊成纤维细胞,通过筛选获得转基因细胞株。结果显示,成功克隆得到与GenBank中序列同源性为100%的绵羊MSTN基因序列,并获得真核表达载体pcDNA3.1(+)-MSTN;构建获得MSTN基因RNA干涉载体pRNAT-M1、pRNAT-M2和pRNAT-M3;与单独转染pcDNA3.1(+)-MSTN后293GP细胞中MSTN基因的相对表达量相比,转染干涉载体后MSTN基因相对表达量明显下降,其中pRNAT-M1干涉效率最佳;将pRNAT-M1线性化后转染绵羊成纤维细胞并利用G418筛选获得转基因阳性细胞;获得的转基因阳性细胞的细胞形态、生物学特性均呈现正常;PCR检测结果显示,pRNAT-M1已整合到细胞基因组中。上述结果表明,成功获得了MSTN基因敲低的绵羊成纤维细胞株。 相似文献
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<正>在我国高寒牧区,牦牛由于长期生活在高原的自然环境,气候条件恶劣,饲养管理粗放,一直存在着母牦牛受胎率不高,所生产的犊牦牛成活率低,且生长发育不良、生长周期长的问题。笔者根据多年工作经验,针对目前牧区实际,为提高牦牛繁殖成活率,对母牦牛孕产期护管及犊牦牛培育提出几项技术措施,与大家共同探讨。1母牦牛的妊娠期1.1母牛在妊娠初期,由于胎儿生长发育较慢,其营养需求较少,为此,对妊娠初期的母牛不再另行考虑,一般 相似文献
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106.
ADELIJIANG Wusiman DELIBAIER NUERAILI Maitiniyazi BUHELIQIANMU Yiming SAIFUDING Abula 《中国畜牧兽医》2016,43(7):1869-1875
To research on polysaccharides from Lagenaria siceraria (Molina) Standl.against Newcastle disease virus (NDV).Total polysaccharide and four different solvent extractions of Lagenaria siceraria (Molina) Standl.were extracted by the methods of hot water extraction and ethanol precipition in this study.The content of polysaccharide was measured by phenol-sulfuric acid method and infrared spectroscopy method.The safe concentration and growth of chick embryo fibroblast (CEF) were assayed by MTT method,in order to facilitated the comparison under the same level,the safe concentration was united as 78.125 μg/mL.Under the safety range of concentration,detected the block-virus activity,anti-virus activity and virus-killing activity of polysaccharides through the ways of pre-adding polysaccharides,post-adding polysaccharides and adding polysaccharides with NDV.The results showed that the direct inactivation and propagation inhibition activity of total polysaccharide and four different solvent extractions were stronger than anti-absorption function.Anti-virus inhibition rate of 70%,80% gradient alcohol precipitation of polysaccharides from Lagenaria siceraria (Molina) Standl.(LSP70,LSP80) and total polysaccharide (LSPt)were 40.41%,44.54% and 61.85%,virus-killing inhibition rate were 44.74%,58.76% and 59.38%.LSP80 had the highest virus inhibition rate as 37.14% in the block-virus activity of those five polysaccharides.In summary,70%,80% gradient alcohol precipitation and total polysaccharide in polysaccharides possessed better activity and would be as the materials for further research. 相似文献
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目的:探讨公安县胎儿畸形的发病规律和趋势。方法:收集公安县妇幼保健院2010年1月至2015年9月超声影像技术筛查胎儿畸形的8878例病案资料,从不同年份、不同孕周、不同孕龄、不同受孕月份分析胎儿畸形产前超声检出率。结果:从8878例孕妇中检出246例胎儿畸形,总检出率为2.77%。各年度胎儿畸形总检出率的差异无统计学意义(P=0.1890),各孕周胎儿畸形检出率的差异有统计学意义(P=0.0572),不同孕龄胎儿畸形检出率的差异有统计学意义(P=0.0001),不同受孕月份胎儿畸形检出率的差异有统计学意义(P=0.005)。结论:公安县胎儿畸形的发生处于相对稳定状态,但孕妇随着受孕年龄的增长,胎儿畸形检出率也随之升高,存在着受孕年龄越大,发生胎儿畸形的风险也越大的现象,有无受孕风险的高峰期尚值得进一步深入研究。 相似文献
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