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31.
受体细胞去核是核移植关键步骤之一。利用脱羰秋水酰碱(Demecolcine,DM)显示牛卵母细胞染色体的位置进行去核,主要从以下几个方面进行了试验:卵母细胞在DM中孵育浓度、卵母细胞在DM中孵育时间及卵母细胞成熟时间对显示效果的影响。结果表明:(1)成熟牛卵母细胞用离子霉素激活5 min,DM孵育2 h完全诱导去核,结果没有见到完全去核的卵母细胞;(2)挑选有第一极体的成熟牛卵母细胞,在浓度为0.5μg/mL的DM中孵育2 h显示率可达76.54%;(3)牛卵母细胞在成熟18 h可以获得73.86%的显示效果。(4)在没有去卵丘细胞的卵母细胞中添加DM取得了更好的显示效果(80.82%),囊胚的发育率也较其它组高,可达18.60%,说明未去卵丘细胞的卵母细胞添加DM更有利于显示染色体的位置,而且更有利于囊胚的发育。利用DM显示染色体的位置不仅可以高效快速的去核,同时也避免了传统去核时荧光对卵母细胞的照射。 相似文献
32.
目前自然界仍未发现天然多倍体桉树的存在,建立人工诱导桉树未减数2n花粉技术体系对于推进桉树的多倍体种质创制及遗传改良的意义重大。本研究以粗皮桉为对象,探究其花蕾发育与小孢子母细胞减数分裂进程的特点,并对不同发育阶段花蕾施加秋水仙碱处理,诱导粗皮桉花粉染色体加倍。结果表明,待观察到小孢子母细胞减数分裂开始后48 h,即处于细线期至粗线期的花蕾占比最高时,在靠近花序位置的花枝上切口并导入0.5%浓度的秋水仙碱溶液处理6 h的效果最佳,人工诱导2n花粉的有效诱导率达到31.34%。诱导获得的粗皮桉2n花粉较普通单倍性花粉的形态差异显著。本研究揭示了粗皮桉花蕾发育与小孢子母细胞减数分裂的时序性关系,建立了基于花蕾着生位置和发育时数,即时判别粗皮桉小孢子母细胞减数分裂时期的方法,明确了采用秋水仙碱溶液处理诱导粗皮桉花粉染色体加倍的最佳时机和处理条件,为进一步开展桉树多倍体种质创新工作奠定了重要基础。 相似文献
33.
34.
35.
秋水仙碱诱导蔓花生多倍体研究 总被引:1,自引:0,他引:1
采用培养基添加法、浸泡法以及先预培养后处理法对蔓花生(Arachis duranensis)叶片愈伤组织、丛生芽进行多倍体诱导.结果表明:用0.1%秋水仙碱进行48 h浸泡处理可以获得较好的诱导效果,其成活率和诱导率为66.67%和75.00%.茎、叶、气孔、保卫细胞、染色体等形态指标的检测证明4倍体较2倍体发生了显著变化. 相似文献
36.
37.
秋水仙碱在油菜小孢子培养中的应用研究进展 总被引:3,自引:0,他引:3
通过评述秋水仙碱在油菜小孢子培养中的应用研究进展及其应用潜力和前景,表明小孢子培养技术已广泛应用于油菜遗传育种研究。在油菜小孢子培养不同时期应用秋水仙碱可以加倍染色体,秋水仙碱直接处理分离小孢子能提高出胚产量,诱导小孢子出胚。 相似文献
38.
以京枣试管苗茎尖为试材,以秋水仙碱为诱变剂,通过在含不同浓度秋水仙碱的培养基中共培养来诱导京枣多倍体.结果表明:在含秋水仙碱30 mg/L的培养基中共培养30 d诱导率最高可达36.67%.通过染色体观察确定变异植株染色体数目为48条.对照植株染色体数目为24条.四倍体植株气孔长度为39.62 μm、宽度为22.06 μm、气孔密度为58.89个/mm2、活体叶绿素平均含量为11.71 spadr/mm2;分别为原二倍体植株的1.546、1.662、0.636、2.366倍. 相似文献
39.
丽江山慈菇是一种益辟坚属的小草本药用植物,鳞茎含有秋水仙碱,其野生资源远远不能满足医药生产的需求。对丽江山慈菇种子繁殖的适宜条件进行研究,表明丽江山慈菇种子的千粒重为0.3085g,种子活力为94%,其萌发的适宜光周期为18h,最适温度为25~28℃,适宜pH值为6.2~7.5,最佳浸种条件为50℃浸种12~18h,最佳低温处理条件为9℃处理5d,变温处理5d为最佳变温处理条件,最佳贮存时间为180d。 相似文献
40.
以‘陇油7号’和‘天油4号’2个抗寒性不同的白菜型冬油菜为试验材料,通过添加400μmol·L-1秋水仙碱(微管聚合抑制剂)和50μmol·L-1紫杉醇(微管聚合促进剂)试剂后,在20℃和0℃下分别处理12 h和24 h,随后采用液相色谱质谱联用仪和荧光定量PCR测定萌动种子内源激素含量及抗寒基因表达量,研究微管调节试剂对白菜型冬油菜萌动种子内源激素和抗寒基因的影响。结果表明:与对照相比,添加秋水仙碱后,在0℃和20℃处理下‘陇油7号’和‘天油4号’ABA、IAA、GA3、ZT含量明显降低;添加紫杉醇后,‘陇油7号’和‘天油4号’ABA、IAA、GA3、ZT含量明显升高。添加秋水仙碱后,与0℃处理12 h相比,0℃处理24 h时,‘陇油7号’α-tubulin、β-tubulin、MKK2、ICE1、CBF1、BrAFP1的表达量增加,‘天油4号’α-tubulin、β-tubulin、CBF1表达量增加,但MKK2、ICE1、BrAFP1的表达量降低;与20℃处理12 h相比,20℃处理24 h时... 相似文献