龙眼叶片PAL基因的克隆与表达研究

为获得龙眼PAL基因的序列，并研究该基因在转录水平的表达，采用反转录PCR获得PAL的保守序列，然后利用RACE法克隆PAL基因的3'cDNA和5'cDNA序列，再利用DNAMAN软件拼接获得PAL基因的cDNA全长序列。以actin基因作为内参进行实时荧光定量PCR，研究PAL基因在4个龙眼品种嫩叶中的表达差异。结果表明，克隆得到Dlpal基因的cDNA全长序列为2 532 bp，开放阅读框为2 101 bp，编码839个氨基酸，分子量为92.259 ku，等电点为7.38。BLAST比对结果显示，该序列与其它物种的PAL基因具有较高的同源性。实时荧光定量PCR结果表明，Dlpal基因在4个龙眼品种‘乌龙岭’、‘松风本’、‘立冬本’和‘石峡’的嫩叶间的表达量差异显著，其中在‘立冬本’中表达量最高，在松风本中表达量最低。初步证明PAL基因在不同品种的龙眼叶片中的表达量差异显著。     

1株降解黄曲霉毒素B1的解淀粉芽胞杆菌的分离鉴定及其体外脱毒效果

旨在筛选出能够高效降解黄曲霉毒素B₁（AFB₁）的菌株,并对其脱毒活性组分的脱毒效果进行研究,本研究以香豆素为唯一碳源对目标细菌进行初筛,以对AFB₁的降解率为指标进行复筛,并从形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析对筛选菌株进行鉴定;通过测定该菌株不同发酵组分对AFB₁的降解率,来定位其脱毒活性组分,同时采用CCK-8法测定活性组分降解AFB₁后对LMH细胞毒性,并研究了热处理、紫外线照射、强酸、强碱及蛋白酶K处理对活性组分脱毒作用的影响。结果显示,从样品中初筛分离到24株能够在初筛培养基生长良好的菌株,经复筛从中筛选到一株能高效降解AFB₁的菌株Y1-B1,其AFB₁降解率达到73.2%;经形态学、生理生化试验和16S rDNA序列分析确定该菌为解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。对菌株Y1-B1培养物的不同组分进行的脱毒活性研究表明,不同组分对AFB₁的降解率不同,上清液的脱毒能力最强,细菌细胞裂解物的脱毒能力下降明显,菌体悬液和菌体裂解物上清的脱毒能力最差,由此确定解淀粉芽胞杆菌Y1-B1的脱毒能力主要来源于上清液中的某种活性物质;细胞毒性结果显示,与AFB₁对LMH细胞的毒性作用相比,AFB₁被上清液降解后其产物的毒性显著降低。该脱毒活性组分对不同理化因素处理呈现出不同的表现,对高温、紫外照射抵抗力较强,对强酸、强碱抵抗力较差,蛋白酶K仅造成脱毒能力部分减弱。本研究将为解决黄曲霉毒素污染问题提供新的微生物种质资源,同时为后续微生物脱毒制剂的开发奠定基础。     

秸秆还田腐解特征与新型复式播种机研制

<正>1当前秸秆还田、稻麦种植存在的问题近年来,江苏省各地积极贯彻省委、省政府关于秸秆禁烧相关要求和江苏省人民代表大会常务委员会于2009年6月1日通过的《关于促进农作物秸秆综合利用的决定》,农作物秸秆露天焚烧现象虽得到基本遏制,但在秸秆利用技术层面上还相当脆弱,当前秸秆还田和稻麦种植存在的主要问题是秸秆还田装备的技术体系不完备、不成熟,秸秆还田效果差:1稻麦秸秆全量还田,秸秆量大,但常规旋耕机作业     

柱花草叶肉原生质体提取与瞬时表达体系构建

柱花草(Stylosanthes guianensis)是一种重要的热区豆科牧草,为利用原生质体瞬时表达体系开展柱花草基因功能研究,以20 d龄期‘热研5号’柱花草子叶为试验材料,通过正交试验考察不同因素对原生质体分离及转化效率的影响。结果表明：采用1.5%纤维素酶、1.25%离析酶、0.5 mol·L^-1甘露醇和4 mmol·L^-1MES酶解液组合,酶解时间为16 h时,原生质体的产量和活性均达到最佳,分别为(4.567×10⁶)个·g^-1和92.271%;原生质体浓度为(6×10⁵)个·mL^-1、质粒浓度为0.6μg·μL^-1,PEG-4000浓度为50%、转化时间为5 min时,转化效率最高,可达52.524%。构建了目标蛋白SgRKL1表达载体pA7-BIUTNT::SgRKL1-GFP,利用PEG介导法将其转入柱花草原生质体,激光扫描共聚焦显微镜检测结果显示SgRKL1蛋白定位于细胞膜上,说明所建立的柱花草叶肉原生质体瞬时表...     

Effects of Bacillus amylolyticus on Rumen Dry Matter Digestibility,Fermentation Parameters and Metabolites of Dairy Cows北大核心CSCD

This experiment was conducted to study the effects of Bacillus amylolyticus on rumen dry matter digestibility, fermentation parameters and metabolites of dairy cows. Experiment 1: six dairy cows with permanent fistula and had the similar parity (2 to 3 fetuses), body weight [(662 ±57) kg], lactation days [(160 ± 22) d] and milk yield [(36.1 ±3.8) kg / d], were randomly divided into 3 groups with 2 cows per group. Using 3 ×3 Latin square design, each group was extra fed 0 (control group), 5 ×109 and 5 ×1010 CFU / d Bacillus amylolyticus, the trial period was 3 periods, 13 days for each period, including 10 days for the pre-trial period and 3 days for the trial period. At the beginning of the trial period, the rumen dry matter digestibility of cows was measured by nylon bag method. Experiment 2: thirty dairy cows with similar parity [(2.5 ±0.3) fetuses], initial body weight [(559.2 ± 7. 4) kg], milk yield [(35. 2 ± 1. 5) kg / d] and lactation days [(99 ± 22) d] were randomly divided into three groups with 10 cows in each group. Cows in the 3 groups were extra fed with 0 (control group), 5 ×109 and 5 ×1010 CFU / d Bacillus amylolyticus, respectively. The pre-trial period was 10 days and the trial period was 42 days. The rumen fluid was collected on the last day of the trial period, and the rumen fermentation parameters and metabolites were determined. The results showed as follows: compared with the control group, 1) supplementary feeding of 5 × 1010 CFU / d Bacillus amylolyticus could significantly improve the rumen dry matter digestibility of dairy cows at 12, 24, 36, 48 and 72 h (P <0.05), supplementary feeding of 5 ×109 CFU / d Bacillus amylolyticus could significantly improve the rumen dry matter digestibility of dairy cows at 36 and 48 h (P <0.05); 2) supplementary feeding of 5 ×109 CFU / d Bacillus amylolyticus could significantly increase the contents of isobutyric acid, butyric acid, isovaleric acid, valeric acid, total volatile fatty acid and microbial protein in the rumen of dairy cows (P < 0. 05), supplementary feeding of 5 × 1010 CFU / d Bacillus amylolyticus could significantly increase the contents of isobutyric acid and isovaleric acid in the rumen of dairy cows and significantly reduce the rumen acetic acid / propionic acid (P < 0. 05), supplementary feeding of 5 ×109 and 5 ×1010 Bacillus amylolyticus had no effects on rumen pH and ammonia nitrogen content (P >0.05); 3) eleven metabolic pathways related to differential metabolites were detected, and ascorbic acid and alginate metabolism were significantly enriched (P < 0. 05) . In conclusion, Bacillus amylolyticus can increase the rumen dry matter digestibility, and improve the rumen fermentation function of dairy cows by affecting the content of rumen metabolites. By comprehensive analysis, supplementary feeding of 5 × 109 CFU / d Bacillus amylolyticus can achieve better effect. © 2023 Authors. All rights reserved.     

土壤中非稳定耦合渗流问题的拟解析解及压力动态特征

在考虑多孔介质中流体流动与岩土介质耦合作用的前提下，基于流固耦合力学理论，建立了土壤中非稳态渗流问题的流固耦合数学模型，并对该强非线性数学模型采用摄动法及积分变换法进行拟解析求解，讨论其压力动态特征，分析压力随饱和度S及时间t变化的情况，为实验室确定压力－饱和度－渗透率三者之间的关系提供理论依据。     

拖拉机带辅助油缸的悬挂机构速度分析

运用解析法对带有辅助油缸装置的整体式拖拉机悬挂机构进行提升速度分析,推导主油缸与辅助油缸的同步速比的数学模型,从而应用计算机编程优化悬挂机构的结构参数和工作参数。     

三阶开环控制系统根轨迹图形的研判

利用根轨迹极坐标方程对三阶系统根轨迹进行了研究，得出了三阶系统根轨迹的基本图形为双曲线的结论，并对图形的各种具体情况进行了进一步的讨论。     

不透土层上均质土壤中溶质浓度分布的解析解

从溶质扩散方程出发，针对不透水层上均质土壤的液体饱和状态，在顶层含有大量饱和溶质（如养分等）维持着扩散的条件下，进行严密的数学推证，给出均质土壤中溶质浓度分布的解析解，并分析了解的合理性，讨论了解的正确性。此解对土壤改良等类似问题具有实际应用价值，也具有重要理论意义。     

三元低共熔溶剂预处理甘蔗渣的酶解性能研究

以制糖工业副产物甘蔗渣(SCB)作为木质纤维原料,使用具有优异相转移催化能力的三乙基苄基氯化铵(TEBAC)、无毒无害的甘油(GL),以及高价态路易斯酸六水合氯化铝(ACH)组成的三元低共熔溶剂(DES)对SCB进行预处理,系统考察了DES物质的量之比、预处理温度、预处理时间、固液质量比对SCB中各组分含量和纤维素酶解效率的影响。研究结果表明：最佳预处理条件为n_TEBAC∶n_GL∶n_ACH为1∶2∶0.05、预处理时间30 min、预处理温度120℃和固液质量比1∶15,此优化条件下木质素去除率达到(86.23±2.11)%,纤维素保留率为(94.51±2.03)%,酶解纤维素转化率达到(98.21±1.02)%,相较于未处理SCB提高了2倍,葡萄糖得率高达(81.94±1.98)%,提高了1.5倍。SEM、FT-IR和XRD分析结果表明：三元DES预处理能够有效去除SCB中的木质素和半纤维素,从而使纤维素的结晶度由未预处理的41.19%提高到预处理后的65.87%。DES经过5次循环利用后,纤维素转化率和葡萄糖得率仍达...