猪凝血酶的亲和层析纯化及其酶原的激活研究

采用柠檬酸钡作吸附剂、ＥＤＴＡ溶解的方法从猪血浆提取凝血酶原，建立了凝血酶原激活的简单方法。并以环氧氯丙烷活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ为载体，采用１－乙基－３－（３－二甲氨丙基）碳二亚胺进行肝素的固定化，将固定化肝素用于猪凝血酶的亲和层析纯化。结果表明，通过一步亲和层析将猪凝血酶粗品提纯了８．２倍，获得了比活超过１１００Ｕ／ｍｇ的凝血酶，收率为６０％。     

小鼠卵母细胞的孤雌激活与ES细胞样集落分离

对小鼠卵母细胞进行孤雌激活用于单性生殖研究。取成年昆明白小鼠进行超数排卵,乙醇激活,同小鼠输卵管上皮细胞共培养并添加mM16培养基培养至早期囊胚阶段,移至小鼠胎儿成纤维细胞饲养层上,换成ES细胞培养液继续培养,分离消化ICM,重新接种,对分离出的ES样细胞集落进行分离培养鉴定。结果显示,小鼠卵母细胞激活率为96.99%,2-细胞发育率为93.17%,桑椹胚发育率为80.33%,囊胚发育率为73.22%。小鼠孤雌激活囊胚中分离的ES样细胞集落具有一系列ES细胞所特有的特征,如呈现出岛屿状形态,碱性磷酸酶染色为阳性,体外能够自发分化成上皮样或单个散在分布的细胞等。试验证明,小鼠孤雌胚中可以分离出ES细胞样集落。     

METFORMIN短期内对蛋鸡体AMPK活性的影响

选用日龄、体重及产蛋率相近的产蛋高峰期的新罗曼蛋鸡20只,按两两配对的原则,分为2个处理组,每个处理5个重复,每个重复2只鸡;其中实验组蛋鸡日粮中含有0．8％浓度的Metformin;配对组蛋鸡采食日粮除不合Metformin外,日粮成分与实验组相同,并按实验组前1d的采食量供给;正式实验期为5d。实验组与配对组相比,实验组蚤鸡肝脏中AMPK活性提高了24．82％（P〈0．3）,而卵巢中AMPK活性仅提高了10．13％（P〈0．6）;实验组蛋鸡肝脏中TG下降了13．61％（P〈0．1）;血清中VLDL—C含量下降了12．66％（P〈0．6）,同时在直径分别为2,1,0．5cm的卵泡中,卵黄胆固醇含量分别下降了9．18％（P〈0．01）,9．72％（P〈0．01）,17．04％（P〈0．05）。实验结果表明Metformin提高了蛋鸡体内AMPK的活性,并降低了蛋鸡体内脂质的合成及卵黄中胆固醇的含量。     

猪无透明带卵不同孤雌激活方法研究

研究了离子霉素处理时间、处理浓度和不同胚胎基础培养基对猪无透明带卵孤雌激活的影响。结果表明：（1）10μM离子霉素处理5min、7min、10min的激活率64.81%、66.67%、68.75%差异不显著（P〉0.05）,但显著高于处理3min的激活率36.17%。（2）分别以10μM、15μM离子霉素处理10min的激活率68.18%、65.11%差异不显著（P〉0.05）,但显著高于5μM的激活率40.54%（P〈0.05）。（3）分别以NCSU-23＋4%BSA和TCM199＋4%BSA作为基础培养基进行培养,其激活率68.51%、62.50%无显著差异（P〉0.05）。试验结果表明：10μM离子霉素处理5min联合2mmol/L6-DMAP处理2h激活,以NCSU-23＋4%BSA为胚胎基础培养基能有效提高猪无透明带卵孤雌激活的激活率。     

UK114基因的克隆和表达载体的构建

本研究采用PCR法扩增得到重组UK114 cDNA序列,将其克隆于T-easy载体并进行了序列测定与分析。结果表明该序列全长1 017 bp,有一个开放的阅读框(40 nt~450 nt),可编码137个氨基酸(14.2 kDa),与UK114的序列比较,同源性为91%,突变的86个核苷酸中都为无义突变,开放阅读框中仅有一个核苷酸突变。此外,本实验构建了pBV114表达载体,选择阳性克隆提取质粒进行酶切,琼脂糖检测获得约1 kb和3.7 kb的两个片段。     

规范农村土地流转 激活农村经济发展

今天,农民外出务工、经商的人数越来越多,农村土地承包经营权流转的行为也越来越频繁。如何在稳定土地承包关系的基础上积极引导和规范土地流转,显得越来越迫切。笔者在石屏县农村土地承包合同管理办公室全县土地承包经营权流转情况调研成果的基础上,就相关问题提出一些个人见解。     

运动对高脂血症大鼠骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1表达的影响

目的通过研究高脂血症大鼠运动后骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1的变化，探讨过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1在运动改善大鼠能量代谢中的作用。方法将26只大鼠分为3组，正常对照组9只，高脂膳食组（高脂组）9只，高脂膳食＋60min运动组（运动组）8只。测定各组骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1基因和蛋白表达的变化。结果高脂组甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇较对照组显著升高（P〈0．05）；运动组甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇较高脂组显著降低（P〈0．05），高密度脂蛋白胆固醇较高脂组显著升高（P〈0．05）。与对照组比较，运动组大鼠骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1mRNA表达显著增高（P〈0．01）；与高脂组大鼠比较，运动组大鼠骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1mRNA表达显著增高（P〈0．05）。运动组骨骼肌过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1蛋白表达较对照组增加了2．14倍（P〈0．05），较高脂组增加了2．02倍（P〈0．05）。结论运动能够通过过氧化体增殖物激活型受体γ辅激活因子1改善骨骼肌的能量代谢，从而改善机体的脂质代谢，防止糖代谢异常和动脉粥样硬化的发生。     

WO3复合La2/3Ca1/3MnO3的磁电阻效应与导电行为研究

采用溶胶-凝胶法制备了不同摩尔比的WO3复合La2/3Ca1/3MnO3(LCMO)样品,探讨了零场下LCMO样品的阻温关系及在不同磁场下的磁电阻效应.分析了体系在高温区和低温区的导电行为,并在此基础上讨论了磁场对导电机制的影响及起因.     

激活中国高端肥料——高目标探索高塔技术的史丹利公司

<正>“中国人了不起,你们做出了一项震惊世界肥业的事情。”最近,前来史丹利化肥有限公司“取经”的德国肥料专家赫伯,在看到史丹利公司建起的高塔复合肥生产线后,禁不住发出了由衷地赞叹。近年来,美国、德国、挪威等国家的肥料专家和企业纷纷前来考察学习,交流经验。算起来,赫伯是国外第16批前来考察学习高塔复合肥技术的外国客人。     

猪卵母细胞孤雌激活的研究

从卵母细胞孤雌激活的机制及影响因素,猪卵母细胞的激活,猪孤雌胚死亡主要原因,提高卵母细胞孤雌激活效果的技术途径,以及对孤雌激活的研究意义和发展前景等方面,对猪卵母细胞孤雌激活研究进行了综述.