广藿香化学成分的研究进展

广藿香(Pogostemon cablin)以干燥地上部分入药,是著名“十大南药”之一,具有芳香化浊、开胃止呕、发表解暑之功效.文章对近年来广藿香化学成分的研究进展作一综述,为其进一步开发利用提供一定的理论依据.     

利用单因子和正交设计双重实验方法优化广藿香ISSR-PCR实验体系

为了建立广霍香优化的ISSR-PCR反应体系,首先通过单因子试验选定其各影响因子比较适宜的浓度范围,再利用正交试验设计的方法,对影响广藿香ISSR-PCR反应的5种因素4水平进行优化试验。结果表明：广藿香ISSR-PCR的优化反应体系最终确定为：在25μL反应体系中,含DNA模板40 ng,Mg2＋浓度为2.5 mmol·L^-1,引物浓度为0.3μmol·L^-1,TaqDNA聚合酶用量为1.5 U,dNTPs浓度为150μmol·L^-1。PCR扩增程序为：94℃预变性5 min,然后按94℃变性45 s,52.7℃退火45 s,72℃延伸90 s,进行40个循环,最后72℃延伸7 min,4℃保存。     

广藿香~(60)Co-γ诱变体植株遗传多样性的ISSR分析

从广藿香的同一大田植株上取外植体构建了一批无菌材料。将这批无菌材料分别经过0,45,60,75,90 Gy的~(60)Co-γ射线辐照诱变处理,获得了172份Co-γ射线诱变体材料和1份对照无菌材料(CK;0 Gy)。分别提取这173份无菌材料的基因组DNA,用14条ISSR有效引物对173份种质材料的基因组DNA进行PCR扩增,共获得297条扩增产物,其中多态性条带为68条,诱变材料的多态位点比率PPB为43.13%,观测等位基因数Na=1.431 3,有效等位基因数Ne=1.257 3,Nei's基因多样性H=0.146 5,Shannon信息指数I=0.217 5。173份供试材料之间遗传关系系统树由UPGMA法,根据所得遗传相似系数矩阵构建。系统树图表明,当GS(遗传相似系数)值取0.09GS0.42时,可以把供试的173份材料划分为2个类群:即Ⅰ类群和对照(CK);当GS=0.44时,可把Ⅰ类群分为2个亚类群,即Ⅱ类群和90 Gy-43号材料;当GS值取0.46GS0.48时,又可把Ⅱ类群分为2支,即Ⅲ类群和75 Gy-13号材料。虽然有部分不同辐射剂量处理的诱变植株聚类在一起,但是总体上是,相同辐射剂量处理组的诱变植株聚为一类。结果表明,广藿香无菌材料经用~(60)Co-γ射线辐照诱变后发生变异频率较大,为此,~(60)Co-γ射线辐照诱变可作为广藿香种质创新的一种有效手段。     

5种化感物质对广藿香幼苗生长及抗氧化酶活性的影响

分别采用苯甲酸、香草酸、水杨酸、对羟基苯甲酸、丙二酸等5种化感物质溶液浇灌盆栽广藿香幼苗,研究其对幼苗的生长、超氧化物岐化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和膜脂过氧化产物(MDA)的影响。结果表明,5种化感物质对广藿香幼苗生长有明显的影响,总体表现出"低促高抑"的变化趋势。这5种化感物质处理的广藿香幼苗,其叶片MDA含量和POD活性均随处理浓度的增加而升高,SOD活性则表现出"先上升后下降"的趋势,广藿香幼苗生长对化感物质种类和浓度具有双重依赖性,10.0 mmol·L-1对羟基苯甲酸能显著抑制广藿香幼苗的生长。     

连作土壤施加竹炭对广藿香幼苗生长的影响

采用盆栽试验,探究连作土壤施加不同比例的竹炭[V(竹炭)∶V(土壤)分别为0∶100、1∶99(BC1)、5∶95(BC2)、10∶90(BC3)]对广藿香幼苗农艺性状、抗氧化酶活性、有效成分含量及土壤中酚酸质量分数的影响,为施用竹炭对缓解广藿香连作障碍的大田应用提供科学依据。结果表明:广藿香幼苗的株高、鲜质量、叶面积、根长、根数及根系活力在BC3处理30 d时较连作土(CS)的提高11.25%、66.67%、75.31%、28.57%、34.07%和53.25%。植株过氧化物酶、过氧化氢酶、超氧化物歧化酶活性在BC2处理30 d时较CS的增加1.76倍、2.92倍和2.22倍,丙二醛质量摩尔浓度在处理20 d时较CS的降低60.11%。BC3处理30 d的广藿香植株百秋李醇和总挥发油质量浓度较CS的增加1.18倍和1.33倍,BC2处理30 d的土壤检测的7种酚酸较CS的减少2种,BC3处理的减少4种。     

广藿香油成分分析及在卷烟中应用研究

通过比较4种不同前处理方法对广藿香油挥发性成分的影响,分别采用液液萃取(LLE)、分散液液微萃取(DLLME)、固相微萃取(SPME)、顶空萃取(HS)结合气相色谱-质谱(GC-MS)分析鉴定广藿香油中化学成分及含量。结果表明,分散液液微萃取法操作简单、快速,可鉴别出广藿香油挥发性化学成分29种,主要致香成分为广藿香醇(26.39%)、δ-愈创木烯(14.50%)、α-愈创木烯(12.35%)、刺蕊草烯(5.87%)、芳樟醇(5.02%)、α-广霍香烯(4.52%)等。将广藿香油应用于卷烟加香效果评价,能够减小刺激性、改善卷烟余味并对丰富烟香有明显效果。     

不同激素组合对广藿香试管苗再生芽发生的影响

[目的]为广藿香的快速繁殖及育种提供新的方法.[方法]以MS为基本培养基,添加6-BA(6-苄氨基嘌呤)、IAA(吲哚乙酸)、NAA(萘乙酸)等3种激素,单独或配合使用诱导广藿香试管苗再生芽的发生,共设计10个组合.[结果]除对照组的诱导率较低(19.2％)外,其他激素组均优于对照组,其中有5组诱导率达到100％,包括6-BA与IAA或与NAA组合中的4组,以及单一激素组即6-BA 0.5 mg/L组.繁殖系数及生长状态均有所不同,繁殖系数超过4.0的有2组,分别是MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L及MS+6-BA 0.5 mg/L 组,且这2组差异不大.[结论]以 MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L 及 MS+6-BA 0.5 mg/L 为较佳的诱导广藿香试管苗再生芽发生的激素组合.     

广藿香重金属污染及潜在生态风险评价

采用国标法测定10个产区广藿香Pogostemon cablin(Blanco)Benth.药材及其生境土壤中Cu、Pb、Cd、Cr、As、Hg的含量,以非参数检验分析6种重金属元素在广藿香药材、生境土壤中的分布规律,并结合富集系数确定广藿香对重金属的富集情况。以单因子污染指数(P_i)、Nemerow污染指数(P_综合)和潜在生态风险指数(RI)对土壤样品进行污染等级评价。结果表明,生境土壤全部达标;广藿香药材中重金属含量总体合格,4个产区药材中Hg有不同程度的超标。重金属Pb、Cu、Cd在不同生境土壤中的分布、土壤Pb、Cr、As与药材中的含量、不同产地广藿香对Pb的富集均有显著性差异。P_综合和P_i分别显示四会广藿香种植区域土壤、长丰土样Cd、莲塘Pb以及四会Pb、Cd均达警戒限,其他生境土壤都属清洁级别;RI值方面,各产区均属于轻微污染级别。不同产地的广藿香植株都会富集土壤的Cd、Hg。因此,从药材安全性考虑,在种植广藿香时,应该选择重金属含量较低的土壤进行种植,确保药材安全性。     

广藿香抗青枯病鉴定技术规范

广藿香是唇形科植物Pogostemon cablin（Blance）Benth.,以叶、梗入药,味辛,性微温。芳香化湿,和胃止吐,祛暑解表。主治湿阻中焦之脘腹痞闷,食欲不振,呕吐,泄泻,外感暑湿之寒热头痛,湿温初期的发热身困,胸闷恶心,鼻渊,手足癣。广藿香原产于菲律宾、马来西亚等国,宋代引入我国,是我国重要的南药之一。广藿香分为石牌香、高要香、湛江香和海南香。广藿香在海南省万宁市有悠久的种植历史,但广藿香青枯病,能造成广藿香大量死株,威胁到广藿香产业的生存和发展。     

广藿香青枯病室内药剂防治筛选试验

室内药剂筛选试验表明,可杀得2000(铜基杀菌剂)对广藿香青枯病病原菌有抑制作用;枯立脱(丙硫咪唑,唏唑醇)、青枯灵(噻茼茂)、链霉素、细菌诺(叶枯唑)和新植霉素时广藿香青枯病痛原菌没有抑制作用.