3个广藿香品种染色体制片技术优化与计数

以广藿香根尖为试验材料袁采用常规压片法比较取材时间尧预处理液尧处理时间尧酶液浓度尧酶解时间尧 低渗时间对广藿香染色体制片效果的影响袁采用去壁低渗法对石牌尧海南尧高要3 个广藿香品种进行染色体计数遥结 果表明院上午10:30~11:00 取材尧冰水混合液处理24 h尧4%混合酶液渊纤维素酶和果胶酶各占4%袁g/V冤酶解30 min尧低 渗15 min 所得广藿香染色体制片效果较好曰3 个广藿香品种分散良好尧清晰的50 个分裂相细胞袁70%以上的细胞染 色体数目为2n=64袁3 个广藿香品种在染色体数目上没有差异遥     

石牌广藿香的细胞悬浮培养

以石牌广藿香无菌苗幼嫩叶片为外植体,通过愈伤组织诱导和培养、筛选及细胞的液体培养,在含0.05 mg/L 2,4-D和0.5 mg/L KT的MS液体培养基中获得了分散性良好的悬浮细胞,建立了广藿香细胞悬浮培养体系.研究培养基中植物生长调节剂、继代培养时间等因素对细胞生长、分化的影响.结果表明:0.05 mg/L2,4-D和0.5 mg/L KT能促进细胞的快速生长,而0.5～1.0 mg/L BA促进细胞的分化;以继代培养时间为15～18 d细胞进行接种,接种量8 g/100 mL时,悬浮细胞到达最大生长量,细胞鲜重最高达到511.2 g/L.     

广藿香挥发油提取条件优化及其方法比较

以海南广藿香药材为试材,采用正交试验设计优化了水蒸气蒸馏和超临界C02萃取挥发油的条件,并对2种提取方法给予比较.结果表明,影响水蒸气蒸馏提取的显著性因素是浸泡时间和提取时间,加水量为非显著性因素.本试验范围内,提取的最佳条件是:浸泡时间5h,提取时间4h,加水量是药材的7倍,其挥发油得率为1.59%;而影响超临界CO2萃取的显著因素是萃取压力和萃取时间,萃取温度和物料粒度为非显著性因素,本试验范围内,提取的最佳条件是:萃取压力18 Mpa,萃取时间2.5 h,物料粒度40目,萃取温度为40℃,挥发油得率为2.60%,是水蒸气蒸馏法得率(1.59%)的1.64倍.     

青枯菌侵染广藿香的致病因素及寄主植物相关酶活性分析

[目的]探讨青枯菌不同接种体诱导后,广藿香表型的变化,并考察诱导后寄主植物体内POD酶活性的变化。[方法]以青枯菌不同接种体(菌体、粗毒素、菌液)进行侵染试验,观察侵染1~7 d后植株表型的变化。利用紫外分光光度法进行POD酶活性的测定。[结果]在含菌体的培养基上,大部分广藿香植株没有明显的发病症状;而菌液与粗毒素处理组,植株茎叶逐渐萎蔫。POD酶活性测定结果表明,未经诱导的对照植株酶活性较低,7 d内变化不大;经诱导处理的植株体内POD酶活性均升高,菌液组升幅最大,粗毒素组次之,菌体组升幅最小。[结论]青枯菌胞外分泌物是青枯菌致病的重要因素,诱导的广藿香体内POD酶活性呈动态变化,上升的幅度与接种体的致病性呈正相关。     

广藿香2种表皮毛的发育解剖学研究

通过石蜡切片及扫描电镜观察发现：广藿香的茎、叶上密集分布着腺毛和非腺毛2种表皮毛,二者的外部形态及发育过程明显不同．根据腺毛头部形状可把腺毛分为盾状腺毛和头状腺毛,二者均发生得很早,它们的原始细胞都来源于原表皮,一般在茎尖第1和第2片叶原基的原表皮细胞以及茎的1～2节间原表皮细胞中开始发生．其发育过程可分为原始细胞形成期、基细胞形成期、柄细胞形成期和头部的形成4个阶段．非腺毛的发生晚于腺毛,但发生时期却较长．它一般在第2对幼叶上开始发生,而且在成熟叶和具初生结构茎上也可发生、发育．原始细胞产生后,开始进行平周分裂,形成基细胞核头部细胞,头部细胞经一次或多次分裂发育形成非腺毛的数个子细胞．     

广藿香化学成分的研究进展

广藿香(Pogostemon cablin)以干燥地上部分入药,是著名“十大南药”之一,具有芳香化浊、开胃止呕、发表解暑之功效.文章对近年来广藿香化学成分的研究进展作一综述,为其进一步开发利用提供一定的理论依据.     

不同供氮水平对广藿香产量与品质的影响

为探讨不同供氮水平对广藿香产量和品质的影响,采用砂培试验,研究了广藿香在3、 6、 12、 18、 24 mmol/L 5种不同氮水平下（用N1、 N2、 N3、 N4、 N5表示）氮营养、 生长性状、 产量、 挥发油含量和品质的变化。结果表明,随着供氮水平的提高,广藿香生长性状参数、 氮营养、 植株鲜（干）重量、 挥发油含量增加,茎和叶的油分含量下降。在广藿香的茎挥发油中,N1和N2处理的12种成分含量均显著高于N4与N5。-广藿香烯、 -愈创木烯、 苦橙油醇、 -愈创木烯、 反式-丁香烯、 广藿香醇、 广藿香酮含量以N1处理最高。刺蕊草烯、 -广藿香烯、 -愈创木烯、 -榄香烯、 异石竹烯含量在N2处理最高。在广藿香叶挥发油所测定的成分中,除了-广藿香烯外, N1和N2 处理的其他成分含量均显著高于N4与N5。-广藿香烯、 -愈创木烯、 -愈创木烯、 -荜澄茄烯、 异石竹烯、 -愈创木烯、 反式-丁香烯、 广藿香醇、 广藿香酮含量在N1处理最高。刺蕊草烯、 -广藿香烯、 -榄香烯含量以N2处理最高。广藿香茎和叶挥发油所测定的12种有效成分N1与N2及N4与N5处理之间无显著差异。总之提高氮水平有利于增加挥发油含量,但油分含量降低。     

广藿香植株水提液的化感自毒作用

以广藿香组培驯化苗为试材,采用盆栽试验,研究了广藿香根、茎、叶水提液对广藿香幼苗根系活力、总叶绿素含量、丙二醛(MDA)含量、过氧化物酶(POD)活性、过氧化氢酶(CAT)活性和超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响,利用高效液相色谱法(HPLC)检测广藿香根、茎、叶水提液中原儿茶酸、绿原酸、香草酸、咖啡酸、丁香酸、阿魏酸、苯甲酸和肉桂酸含量,及香草酸、丁香酸、阿魏酸、苯甲酸和肉桂酸对广藿香幼苗的化感作用,以期为广藿香连作障碍的机制及成因提供参考依据.结果 表明:广藿香根、茎、叶水提液对广藿香幼苗具有化感自毒作用,且具有浓度效应,叶水提液的化感自毒作用最显著,其酚酸的种类和含量高于根和茎的.叶片水提液中酚酸含量为苯甲酸＞原儿茶酸＞咖啡酸＞阿魏酸＞丁香酸＞香草酸＞绿原酸＞肉桂酸.5种酚酸物质对广藿香的株高、根长、根数、鲜质量、叶面积、根系活力、总叶绿素含量均有不同程度的抑制影响,对叶片的POD、CAT、SOD活性及MDA含量有升高的影响,作用均具有浓度效应.5种酚酸对广藿香幼苗的化感作用为肉桂酸＞苯甲酸＞阿魏酸＞丁香酸＞香草酸,广藿香的连作障碍与其器官的水溶性酚酸类自毒物质可能有密切关系,肉桂酸、苯甲酸等酚酸类物质可能是其主要的化感自毒物质.     

GC法测定马香苓口服液中百秋李醇含量研究

试验旨在建立测定马香苓口服液中百秋李醇含量的研究方法。本研究采用气相色谱法,其色谱条件是使用色谱柱HP-5毛细管柱;柱温采用程序升温（初始温度150 ℃,保持18 min,以50 ℃/min速率升至280 ℃,保持5 min）;进样口温度为280 ℃;载气：高纯氮气;流速1 mL/min;进样量1 μL,分流比20：1;检测器为氢火焰离子化检测器,温度为280 ℃;氢气流速40 mL/min,空气流速370 mL/min;分别进行系统适用性试验、专属性试验、线性范围考察、检测限和定量限的确定、精密度试验、稳定性试验、重复性试验、加样回收率试验、耐用性试验,并对10批样品进行了含量测定。结果显示,专属性溶液中的溶剂峰、药液的杂质峰与主成分峰能达到有效分离且分离度符合要求（R ≥ 1.5）,表明该方法系统适用性良好;阴性对照溶液未检出色谱峰,表明样品中其他成分不干扰测定;百秋李醇定量限和检测限分别为2.842和0.812 μg/mL;百秋李醇检测质量浓度在15.86~1 015 μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系（y=0.869x-10.45,R²=0.999,n=7）。精密度试验、稳定性试验（日内和日间精密度）、重复性试验的平均RSD分别为0.90%、1.63%和1.83%、2.90%,其RSD均在可控范围内（RSD ≤ 3%）;平均加样回收率为95.36%,RSD=2.82%（n=6）,表明所建立的气相色谱法检测百秋李醇的含量回收率良好;进行耐用性试验,最终验证所建立的色谱方法可以稳定检测百秋李醇的含量。经方法学验证,该方法准确稳定,简便可行,能够作为马香苓口服液君药广藿香中百秋李醇的含量控制方法,同时也为该制剂质量控制提供了一种有效的检测方法,暂定本品中广藿香药材按百秋李醇计不少于47.53 μg/mL。     

广藿香挥发油对其组织培养幼苗化感自毒作用的研究

以广藿香挥发油及广藿香组织培养幼苗为试材,采用组织培养法,研究广藿香挥发油对其组织培养幼苗生长的影响。结果表明:广藿香挥发油对其组培苗的株高、主根长、鲜重、干重、生根数等具有不同程度的抑制作用;随挥发油浓度的升高,对扦插苗株高、主根长、鲜重、干重、生根数的抑制作用越明显,并导致其幼苗POD、CAT活性的升高和MDA含量的增加。