IL-18对人近端肾小管上皮细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨白细胞介素18(IL-18)对肾小管上皮细胞增殖及凋亡的作用以进一步明确其在慢性肾病进展中的作用。方法在体外实验中应用不同质量浓度(0.1、1、10、100 mg/L)的IL-18分别处理人类近端肾小管上皮细胞株(HK-2)24、36、48、72h,应用改良的MTT法检测细胞增殖,应用Hoechst33258染色法检测细胞凋亡。结果同一质量浓度不同作用时间,随时间的延长其光吸收值(A值)增加,两两比较差异有统计学意义(均P<0.05);同一作用时间不同质量浓度时的A值,各组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);IL-18作用24、36、48h随时间增加凋亡百分数与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),IL-18作用72h细胞凋亡明显增多,且随质量浓度增加而增加,凋亡百分数与对照组相比差异有统计学义(P<0.01)。结论慢性肾病状态下IL-18可能具有促进肾小管萎缩以至丢失的作用。     

橄榄优良品系G18适应性试验

在高州市三个试点开展橄榄G18品系适应性试验,结果如下：利用8～9年生橄榄树改接后第4年及1年生砧木嫁接后第9年,其平均单株产果量达22．9kg,单株平均增产15．1kg,产量增益216．82％;平均单位树冠投影面积产果量达0．77kg／m^2,平均增产200．01％;试点间单株产果量和单位树冠投影面积产果量的变异系数（CV）分别接近或小于试点内的CV;改接株平均冠幅生长量与对照接近,但1年生砧木嫁接株的比对照大18．75％。G18嫁接亲和性较好,生长较快,丰产性好,立地适应性强,是一个值得在生产上大力推广的优良品系。     

上海临港滨海河道夏季周丛生物群落演替特征

于2021年6月26日-7月10日对上海浦东地区芦潮引河3段河流进行连续挂板采样，研究不同污染程度河流中周丛生物的分布特征及时间变化。共采集12次，获得36个样品，对18S rDNA V4可变区进行高通量测序。结果发现，主要类群为轮虫、绿藻、纤毛虫。不同污染程度河流周丛生物群落组成呈现显著性差异(p<0.01)，污染最严重的Y点样品优势属为Pentatrocha、Lagenidium、Dinovorax、Symbiodinium等，其特有属有Calycofera、Crucigeniella等；污染较为严重的H点样品的优势属为Ptygura、Oedogonium、Philodina、Physocypria等，特有属有Eccrinidus、Hyphochytrium等；无污染的G点样品优势属为Cyclotella、Prunus、Vorticella、Chlamydomonas等，特有属有Actinochloris、Adelina、Albugo等。生物群落与环境因子的趋势对应显示，TDS、盐度、pH和污染程度为影响周丛生物群落变化的显著性因素。不同生物对于环境因子的响应程度不同，优势属对于环境因子的选择性趋势更加明显。主要周丛生物类群（纤毛虫、轮虫、绿藻）在不同污染程度河流中群落丰度变化不同，调查周期内，在受到污染的G点和Y点周丛生物群落出现了绿藻代替纤毛虫的群落演替趋势。本研究为受污染水体周丛生物生态功能评估及环境评估提供基础数据，也为周丛生物（膜）作为一种环保绿色、造价低廉的污染物去除方法提供理论基础。     

猪IFN-δ5的表达纯化及其抗PEDV感染的作用分析

【目的】试验旨在建立大量表达及纯化猪δ5干扰素(pIFN-δ5)的方法,并对其抗猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)感染的作用进行分析。【方法】根据GenBank中pIFN-δ5序列(登录号:NM_001164854.1)设计引物,以猪肝脏组织cDNA为模板进行PCR扩增;将目的基因连接入经EcoRⅤ和Hind Ⅲ双酶切的线性化pET-32a (+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,优化诱导表达条件,并进行SDS-PAGE和Western blotting检测;pIFN-δ5蛋白大量表达后使用镍离子亲和层析柱纯化,并测定蛋白纯度;采用细胞病变抑制法检测pIFN-δ5的干扰素效价,采用CCK8方法检测pIFN-δ5的细胞毒性,进一步测定其抗PEDV的感染能力。【结果】试验成功构建了重组表达质粒pET-pIFNδ5,经诱导条件摸索发现,在D_{600 nm}值为0.5~0.6、IPTG浓度为0.8 mmol/L、37 ℃诱导条件下,目的蛋白pIFN-δ5主要表达于菌体裂解上清中;经大量表达并纯化后可获得纯度＞95%的pIFN-δ5蛋白。使用VSV/MDCK细胞滴定系统检测pIFN-δ5的比活性为5×10⁴U/mg;CCK8检测表明pIFN-δ5的细胞毒性较小。实时荧光定量PCR、Western blotting和间接免疫荧光检测结果表明,pIFN-δ5具有显著抗PEDV感染能力。【结论】本试验建立了表达和纯化pIFN-δ5的方法,通过一系列的体外抗病毒试验证实pIFN-δ5具有良好的抗PEDV感染的活性,为将pIFN-δ5作为抗病毒药物及临床应用奠定了基础。     

贵州威宁草海湿地表层沉积物有机质时空分布及其来源辨析

为探究岩溶湿地生态环境的营养状况及污染物来源,以贵州威宁草海岩溶湿地为例,通过对其不同水文期表层沉积物中总有机碳(TOC)和总氮(TN)的含量分布及其稳定碳同位素(δ¹³C)、稳定氮同位素(δ¹⁵N)和C/N的分析,探讨了沉积物有机质的分布特征及来源。结果表明:草海湿地表层沉积物丰水期TOC、TN含量变化范围分别为3.75%~32.71%和0.39%~2.90%,平均值分别为14.34%和1.52%;枯水期TOC、TN含量变化范围分别为1.26%~34.11%和0.18%~2.49%,平均值分别为12.46%和1.12%;丰水期TOC、TN含量略高于枯水期,这与丰水期大量降雨带来的陆源输入有关,同时在空间分布上二者在两个水文期均表现为西南和湖心区域大于东部和西北区域。草海湿地表层沉积物丰水期δ¹³C、δ¹⁵N分布范围分别在-2.55%~-1.97%和0.03%~0.37%,平均值分别为-2.23%和0.24%;枯水期δ¹³C、δ¹⁵N分布范围分别在-2.75%~-1.96%和0.10%~0.46%,平均值分别为-2.35%和0.30%;其中δ¹³C的空间分布特征表现为东区较西区明显偏负,说明东区污染严重,这是由于东区毗邻县城,污染物来源复杂,沉水植物遭到破坏,使得湖泊自身生产力降低。通过端元混合模型对沉积物来源进行定性和半定量分析,结果表明:草海湿地表层沉积物有机质的主要来源为土壤有机质、浮游藻类及淡水水生植物,同时由于草海岩溶湿地具有较高的初级生产力,沉积物中有机质来自内源的贡献大于来自外源的输入。     

用正交设计优化M13mp18RFDNA转染大肠杆菌TG1的条件

采用正交设计（Ｌ９（３４））对影响Ｍ１３ｍｐ１８转染其宿主大肠杆菌ＴＧ１的３个因素：热激温度、时间和ＤＮＡ量各设３个水平进行优化。直观分析表明：热激温度是主要的，其次是ＤＮＡ量，最后是热激时间。直观分析确定的较优转染条件为：热激温度４４℃、时间１２０ｓ、ＤＮＡ量６００ｐｇ。验证转染试验表明：在该条件下Ｍ１３ｍｐ１８对ＴＧ１的转染效率较高。